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鸡球虫E.tenella叶酸合成途径关键酶PPPK-DHPS cDNA的克隆及其株间变异研究

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一章 文献综述第9-25页
第二章 鸡Etpppk-dhps ORF预测、克隆与序列分析第25-67页
 1 材料与方法第25-35页
   ·主要仪器第25页
   ·材料第25-27页
   ·方法第27-35页
     ·鸡E.tenalla pppk-dhps基因ORF的预测第27-28页
     ·pppk-dhps ORF引物设计第28页
     ·RACE引物设计第28页
     ·鸡E.tenella单卵囊扩增第28页
     ·鸡E.tenella裂殖子总RNA提取第28-29页
     ·pppk-dhps的克隆与序列分析第29-31页
     ·鸡E.tenolla PPPK-DHPS功能结构分析第31-35页
 2 结果与分析第35-63页
   ·pppk-dhps ORF预测结果第35页
   ·RT-PCR结果第35-36页
   ·转化菌落的PCR鉴定第36页
   ·测序结果第36-41页
   ·pppk-dhps基因编码蛋白序列分析第41页
   ·pppk-dhps基因信号肽序列预测结果第41-43页
   ·鸡E.tenella PPPK-DHPS细胞亚定位预测第43页
   ·各顶复门原虫PPPK-DHPS氨基酸序列比对结果第43-46页
   ·各项复门原虫序列模块(Blocks)分析第46-52页
   ·序列模块的序列图标(Logo)表示第52-54页
   ·鸡E.tenella PPPK-DHPS结构预测第54-55页
   ·RACE扩增pppk-dhps全长cDNA结果第55-63页
     ·5’-RACE和3’-RACE扩增结果第55-56页
     ·5’-RACE和3’-RACE阳性克隆的鉴定结果第56-58页
     ·pppk-dhps全长cDNA测序结果第58页
     ·不同原虫pppk-dhps全长cDNA序列比对结果第58-63页
 3.讨论第63-67页
第三章 鸡E.tenella PPPK-DHPS株间变异研究第67-75页
 1 材料与方法第67-70页
   ·材料第67-68页
   ·方法第68-70页
     ·引物设计第68页
     ·各虫株总RNA提取第68页
     ·RT-PCR第68-69页
     ·RT-PCR产物的回收纯化第69页
     ·RT-PCR产物与pMD 18-T vector的连接第69页
     ·连接产物转化E.coli JM109(CaCl_2法)第69页
     ·转化克隆的PCR鉴定第69页
     ·测序与序列多态性分析第69-70页
 2 结果与分析第70-73页
   ·鸡E.tenalla不同地方株pppk-dhps氨基酸序列比对结果第70-73页
 3.讨论第73-75页
结论第75-76页
参考文献第76-82页
附录一第82-84页
附录二第84-85页
致谢第85-86页
作者简历第86页

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