| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 前言 | 第11-33页 |
| ·生物界分类、超嗜热古菌及SULFOLOBUS TOKODAII STR.7简介 | 第11-13页 |
| ·生物分类及超嗜热古菌概述 | 第11-12页 |
| ·Sulfolobus tokodaii Str.7 | 第12-13页 |
| ·古菌的基因组特征及超嗜热古菌对研究DNA代谢的意义 | 第13-14页 |
| ·古菌的基因组特征 | 第13-14页 |
| ·超嗜热菌对研究DNA代谢的意义 | 第14页 |
| ·超嗜热古菌中的DNA复制、重组和修复相关蛋白的研究现状 | 第14-23页 |
| ·DNA复制相关蛋白 | 第14-18页 |
| ·古菌中DNA重组相关蛋白的研究 | 第18-19页 |
| ·古菌中的DNA修复 | 第19-20页 |
| ·DNA修复及其与复制重组的关系以及重组修复的概念 | 第20页 |
| ·细胞中的复制叉停滞、修复与复制叉再启动 | 第20-23页 |
| ·各种解旋酶及其在生物体内的功能 | 第23-32页 |
| ·什么是解旋酶 | 第23页 |
| ·解旋酶的分类 | 第23-24页 |
| ·DEXD box DNA解旋酶 | 第24-25页 |
| ·解旋酶的作用机制 | 第25-28页 |
| ·目前已广泛研究的解旋酶 | 第28-32页 |
| ·本试验的立题依据和基本思路 | 第32-33页 |
| ·立题依据 | 第32页 |
| ·基本思路 | 第32-33页 |
| 第二章 DNA解旋酶ST0590、ST0147和PCNA三个亚基基因的克隆和蛋白的表达纯化 | 第33-41页 |
| 引言 | 第33页 |
| ·实验材料和试剂 | 第33页 |
| ·实验材料 | 第33页 |
| ·试剂及仪器 | 第33页 |
| ·实验方法和操作步骤 | 第33-38页 |
| ·目的基因的克隆 | 第33-37页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第37-38页 |
| ·结果 | 第38-40页 |
| ·基因克隆 | 第38-40页 |
| ·蛋白表达纯化 | 第40页 |
| 小结 | 第40-41页 |
| 第三章 DNA解旋酶ST0147的性质研究 | 第41-65页 |
| 引言 | 第41-42页 |
| ·实验材料和试剂 | 第42页 |
| ·实验方法和操作步骤 | 第42-47页 |
| ·DNA底物制备 | 第42-44页 |
| ·DNA结合实验的检测原理及过程 | 第44页 |
| ·ATPase活性检测原理及过程 | 第44-45页 |
| ·解旋酶活性检测原理及过程 | 第45-46页 |
| ·退火活性和复制叉退回活性检测原理及过程 | 第46-47页 |
| ·结果与讨论 | 第47-63页 |
| ·DNA结合试验和ATPase活性检测 | 第47-51页 |
| ·解旋酶活性依赖于ATP | 第51页 |
| ·ST0147的解链活性可以不同程度的被PCNA亚基激活 | 第51-54页 |
| ·ST0147对复制叉母链和新生链解链活性的比较 | 第54-57页 |
| ·ST0147解链极性检测 | 第57-59页 |
| ·退火活性检测 | 第59-61页 |
| ·复制叉退回活性检测 | 第61-63页 |
| ·小结 | 第63-65页 |
| 第四章 DNA解旋酶ST0590的性质研究 | 第65-75页 |
| 引言 | 第65页 |
| ·材料方法及实验原理 | 第65页 |
| ·结果与讨论 | 第65-74页 |
| ·ST0590 ATPase活性检测 | 第65-66页 |
| ·ST0590的解旋酶活性依赖于ATP | 第66页 |
| ·ST0590的解链活性可以被Mg~(2+)激活 | 第66-67页 |
| ·ST0590的解链活性可以不同程度的被PCNA亚基激活 | 第67-69页 |
| ·ST0590对复制叉母链和新生链解链活性的比较 | 第69-70页 |
| ·ST0590在复制叉处对两条新生链的解链强度一致 | 第70-71页 |
| ·极性测定显示ST0590没有明显的解链极性 | 第71页 |
| ·退火活性检测 | 第71-74页 |
| ·小结 | 第74-75页 |
| 第五章 总结与展望 | 第75-77页 |
| ·总结 | 第75-76页 |
| ·展望 | 第76-77页 |
| 参考文献 | 第77-91页 |
| 附1:本文所使用的仪器及试剂 | 第91-92页 |
| 附2:本文所涉及的基因序列代码 | 第92-93页 |
| 附3:本文所涉及的蛋白序列代码 | 第93-94页 |
| 附4:本文所涉及的培养基 | 第94-95页 |
| 附5:用于PCR扩增的引物序列 | 第95-96页 |
| 附6:PCR扩增及双酶切的体系 | 第96-98页 |
| 附7:标记寡核苷酸体系 | 第98-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第101-102页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第102页 |
