| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 前言 | 第9-30页 |
| ·共生固氮 | 第9-17页 |
| ·根瘤菌的生理性状与分类 | 第9-10页 |
| ·豆科植物根瘤形成的过程 | 第10-11页 |
| ·早期共生信号转导的分子机制 | 第11-16页 |
| ·钙离子流动与钙离子激增 | 第16-17页 |
| ·离子通道 | 第17-20页 |
| ·离子通道的分类、功能与研究方法 | 第17-18页 |
| ·钙离子通道 | 第18-20页 |
| ·酵母双杂交系统 | 第20-26页 |
| ·酵母双杂交的原理 | 第20-22页 |
| ·酵母双杂交系统的局限性 | 第21-22页 |
| ·酵母单杂交系统 | 第22-23页 |
| ·三杂交系统 | 第23-24页 |
| ·反向双杂交系统和反向单杂交系统 | 第24页 |
| ·哺乳动物细胞双杂交系统和细菌双杂交系统 | 第24-25页 |
| ·核外双杂交系统 | 第25-26页 |
| ·研究的背景、目的和意义 | 第26-30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-45页 |
| ·材料 | 第30-32页 |
| ·菌株与质粒 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·营养液和培养基配方 | 第30-31页 |
| ·常用贮存液和缓冲液配方 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第32页 |
| ·方法 | 第32-45页 |
| ·RNA的抽提和纯化 | 第32-34页 |
| ·RT-PCR合成cDNA第一链 | 第34页 |
| ·诱饵质粒的构建 | 第34页 |
| ·cDNA文库的构建和鉴定 | 第34-40页 |
| ·用Oligo(dT)引物合成cDNA第一链 | 第35-36页 |
| ·通过LD-PCR(Long Distance)扩增双链cDNA | 第36-37页 |
| ·双链cDNA的纯化 | 第37页 |
| ·酵母感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| ·将ds cDNA和pGADT7-Rec转化AH109感受态细胞 | 第38页 |
| ·在SD/-Leu的平板上筛选转化子 | 第38-39页 |
| ·收集转化子 | 第39页 |
| ·菌落PCR | 第39页 |
| ·酵母质粒的抽提 | 第39-40页 |
| ·酵母双杂交筛选 | 第40-42页 |
| ·检测DNA-BD融合蛋白的转录活性 | 第40页 |
| ·诱饵菌株的毒性测试 | 第40-41页 |
| ·诱饵菌株和文库菌株杂交 | 第41-42页 |
| ·RT-PCR | 第42-43页 |
| ·POLLUX-RCK-pGADT7与CASTOR-RCK-pGADT7重组子的构建 | 第43页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞(电转)的制备以及转化 | 第43-44页 |
| ·大肠杆菌质粒的抽提 | 第44-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-55页 |
| ·CASTOR-RCK-BD Bait的构建 | 第45-46页 |
| ·百脉根cDNA文库的构建以及鉴定 | 第46-47页 |
| ·CASTOR-RCK-BD Bait与cDNA文库的杂交和阳性克隆的筛选 | 第47-48页 |
| ·菌落PCR分析阳性克隆子 | 第48页 |
| ·对阳性克隆的pGADT7-cDNA质粒进行测序和生物信息学分析 | 第48-53页 |
| ·阳性克隆在百脉根中表达量分析 | 第53页 |
| ·POLLUX-RCK-pGADT7与CASTOR-RCK-pGADT7重组子的构建 | 第53-54页 |
| ·CASTOR与CASTOR以及CASTOR与POLLUX的相互作用 | 第54-55页 |
| 4 总结与讨论 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 论文发表情况 | 第64页 |
