| 致谢 | 第1-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 摘要 | 第10-13页 |
| SUMMARY | 第13-16页 |
| 第一章 引言 | 第16-36页 |
| 1 仔猪断奶应激发生机制及影响 | 第17-28页 |
| ·应激症状 | 第17-18页 |
| ·腹泻 | 第17页 |
| ·生长停滞 | 第17页 |
| ·水肿 | 第17-18页 |
| ·断奶后咬尾及咬耳综合征 | 第18页 |
| ·早期断奶仔猪的消化生理特点 | 第18-21页 |
| ·消化道发育尚未完善 | 第18-19页 |
| ·消化酶分泌不足 | 第19页 |
| ·胃酸分泌不足 | 第19-20页 |
| ·肠道微生物区系不稳定 | 第20页 |
| ·早期断奶仔猪的腹泻问题 | 第20-21页 |
| ·仔猪早期断应激 | 第21-27页 |
| ·仔猪断奶应激的内分泌机制 | 第21-22页 |
| ·仔猪断奶应激对仔猪免疫系统的影响 | 第22-26页 |
| ·仔猪断奶应激对细胞因子的影响 | 第26-27页 |
| ·断奶应激对仔猪机体抗氧化力的影响 | 第27-28页 |
| ·应激与氧自由基 | 第27页 |
| ·机体抗氧化系统 | 第27-28页 |
| ·SOD、GSH-Px清除自由基机理 | 第28页 |
| 2 机体谷氨酰胺营养 | 第28-32页 |
| ·谷氨酰胺及其生物学功能 | 第28-29页 |
| ·谷氨酰胺在肠道中代谢 | 第29-32页 |
| ·谷氨酰胺和葡萄糖在肠细胞代谢的相互作用 | 第30-31页 |
| ·谷氨酰胺在不同肠段的利用差异 | 第31页 |
| ·谷氨酰胺在肠道营养中的研究和应用 | 第31页 |
| ·谷氨酰胺对肠道形态功能的影响 | 第31-32页 |
| 3 谷氨酰胺与机体免疫 | 第32-35页 |
| ·谷氨酰胺在免疫细胞中的代谢 | 第32-33页 |
| ·谷氨酰胺与疫免疫应激 | 第33-35页 |
| 4 本研究目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 日粮中添加谷氨酰胺对仔猪早期生长性能和免疫系统的影响 | 第36-60页 |
| 1 材料与方法 | 第36-42页 |
| ·谷氨酰胺 | 第36页 |
| ·试验动物 | 第36页 |
| ·试验日粮 | 第36-37页 |
| ·饲养试验 | 第37页 |
| · | 第37页 |
| · | 第37页 |
| · | 第37页 |
| ·屠宰试验 | 第37页 |
| ·样品的收集和保存 | 第37-38页 |
| ·血清样品 | 第37页 |
| ·肝脏样品 | 第37页 |
| ·脾脏样品 | 第37页 |
| ·小肠黏膜上皮组织 | 第37页 |
| ·肠淋巴结样品 | 第37-38页 |
| ·肠道切片 | 第38页 |
| ·样品测定 | 第38-41页 |
| ·血清生化指标 | 第38页 |
| ·激素水平 | 第38页 |
| ·血清免疫指标的测定 | 第38页 |
| ·组织中抗氧化物酶和白介素测定 | 第38-39页 |
| ·肠系膜淋巴结淋巴细胞增殖 | 第39-40页 |
| ·十二指肠消化酶活性测定 | 第40页 |
| ·小肠黏膜和肠系膜淋巴结DNA含量测定 | 第40-41页 |
| ·切片制作及绒毛高度、肠壁固有层厚度的测定 | 第41页 |
| ·数据处理与分析 | 第41-42页 |
| 2 试验结果 | 第42-53页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能和腹泻的影响 | 第42-43页 |
| ·谷氨酰胺对血清指标的影响 | 第43-44页 |
| ·谷氨酰胺对内分泌的影响 | 第44页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪免疫功能的影响 | 第44-47页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪血清免疫抗体水平的影响 | 第44-45页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪血清补体C_3的影响 | 第45-46页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪肝脏SOD、GSH-Px酶活性的影响 | 第46页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪血清白介素含量的影响 | 第46-47页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪肠淋巴细胞白介素含量的影响 | 第47页 |
| ·谷氨酰胺对肠系膜淋巴结和空肠中段黏膜DNA含量的影响 | 第47页 |
| ·肠系膜淋巴结T淋巴细胞增殖 | 第47-48页 |
| ·谷氨酰胺对十二指肠内容物蛋白酶活性的影响 | 第48-49页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪小肠绒毛高度、隐窝深度和肠壁固有层厚度的影响 | 第49-50页 |
