摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-25页 |
第二章 鸡Etpppk-dhps ORF预测、克隆与序列分析 | 第25-67页 |
1 材料与方法 | 第25-35页 |
·主要仪器 | 第25页 |
·材料 | 第25-27页 |
·方法 | 第27-35页 |
·鸡E.tenalla pppk-dhps基因ORF的预测 | 第27-28页 |
·pppk-dhps ORF引物设计 | 第28页 |
·RACE引物设计 | 第28页 |
·鸡E.tenella单卵囊扩增 | 第28页 |
·鸡E.tenella裂殖子总RNA提取 | 第28-29页 |
·pppk-dhps的克隆与序列分析 | 第29-31页 |
·鸡E.tenolla PPPK-DHPS功能结构分析 | 第31-35页 |
2 结果与分析 | 第35-63页 |
·pppk-dhps ORF预测结果 | 第35页 |
·RT-PCR结果 | 第35-36页 |
·转化菌落的PCR鉴定 | 第36页 |
·测序结果 | 第36-41页 |
·pppk-dhps基因编码蛋白序列分析 | 第41页 |
·pppk-dhps基因信号肽序列预测结果 | 第41-43页 |
·鸡E.tenella PPPK-DHPS细胞亚定位预测 | 第43页 |
·各顶复门原虫PPPK-DHPS氨基酸序列比对结果 | 第43-46页 |
·各项复门原虫序列模块(Blocks)分析 | 第46-52页 |
·序列模块的序列图标(Logo)表示 | 第52-54页 |
·鸡E.tenella PPPK-DHPS结构预测 | 第54-55页 |
·RACE扩增pppk-dhps全长cDNA结果 | 第55-63页 |
·5’-RACE和3’-RACE扩增结果 | 第55-56页 |
·5’-RACE和3’-RACE阳性克隆的鉴定结果 | 第56-58页 |
·pppk-dhps全长cDNA测序结果 | 第58页 |
·不同原虫pppk-dhps全长cDNA序列比对结果 | 第58-63页 |
3.讨论 | 第63-67页 |
第三章 鸡E.tenella PPPK-DHPS株间变异研究 | 第67-75页 |
1 材料与方法 | 第67-70页 |
·材料 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-70页 |
·引物设计 | 第68页 |
·各虫株总RNA提取 | 第68页 |
·RT-PCR | 第68-69页 |
·RT-PCR产物的回收纯化 | 第69页 |
·RT-PCR产物与pMD 18-T vector的连接 | 第69页 |
·连接产物转化E.coli JM109(CaCl_2法) | 第69页 |
·转化克隆的PCR鉴定 | 第69页 |
·测序与序列多态性分析 | 第69-70页 |
2 结果与分析 | 第70-73页 |
·鸡E.tenalla不同地方株pppk-dhps氨基酸序列比对结果 | 第70-73页 |
3.讨论 | 第73-75页 |
结论 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-82页 |
附录一 | 第82-84页 |
附录二 | 第84-85页 |
致谢 | 第85-86页 |
作者简历 | 第86页 |