| 湖南大学学位论文原创性声明和学位论文版权使用授权书 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 本文所用英文缩写词表 | 第8-11页 |
| 第1章 绪论 | 第11-27页 |
| ·p53 基因的研究进展 | 第11-12页 |
| ·p53 基因的结构 | 第11-12页 |
| ·p53 基因与肿瘤的发生 | 第12页 |
| ·检测mRNA 的常用方法 | 第12-16页 |
| ·RT-PCR 方法 | 第12-13页 |
| ·实时荧光定量PCR 方法 | 第13页 |
| ·传统核酸探针法 | 第13-15页 |
| ·基因芯片方法 | 第15-16页 |
| ·荧光共振能量转移探针在核酸研究中的应用 | 第16-25页 |
| ·TaqMan 探针 | 第16-17页 |
| ·相邻探针 | 第17页 |
| ·分子信标 | 第17-25页 |
| ·本文拟开展的工作 | 第25-27页 |
| 第2章 分子信标用于p53 mRNA 的体外定量检测 | 第27-40页 |
| ·前言 | 第27-28页 |
| ·实验部分 | 第28-32页 |
| ·实验原理 | 第28页 |
| ·试剂和仪器 | 第28-30页 |
| ·实验方法 | 第30-32页 |
| ·结果与讨论 | 第32-38页 |
| ·p53 分子信标性能的验证 | 第32-35页 |
| ·cDNA/p53MB 标准曲线的建立 | 第35-36页 |
| ·p53 分子信标定量检测肿瘤细胞中p53 m RNA 表达水平 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR 法验证p53 信标检测方法的准确性 | 第37-38页 |
| ·标准加入回收率实验 | 第38页 |
| ·小结 | 第38-40页 |
| 第3章 分子信标在5-氟尿嘧啶对人肺腺癌细胞作用机理研究中的应用 | 第40-52页 |
| ·前言 | 第40-41页 |
| ·实验部分 | 第41-44页 |
| ·试剂和仪器 | 第41-42页 |
| ·实验方法 | 第42-44页 |
| ·结果与讨论 | 第44-51页 |
| ·MTT 法测定细胞对5-FU 的敏感性 | 第44-45页 |
| ·p53 分子信标定量检测肿瘤细胞中p53 m RNA 表达水平 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR 法验证p53 信标检测方法的准确性 | 第46-47页 |
| ·Hoechst 33258 荧光染色检测5-FU 诱导的细胞凋亡 | 第47-48页 |
| ·流式细胞术考察5-FU 处理以后细胞周期和细胞凋亡情况 | 第48-49页 |
| ·5-FU 促进细胞中抑癌蛋白表达水平并抑制原癌蛋白表达水平 | 第49-51页 |
| ·小结 | 第51-52页 |
| 第4章 基于荧光共振能量转移探针对p53 m RNA 点突变的检测 | 第52-63页 |
| ·前言 | 第52-53页 |
| ·实验部分 | 第53-57页 |
| ·实验原理 | 第53页 |
| ·试剂和仪器 | 第53-55页 |
| ·实验方法 | 第55-57页 |
| ·结果与讨论 | 第57-62页 |
| ·DNA 模板体外转录成RNA | 第57-58页 |
| ·模板 RNA 中p53 RNA 点突变的检测 | 第58-60页 |
| ·细胞总RNA 中p53 m RNA 点突变的检测 | 第60-61页 |
| ·测序 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-72页 |
| 附录攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第72-73页 |
| 致谢 | 第73页 |
