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山羊—绵羊异质体细胞克隆胚的构建及线粒体DNA的杂合性分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
文献综述第11-33页
 第一章 哺乳动物体细胞克隆的研究进展第11-33页
   ·哺乳动物同种体细胞核移植研究进展第12-13页
   ·哺乳动物异种体细胞核移植研究进展第13-16页
     ·哺乳动物异种核移植第13-14页
     ·哺乳动物异种妊娠第14-16页
   ·哺乳动物异种核移植技术路线及对核移植结果的影响第16-25页
     ·供体细胞的准备及其对核移植结果的影响第16-17页
     ·受体卵母细胞的准备及其对核移植结果的影响第17-22页
     ·核移植过程第22页
     ·重构胚的融合第22-23页
     ·重构胚的激活第23-25页
     ·融合到激活时间的影响第25页
   ·异种核移植中线粒体问题第25-29页
     ·线粒体的生物学功能第25页
     ·异种核移植中线粒体的杂合性第25-27页
     ·分析异种核移植胚线粒体杂合性的方法第27-29页
   ·异种动物核移植研究存在的问题第29-30页
     ·体细胞的选择和传代第29页
     ·核质相容性第29-30页
     ·供体核重新编程第30页
     ·供体细胞端粒长度第30页
     ·重组胚胎移植受体的选择第30页
   ·异种核移植研究应用及展望第30-33页
     ·治疗性克隆第30-31页
     ·保护濒危动物中的应用第31页
     ·生产转基因动物第31-32页
     ·促进基础学科的发展第32-33页
试验研究第33-54页
 第二章 FSH 及不同发情天数牛血清对绵羊卵母细胞体外成熟 及孤雌胚发育的影响第33-40页
   ·材料与方法第33-35页
     ·试剂第33-34页
     ·仪器第34页
     ·发情牛血清(ECS)的制备第34页
     ·绵羊卵巢的采集第34页
     ·绵羊卵巢卵母细胞的采集及体外成熟培养第34页
     ·成熟卵母细胞的孤雌激活和孤雌胚的体外培养第34-35页
     ·试验设计第35页
     ·统计分析第35页
   ·结果第35-37页
     ·不同浓度的 FSH 对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活的影响第35-36页
     ·添加不同发情天数的 ECS 对绵羊卵母细胞体外成熟和孤雌胚体外发育的影响第36-37页
     ·不同浓度 ECS 对绵羊卵母细胞体外成熟和孤雌激活的影响第37页
   ·讨论第37-39页
     ·FSH 对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌激活的影响第37-38页
     ·发情牛血清(ECS)对绵羊卵母细胞体外成熟及孤雌胚发育的影响第38-39页
   ·结论第39-40页
 第三章 山羊-绵羊核移植重构胚的构建及电融合参数的确定第40-47页
   ·材料与方法第40-43页
     ·试剂、用品与仪器第40-41页
     ·绵羊卵母细胞的采集和成熟培养`第41页
     ·体细胞核移植胚胎的获得第41-42页
     ·电融合试验设计及统计分析第42-43页
   ·结果与分析第43-44页
     ·不同电场强度对山羊-绵羊重构胚电融合率和早期发育的影响第43页
     ·不同电脉冲次数对山羊-绵羊重构胚电融合率和早期发育的影响第43-44页
     ·不同平衡时间对山羊-绵羊重构胚早期发育的影响第44页
   ·讨论第44-45页
   ·小结第45-47页
 第四章 山羊-绵羊异质体细胞克隆胚中线粒体DNA 的杂合性分析第47-54页
   ·材料和方法第47-50页
     ·主要试剂和仪器第47-48页
     ·山羊-绵羊异质克隆胚的构建第48页
     ·引物设计第48页
     ·模板 DNA 的制备第48-49页
     ·PCR 扩增及酶切反应鉴定第49页
     ·特异性酶切片段的定量分析第49页
     ·山羊-绵羊异质克隆胚中mtDNA 的杂合性分析第49-50页
     ·数据分析第50页
   ·结果第50-52页
     ·供受体细胞中mtDNA 的 PCR 扩增结果及酶切产物分析第50页
     ·酶切产物的定量分析第50-51页
     ·异质克隆胚中供受体mtDNA 的杂合性分析第51-52页
   ·讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
结论第54-55页
参考文献第55-65页
附录第65-68页
缩略词表第68-69页
致谢第69-70页
作者简介第70页

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