| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 1 绪论 | 第8-16页 |
| ·Research Proceeding of Ferritin | 第8-9页 |
| ·Main physiological roles of ferritin in plant | 第8页 |
| ·Introduction to ferritin | 第8页 |
| ·Some feasible application of ferritin | 第8-9页 |
| ·基因沉默发生的原因 | 第9-10页 |
| ·位置效应的基因沉默 | 第9-10页 |
| ·转录水平的基因沉默 | 第10页 |
| ·转录后基因沉默 | 第10页 |
| ·转录后基因沉默现象的发现及定义 | 第10-11页 |
| ·转录后基因沉默的作用机制 | 第11-12页 |
| ·PTGS诱导技术 | 第12-13页 |
| ·RNAi技术的应用 | 第13-14页 |
| ·高通量的基因功能研究 | 第13页 |
| ·基因治疗 | 第13页 |
| ·基因表达调控 | 第13-14页 |
| ·PTGS技术在作物遗传改良中的应用 | 第14页 |
| ·培育抗病毒作物 | 第14页 |
| ·作物品质遗传改良 | 第14页 |
| ·展望 | 第14-15页 |
| ·研究目的和意义 | 第15-16页 |
| 2 NtFer1,NtFer2Plant Expression Vector Construction and Tobacco Transformation | 第16-34页 |
| ·Materials | 第16-17页 |
| ·Bacterial strains and plasmids | 第16页 |
| ·Plant materials | 第16页 |
| ·Media | 第16-17页 |
| ·Enzymes and Kits | 第17页 |
| ·Primer sequence | 第17页 |
| ·Experimental procedures | 第17-27页 |
| ·NtFer1,NtFer2 cloning and sequecing | 第17-24页 |
| ·Subcloning of NtFer1 and NtFer2 | 第24-26页 |
| ·Electroporation of construct into agrobactcrium strain EHA105 | 第26-27页 |
| ·表达正义、反义铁蛋白基因烟草的遗传转化 | 第27页 |
| ·结果与分析 | 第27-31页 |
| ·烟草总RNA质量分析 | 第27-28页 |
| ·RT-PCR获得NtFer1,NtFer2基因 | 第28页 |
| ·重组质粒PCR检测 | 第28页 |
| ·目的基因片段双酶切 | 第28-29页 |
| ·植物表达载体pBI121双酶切 | 第29-30页 |
| ·重组植物表达载体PCR检测 | 第30页 |
| ·重组表达载体双酶切检测 | 第30-31页 |
| ·重组农杆菌PCR检测 | 第31页 |
| ·转铁蛋白基因烟草的获得 | 第31页 |
| ·讨论与小结 | 第31-34页 |
| ·反义RNA技术的有效实施 | 第31-32页 |
| ·烟草叶片处理对转化后再生的影响 | 第32-33页 |
| ·转化过程对转化的影响 | 第33页 |
| ·选择培养方法对转化效率的影响 | 第33-34页 |
| 3 Molecular Detection | 第34-49页 |
| ·Materials | 第34-35页 |
| ·Plant materials | 第34页 |
| ·Reagents and solutions | 第34-35页 |
| ·Enzymes and kits | 第35页 |
| ·Primers | 第35页 |
| ·Experimentalprocedures | 第35-42页 |
| ·Genetic analysis of T1 generation | 第35页 |
| ·转化烟草的PCR检测 | 第35-37页 |
| ·Probe synthosis for Northern blot | 第37-38页 |
| ·Northern Blot | 第38-42页 |
| ·结果与分析 | 第42-46页 |
| ·烟草T0代PCR检测 | 第42-43页 |
| ·T1代转基因烟草的遗传分析 | 第43-44页 |
| ·T1代烟草的分子检测 | 第44-46页 |
| ·讨论与小结 | 第46-49页 |
| ·DNA水平上的分析 | 第46-47页 |
| ·RNA水平上的分析 | 第47-49页 |
| 4 Functional verification of NtFer1 and NtFer2 | 第49-72页 |
| ·Materials | 第49页 |
| ·Plant materials | 第49页 |
| ·Media | 第49页 |
| ·Instruments | 第49页 |
| ·Experimental procedures | 第49-52页 |
| ·T1 generation plant stress treatment | 第49页 |
| ·Physiological traits determination | 第49-52页 |
| ·Results and Analysis | 第52-69页 |
| ·Plant height comparison | 第52-54页 |
| ·Plant fresh weight comparison | 第54-56页 |
| ·Chlorophyll content comparison | 第56-58页 |
| ·Relative total iron content comparison | 第58-60页 |
| ·SOD activity comparison | 第60-62页 |
| ·POD activity comparison | 第62-64页 |
| ·Comparison of net photosynthetic rate of transgenic plants | 第64-69页 |
| ·Discussion | 第69-72页 |
| ·铁蛋白基因功能的分析 | 第69-70页 |
| ·转铁蛋白基因烟草不同铁浓度下生理生化的反应 | 第70-72页 |
| 5 NtFer1和NtFer2的相互作用 | 第72-78页 |
| ·材料和方法 | 第72-73页 |
| ·将NtFer1和NtFer2克隆到pBT和pTRG载体中 | 第72页 |
| ·共转化 | 第72-73页 |
| ·结果与分析 | 第73-76页 |
| ·蛋白互作涂板分析 | 第73-75页 |
| ·阳性克隆的链霉素抗性筛选 | 第75-76页 |
| ·讨论 | 第76-78页 |
| ·细菌双杂交的优点 | 第76-77页 |
| ·对铁蛋白互作的解释 | 第77-78页 |
| 结论 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-83页 |
| 附录 | 第83-84页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85-86页 |
