致谢 | 第1-9页 |
摘要 | 第9-14页 |
1.黄瓜花叶病毒褪绿分离物基因组全长克隆及侵染性克隆构建 | 第9-10页 |
·b蛋白第55位亮氨酸决定CMV-CB7在心叶烟上系统性坏死 | 第10页 |
3.决定黄瓜花叶病毒satRNA在烟草上高含量积累的位点研究 | 第10-11页 |
4.黄瓜花叶病毒2b基因对其satRNA积累量的影响 | 第11-12页 |
5.SatRNA介导黄瓜花叶病毒在烟草上基因组含量降低与2b相关 | 第12-14页 |
Abstract | 第14-20页 |
1. Construction of infectious transcripts RNA for Cucumber mosaic virus Phy strain | 第14-15页 |
2. Leu 55 of Cucumber mosaic virus 2b protein was genetic determinant for necrosis pathotype in N. glutinosa | 第15-16页 |
3. Genetic mapping of the satellite RNA of Cucumber mosaic virus for high accumulation in N. tabaccum | 第16-18页 |
4. Effect of Cucumber mosaic virus 2b gene on satRNA accumulation | 第18页 |
5. Satellite RNA-mediated reduction in accumulation of Cucumber mosaic virus genomic RNAs in N. tabacum related to 2b gene | 第18-20页 |
第一章 文献综述 | 第20-45页 |
·黄瓜花叶病毒生物学特点 | 第20页 |
·黄瓜花叶病毒的分组 | 第20-23页 |
·黄瓜花叶病毒基因组结构特点 | 第23-24页 |
·黄瓜花叶病毒各个基因在病毒致病过程中的作用 | 第24-30页 |
·1a蛋白 | 第26页 |
·2a蛋白 | 第26页 |
·2b蛋白 | 第26-28页 |
·3a蛋白 | 第28-29页 |
·CP蛋白 | 第29-30页 |
·黄瓜花叶病毒卫星RNA研究进展 | 第30-33页 |
·黄瓜花叶病毒的satRNA的结构特点 | 第30-31页 |
·黄瓜花叶病毒satRNA的复制 | 第31-32页 |
·黄瓜花叶病毒的satRNA的对辅助病毒的症状调控 | 第32-33页 |
·本论文内容与目的 | 第33-35页 |
·研究内容 | 第34页 |
·本论文的意义 | 第34-35页 |
·参考文献 | 第35-45页 |
第二章 黄瓜花叶病毒侵染性克隆构建的研究 | 第45-62页 |
·材料与方法 | 第46-50页 |
·毒源和寄主 | 第46页 |
·试剂和引物 | 第46-47页 |
·ELISA检测 | 第47页 |
·病毒粒子提取 | 第47-48页 |
·CMV和satRNA克隆 | 第48-49页 |
·CMV-Phy和CMV-satRNA体外转录及接种 | 第49页 |
·CMV-dsRNA提取 | 第49-50页 |
·结果与分析 | 第50-57页 |
·引起辣椒褪绿黄化症状的病原物的确定 | 第50-51页 |
·CMV-Phy基因组全长克隆 | 第51-52页 |
·基因组结构与系统进化分析 | 第52-55页 |
·体外转录及侵染性测定 | 第55-56页 |
·CMV-Phy与satRNA假重组测定 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-61页 |
·参考文献 | 第61-62页 |
第三章 黄瓜花叶病毒CB7株系2b基因55位亮氨酸引起心叶烟坏死研究 | 第62-83页 |
·材料与方法 | 第63-71页 |
·毒源和CMV RNA2的cDNA克隆 | 第63页 |
·CMV-CB7的基因组全长的克隆 | 第63页 |
·嵌合型CMV RNA2的构建 | 第63页 |
·不同2b基因的pF209~*2b的构建 | 第63-66页 |
·基因嵌合型2b基因的构建 | 第66-67页 |
·2b~(CB7)和2b~(35#)基因的互补突变 | 第67-68页 |
