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稻瘟病菌两个假定G蛋白偶联受体的功能分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
1 引言第11-22页
   ·稻瘟病菌的生长发育及侵染致病的信号途径第11-16页
     ·稻瘟病菌的生长发育第11-12页
     ·稻瘟病菌致病过程中相关的信号途径第12-16页
       ·依赖于cAMP的蛋白激酶途径第13页
       ·MAP蛋白质激酶级联机制第13-16页
   ·G蛋白偶联受体(GPCR)的结构、功能及其主要研究进展第16-19页
     ·G蛋白第16页
     ·G蛋白偶联受体第16-17页
       ·GPCR的结构第16-17页
       ·GPCR的分类第17页
     ·GPCR与G蛋白的关系第17-18页
     ·GPCR的功能与应用第18-19页
   ·GPCR在不同生物中的研究情况第19-22页
     ·GPCR在细菌中的研究情况第19页
     ·GPCR在哺乳动物中的研究应用情况第19页
     ·GPCR在植物真菌中的研究情况第19-22页
2 材料与方法第22-39页
   ·试验使用的菌株、质粒、试剂和培养基等材料第22-23页
   ·稻瘟病菌基因组DNA的提取第23-24页
   ·DNA琼脂糖电泳第24页
   ·PCR扩增(普通PCR、RT-PCR)第24-27页
   ·PCR产物的克隆第27页
   ·E.coliDH5α感受态细胞的制备第27页
   ·感受态细胞的转化第27-28页
   ·质粒DNA的提取第28页
   ·质粒酶切与连接第28-29页
   ·稻瘟病菌原生质体的制备第29页
   ·稻瘟病菌原生质体转化和转化子的验证第29-30页
   ·敲除突变体的互补第30页
   ·稻瘟病菌基因组DNA Southern杂交第30-36页
     ·探针的准备第30-32页
     ·稻瘟病菌基因组DNA的消化及电泳第32-35页
     ·Southern杂交第35-36页
     ·免疫显色第36页
   ·稻瘟病菌总RNA的提取与分析第36-37页
   ·稻瘟病菌突变体的表型观察第37-39页
     ·生长速率测定与菌落颜色第37页
     ·产孢量测定第37页
     ·孢子萌发率的测定第37-38页
     ·附着胞形成率及洋葱表皮侵入实验第38页
     ·对植物致病性的测定第38-39页
       ·水稻育苗及接种方法第38页
       ·大麦叶片离体接种第38-39页
3 结果与分析第39-53页
   ·稻瘟病菌两个假定GPCR基因结构的生物信息学分析第39-41页
   ·稻瘟病菌假定GPCRsMGG_02855和MGG_04698基因敲除突变体的获得第41-45页
   ·基因MGG_02855缺失突变体的互补第45-46页
   ·两个GPCR基因与稻瘟病菌生长发育以及致病性的关系第46-53页
     ·生长速度和菌丝颜色分析第46-47页
     ·产孢量测定第47-48页
     ·孢子萌发率、附着胞形成率及洋葱表皮侵入分析第48-50页
     ·致病性分析第50-52页
     ·RT-PCR分析GPCR与已知信号途径的关系第52-53页
4 讨论与小结第53-55页
参考文献第55-63页
致谢第63页

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