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黄瓜花叶病毒2b基因及其与卫星RNA互作研究

致谢第1-9页
摘要第9-14页
 1.黄瓜花叶病毒褪绿分离物基因组全长克隆及侵染性克隆构建第9-10页
   ·b蛋白第55位亮氨酸决定CMV-CB7在心叶烟上系统性坏死第10页
 3.决定黄瓜花叶病毒satRNA在烟草上高含量积累的位点研究第10-11页
 4.黄瓜花叶病毒2b基因对其satRNA积累量的影响第11-12页
 5.SatRNA介导黄瓜花叶病毒在烟草上基因组含量降低与2b相关第12-14页
Abstract第14-20页
 1. Construction of infectious transcripts RNA for Cucumber mosaic virus Phy strain第14-15页
 2. Leu 55 of Cucumber mosaic virus 2b protein was genetic determinant for necrosis pathotype in N. glutinosa第15-16页
 3. Genetic mapping of the satellite RNA of Cucumber mosaic virus for high accumulation in N. tabaccum第16-18页
 4. Effect of Cucumber mosaic virus 2b gene on satRNA accumulation第18页
 5. Satellite RNA-mediated reduction in accumulation of Cucumber mosaic virus genomic RNAs in N. tabacum related to 2b gene第18-20页
第一章 文献综述第20-45页
   ·黄瓜花叶病毒生物学特点第20页
   ·黄瓜花叶病毒的分组第20-23页
   ·黄瓜花叶病毒基因组结构特点第23-24页
   ·黄瓜花叶病毒各个基因在病毒致病过程中的作用第24-30页
     ·1a蛋白第26页
     ·2a蛋白第26页
     ·2b蛋白第26-28页
     ·3a蛋白第28-29页
     ·CP蛋白第29-30页
   ·黄瓜花叶病毒卫星RNA研究进展第30-33页
     ·黄瓜花叶病毒的satRNA的结构特点第30-31页
     ·黄瓜花叶病毒satRNA的复制第31-32页
     ·黄瓜花叶病毒的satRNA的对辅助病毒的症状调控第32-33页
   ·本论文内容与目的第33-35页
     ·研究内容第34页
     ·本论文的意义第34-35页
   ·参考文献第35-45页
第二章 黄瓜花叶病毒侵染性克隆构建的研究第45-62页
   ·材料与方法第46-50页
     ·毒源和寄主第46页
     ·试剂和引物第46-47页
     ·ELISA检测第47页
     ·病毒粒子提取第47-48页
     ·CMV和satRNA克隆第48-49页
     ·CMV-Phy和CMV-satRNA体外转录及接种第49页
     ·CMV-dsRNA提取第49-50页
   ·结果与分析第50-57页
     ·引起辣椒褪绿黄化症状的病原物的确定第50-51页
     ·CMV-Phy基因组全长克隆第51-52页
     ·基因组结构与系统进化分析第52-55页
     ·体外转录及侵染性测定第55-56页
     ·CMV-Phy与satRNA假重组测定第56-57页
   ·讨论第57-61页
   ·参考文献第61-62页
第三章 黄瓜花叶病毒CB7株系2b基因55位亮氨酸引起心叶烟坏死研究第62-83页
   ·材料与方法第63-71页
     ·毒源和CMV RNA2的cDNA克隆第63页
     ·CMV-CB7的基因组全长的克隆第63页
     ·嵌合型CMV RNA2的构建第63页
     ·不同2b基因的pF209~*2b的构建第63-66页
     ·基因嵌合型2b基因的构建第66-67页
     ·2b~(CB7)和2b~(35#)基因的互补突变第67-68页
     ·CMV-CB7和CMV-Fny基因组cDNA体外转录第68页
     ·CB7-CMV与CMV-Fny各个对应基因组的互换第68-70页
     ·CMV-Fny突变体的活性分析第70页
     ·Northern blot杂交第70-71页
   ·结果与分析第71-79页
     ·CMV-CB7基因组全长序列及其侵染性克隆活性分析第71页
     ·CMV-CB7与CMV-Fny假重组型的症状分析第71-73页
     ·CMV-Fny F5C3和CMV-Fny C5F3基因组含量的分析第73-74页
     ·不同2b基因的CMV-Fny突变体的症状分析第74-75页
     ·CMV-Fny2b~(CB7)和CMV-Fny2b~(35#)嵌合体病毒症状分析第75-76页
     ·2b蛋白第55位亮氨酸决定CMV-CB7在心叶烟系统性坏死反应第76-77页
     ·CMV-Fny2b~(CB7)和CMV-Fny2b~(35#)第55位互补突变体基因组含量分析第77-79页
   ·讨论第79-81页
   ·参考文献第81-83页
第四章 决定黄瓜花叶病毒卫星RNA在烟草高含量积累的位点研究第83-98页
   ·材料与方法第84-88页
     ·毒源和寄主植物第84页
     ·CMV-satRNA的克隆第84页
     ·Yi-satRNA和Yn12-satRNA互补性定点突变第84页
     ·Yi-satRNA和Yn12-satRNA体外转录和接种第84-85页
     ·Yi-satRNA和Yn12-satRNA与CMV的假重组型病毒第85页
     ·dsRNA检测CMV与Yi-satRNA和Yn12-satRNA假重组第85-86页
     ·Northern blot杂交第86-88页
   ·结果与讨论第88-96页
     ·Yi-satRNA和Yn12-satRNA序列比较及其与CMV的假重组第88页
     ·Yi-satRNA和Yn12-satRNA对CMV-CB7的症状状调控第88-90页
     ·Yi-satRNA/Yn12-satRNA及其突变体积累量分析第90-92页
     ·CMV-CB7的RNA1决定Yn12-satRNA不能在烟草中积累第92-96页
   ·参考文献第96-98页
第五章 黄瓜花叶病毒2b基因对其satRNA积累量的影响第98-108页
   ·材料与方法第99-102页
     ·毒源和寄主植物第99页
     ·CMV-Fny 2b基因缺失第99-100页
     ·Rs-satRNA与CMV的假重组第100页
     ·取样和Rs-satRNA的相对定量第100-102页
   ·结果与讨论第102-106页
     ·不同寄主对Rs-satRNA积累量的影响第102-103页
     ·不同2b基因对Rs-satRNA积累量的影响第103-106页
   ·参考文献第106-108页
第六章 卫星RNA引起CMV基因组积累量降低与2b的关系研究第108-125页
   ·材料与方法第109-112页
     ·毒源第109页
     ·体外转录第109页
     ·寄主植物与病毒接种和取样第109页
     ·CMV-Fny/CMV-Fny△2b与Rs-satRNA假重组于烟草的检测第109-110页
     ·CMV-Fny/CMV-Fny△2b和Rs-satRNA的相对定量第110-112页
   ·结果与分析第112-121页
     ·Rs-satRNA对CMV-Fny在寄主上症状影响第112-113页
     ·Rs-satRNA对烟草中CMV-Fny基因组积累量的影响第113-116页
     ·CMV-Fny△2b在寄主上的症状反应第116页
     ·Rs-satRNA对CMV-Fny△2b基因组的影响第116-118页
     ·Rs-satRNA对CMV-Fny接种叶的基因组含量的影响第118-119页
     ·Rs-satRNA对CMV-Fny长距离运输效率的影响第119-121页
   ·讨论第121-123页
   ·参考文献第123-125页
附录1 重要试剂的配制第125-128页
附录2 已经发表的论文第128页

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