·CMV-CB7和CMV-Fny基因组cDNA体外转录 | 第68页 |
·CB7-CMV与CMV-Fny各个对应基因组的互换 | 第68-70页 |
·CMV-Fny突变体的活性分析 | 第70页 |
·Northern blot杂交 | 第70-71页 |
·结果与分析 | 第71-79页 |
·CMV-CB7基因组全长序列及其侵染性克隆活性分析 | 第71页 |
·CMV-CB7与CMV-Fny假重组型的症状分析 | 第71-73页 |
·CMV-Fny F5C3和CMV-Fny C5F3基因组含量的分析 | 第73-74页 |
·不同2b基因的CMV-Fny突变体的症状分析 | 第74-75页 |
·CMV-Fny2b~(CB7)和CMV-Fny2b~(35#)嵌合体病毒症状分析 | 第75-76页 |
·2b蛋白第55位亮氨酸决定CMV-CB7在心叶烟系统性坏死反应 | 第76-77页 |
·CMV-Fny2b~(CB7)和CMV-Fny2b~(35#)第55位互补突变体基因组含量分析 | 第77-79页 |
·讨论 | 第79-81页 |
·参考文献 | 第81-83页 |
第四章 决定黄瓜花叶病毒卫星RNA在烟草高含量积累的位点研究 | 第83-98页 |
·材料与方法 | 第84-88页 |
·毒源和寄主植物 | 第84页 |
·CMV-satRNA的克隆 | 第84页 |
·Yi-satRNA和Yn12-satRNA互补性定点突变 | 第84页 |
·Yi-satRNA和Yn12-satRNA体外转录和接种 | 第84-85页 |
·Yi-satRNA和Yn12-satRNA与CMV的假重组型病毒 | 第85页 |
·dsRNA检测CMV与Yi-satRNA和Yn12-satRNA假重组 | 第85-86页 |
·Northern blot杂交 | 第86-88页 |
·结果与讨论 | 第88-96页 |
·Yi-satRNA和Yn12-satRNA序列比较及其与CMV的假重组 | 第88页 |
·Yi-satRNA和Yn12-satRNA对CMV-CB7的症状状调控 | 第88-90页 |
·Yi-satRNA/Yn12-satRNA及其突变体积累量分析 | 第90-92页 |
·CMV-CB7的RNA1决定Yn12-satRNA不能在烟草中积累 | 第92-96页 |
·参考文献 | 第96-98页 |
第五章 黄瓜花叶病毒2b基因对其satRNA积累量的影响 | 第98-108页 |
·材料与方法 | 第99-102页 |
·毒源和寄主植物 | 第99页 |
·CMV-Fny 2b基因缺失 | 第99-100页 |
·Rs-satRNA与CMV的假重组 | 第100页 |
·取样和Rs-satRNA的相对定量 | 第100-102页 |
·结果与讨论 | 第102-106页 |
·不同寄主对Rs-satRNA积累量的影响 | 第102-103页 |
·不同2b基因对Rs-satRNA积累量的影响 | 第103-106页 |
·参考文献 | 第106-108页 |
第六章 卫星RNA引起CMV基因组积累量降低与2b的关系研究 | 第108-125页 |
·材料与方法 | 第109-112页 |
·毒源 | 第109页 |
·体外转录 | 第109页 |
·寄主植物与病毒接种和取样 | 第109页 |
·CMV-Fny/CMV-Fny△2b与Rs-satRNA假重组于烟草的检测 | 第109-110页 |
·CMV-Fny/CMV-Fny△2b和Rs-satRNA的相对定量 | 第110-112页 |
·结果与分析 | 第112-121页 |
·Rs-satRNA对CMV-Fny在寄主上症状影响 | 第112-113页 |
·Rs-satRNA对烟草中CMV-Fny基因组积累量的影响 | 第113-116页 |
·CMV-Fny△2b在寄主上的症状反应 | 第116页 |
·Rs-satRNA对CMV-Fny△2b基因组的影响 | 第116-118页 |
·Rs-satRNA对CMV-Fny接种叶的基因组含量的影响 | 第118-119页 |
·Rs-satRNA对CMV-Fny长距离运输效率的影响 | 第119-121页 |
·讨论 | 第121-123页 |
·参考文献 | 第123-125页 |
附录1 重要试剂的配制 | 第125-128页 |
附录2 已经发表的论文 | 第128页 |