| ·小肠十二指肠、空肠光镜观察 | 第50-53页 |
| ·十二指肠光镜观察(5×10) | 第50-51页 |
| ·空肠光镜观察(5×10) | 第51-53页 |
| 3 讨论 | 第53-60页 |
| ·日粮添加谷氨酰胺对断奶仔猪生长性能的影响 | 第53-54页 |
| ·日粮添加谷氨酰胺对断奶仔猪血清免疫球蛋白的影响 | 第54-55页 |
| ·日粮添加谷氨酰胺对断奶仔猪对肝脏SOD、GSH--Px酶活力的影响 | 第55-56页 |
| ·谷氨酰胺对T淋巴细胞增殖的影响。 | 第56页 |
| ·日粮添加谷氨酰胺对淋巴细胞自介素的影响 | 第56-57页 |
| ·日粮添加谷氨酰胺对仔猪小肠消化酶及形态结构的影响 | 第57-58页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪肠道消化酶的影响 | 第58-59页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪血清指标的影响 | 第59页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪激素水平的影响 | 第59-60页 |
| 第三章 仔猪肝脏SOD、GSH-PX和淋巴细胞IL-6基因克隆 | 第60-71页 |
| 1 克隆策略 | 第60-61页 |
| 2 试验材料及方法 | 第61-66页 |
| ·试验动物 | 第61页 |
| ·试验试剂 | 第61-62页 |
| ·基因总RNA的提取 | 第62-63页 |
| ·目的基因cDNA的合成和PCR扩增 | 第63-64页 |
| ·PCR产物电泳 | 第64页 |
| ·目的DNA片段割胶回收 | 第64页 |
| ·割胶回收产物与pUCm-T Vector载体连接 | 第64-65页 |
| ·感受态细胞的制备与目的DNA的转化 | 第65页 |
| ·重组克隆筛选 | 第65页 |
| ·重组质粒鉴定 | 第65-66页 |
| ·重组DNA核苷酸序列测定 | 第66页 |
| 3 试验结果 | 第66-70页 |
| ·SOD、GSH-Px和IL-6引物序列 | 第67页 |
| ·SOD、GSH-Px和IL-6PCR产物电泳结果 | 第67-68页 |
| ·菌液DNA PCR检验结果 | 第68-69页 |
| ·测序结果 | 第69-70页 |
| ·SOD cds 294bp基因片段阳性克隆子测序结果 | 第69页 |
| ·GSH-Px cds 325bp基因片段阳性克隆子测序结果 | 第69页 |
| ·IL-6 481bp cds基因片段阳性克隆子测序结果 | 第69-70页 |
| 4 讨论 | 第70-71页 |
| 第四章 RT-PCR方法研究谷氨酰胺对仔猪SOD、GSH-PX,淋巴细胞IL-6基因表达的影响 | 第71-86页 |
| 1 材料 | 第71页 |
| 2 试验方法 | 第71-75页 |
| ·RNA的提取及反转录 | 第71页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR) | 第71-74页 |
| ·引物的选择和退火温度(Ta)的确定 | 第71-72页 |
| ·循环数的确定 | 第72-74页 |
| ·最佳Mg~(2+)浓度的确定 | 第74页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第74页 |
| ·半定量RT-PCR分析 | 第74页 |
| ·数据处理 | 第74-75页 |
| 3 结果 | 第75-83页 |
| ·MgCl_2浓度对仔猪肝脏SOD、GSH-Px.淋巴细胞IL-6和18S rRNA基因表达的影响 | 第75-76页 |
| ·循环数对仔猪肝脏SOD、GSH-Px.淋巴细胞IL-6和18S rRNA基因表达的影响 | 第76-77页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪SOD基因的影响 | 第77-79页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪GSH-Px基因的影响 | 第79-81页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪IL-6基因的影响 | 第81-83页 |
| 4 讨论 | 第83-86页 |
| ·RT-PCR方法的构建与反应条件的摸索 | 第83页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪SOD mRNA基因表达的影响 | 第83-84页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪肝脏GSH-Px mRNA含量的影响 | 第84-85页 |
| ·谷氨酰胺对断奶仔猪肝脏IL-6mRNA含量的影响 | 第85-86页 |
| 第五章 结论、创新点及后续研究进展 | 第86-88页 |
| ·主要结论 | 第86页 |
| ·创新点 | 第86-87页 |
| ·后续研究进展 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-97页 |
