摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-30页 |
·植物功能候选基因的分析策略 | 第11-21页 |
·寻找功能候选基因 | 第11-17页 |
·功能候选基因的验证 | 第17-21页 |
·植物细胞程序化死亡相关功能候选基因 | 第21-24页 |
·植物PCD研究概况 | 第21页 |
·植物PCD的基本特征 | 第21-22页 |
·植物PCD相关基因 | 第22-23页 |
·水稻PCD相关基因 | 第23-24页 |
·RNA干涉技术及其在基因功能研究中的应用 | 第24-28页 |
·RNA干涉现象的发现过程 | 第24-25页 |
·RNA干涉的分子机制 | 第25-26页 |
·RNA干涉的特点 | 第26-27页 |
·植物RNA干涉载体特征 | 第27页 |
·应用Gateway技术构建RNA干涉载体 | 第27-28页 |
·目的和意义 | 第28-30页 |
第二章 构建水稻功能候选基因的RNA干涉载体 | 第30-43页 |
·材料和方法 | 第30-36页 |
·水稻材料 | 第30页 |
·试剂 | 第30页 |
·RNA干涉区段选择及引物设计 | 第30页 |
·TRIzol法提取籼稻IR64总RNA | 第30-31页 |
·RT-PCR | 第31页 |
·attB-PCR产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第31页 |
·纯化回收attB-PCR产物 | 第31-32页 |
·BP反应 | 第32-34页 |
·LR反应 | 第34-35页 |
·表达克隆转化农杆菌LBA4404感受态细胞 | 第35-36页 |
·结果与分析 | 第36-43页 |
·RNA干涉区段选择与PCR引物设计 | 第36-37页 |
·水稻总RNA检测 | 第37页 |
·attB-RCR产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第37页 |
·BP反应阳性克隆检测 | 第37-40页 |
·表达克隆转化农杆菌LBA4404 | 第40-43页 |
第三章 RNA干涉载体对籼稻IR64的遗传转化 | 第43-50页 |
·材料和方法 | 第43-46页 |
·材料和试剂 | 第43页 |
·农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第43-45页 |
·转化条件的优化 | 第45-46页 |
·结果与分析 | 第46-50页 |
·出愈率以及愈伤生长状态的研究 | 第46-47页 |
·提高愈伤组织分化频率的研究 | 第47-48页 |
·潮霉素筛选浓度的确定 | 第48-50页 |
第四章 讨论 | 第50-53页 |
·RNA干涉载体的构建方法 | 第50-51页 |
·影响RNA干涉效率的因素 | 第51页 |
·应用Gateway技术构建RNA干涉载体注意事项 | 第51-53页 |
第五章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
附录Ⅰ RNA干涉载体示意图 | 第60-62页 |
附录Ⅱ 水稻转化组织培养图片 | 第62-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
作者简历 | 第65页 |