独创性声明 | 第1页 |
关于论文使用授权的说明 | 第3-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第一章 文献综述 | 第11-23页 |
1 油菜抗菌核病的研究现状 | 第11-18页 |
·油菜与菌核病相互作用机理的研究 | 第11-14页 |
·油菜植株的抗病机理 | 第11-13页 |
·避病 | 第11页 |
·形态结构的抗病性 | 第11-12页 |
·油菜抗病的组织病理学及生理生化 | 第12-13页 |
·菌核病的致病机理 | 第13-14页 |
·组织病理学 | 第13页 |
·致病机理 | 第13-14页 |
·抗性鉴定方法研究 | 第14-16页 |
·菌丝体接种鉴定 | 第14页 |
·子囊孢子接种法 | 第14-15页 |
·草酸鉴定法 | 第15-16页 |
·抗菌核病育种途径 | 第16-17页 |
·杂交和选择 | 第16页 |
·无花瓣育种 | 第16页 |
·组织培养 | 第16-17页 |
·基因工程 | 第17页 |
·蛋白质组学 | 第17页 |
·展望 | 第17-18页 |
2 蛋白质在分离纯化过程中影响其活性因素的研究 | 第18-23页 |
·蛋白质结构对其活性的影响 | 第18-19页 |
·纯化条件对蛋白活性的影响 | 第19-21页 |
·影响蛋白质活性的物理因素 | 第19页 |
·影响蛋白质活性的化学因素 | 第19-21页 |
·影响蛋白质活性的生物因素 | 第21页 |
·蛋白质分离纯化时维持其活性的措施 | 第21-22页 |
·分离纯化中操作条件的优化 | 第21页 |
·纯化步骤的简化 | 第21页 |
·采用新型分离技术 | 第21-22页 |
·展望 | 第22-23页 |
第二章 抗感油菜材料的筛选 | 第23-29页 |
1 材料与方法 | 第23-26页 |
·材料 | 第23页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌核 | 第23页 |
·仪器与试剂 | 第23页 |
·仪器 | 第23页 |
·试剂 | 第23页 |
·方法 | 第23-26页 |
·油菜品种的大田播种 | 第23-24页 |
·PDA培养基的制作 | 第24页 |
·菌核的萌发及带菌丝牙签的制作 | 第24页 |
·田间油菜植株的接种方法 | 第24-26页 |
·田间接种后的观测及测量 | 第26页 |
2 结果与分析 | 第26-27页 |
3 讨论 | 第27-29页 |
第三章 初提汁对菌丝的抑菌作用 | 第29-34页 |
1 材料与方法 | 第29-31页 |
·材料 | 第29页 |
·植物材料 | 第29页 |
·菌核和菌丝 | 第29页 |
·仪器与试剂 | 第29页 |
·仪器 | 第29页 |
·试剂 | 第29页 |
·方法 | 第29-31页 |
·油菜样品叶片的初处理 | 第29-30页 |
·样品浆中总蛋白浓度的测定(Bradford检测法) | 第30页 |
·溶液的配制 | 第30页 |
·检测 | 第30页 |
·标准曲线的制作 | 第30页 |
·标准曲线的应用 | 第30页 |
·样品初处理物对菌核菌丝的抑菌作用 | 第30-31页 |
·先长菌后滴定法 | 第31页 |
·先滴定后长菌法 | 第31页 |
2 结果与分析 | 第31-33页 |
3 讨论 | 第33-34页 |
第四章 纯化条件的优化和目的蛋白的分离 | 第34-42页 |
1 材料与方法 | 第34-38页 |
·材料 | 第34页 |
·植物材料 | 第34页 |
·菌核和菌丝 | 第34页 |
·仪器与试剂 | 第34页 |
·仪器 | 第34页 |
·试剂 | 第34页 |
·方法 | 第34-38页 |
·四种提取蛋白缓冲液的配制 | 第34-35页 |
·蛋白质溶解的初始操作步骤 | 第35页 |
·硫酸铵的分级盐析 | 第35页 |
·非变性条件下的凝胶电泳 | 第35-38页 |
·储存液 | 第35-36页 |
·工作溶液 | 第36页 |
·分离胶(12.5%)的制备 | 第36-37页 |
·堆积胶(5%)的制备 | 第37页 |
·点样、电泳、染色和脱色 | 第37-38页 |
·点样 | 第37页 |
·电泳 | 第37-38页 |
·染色和脱色 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-40页 |
·缓冲液种类和成分的确立 | 第38页 |
·Tb缓冲液的最佳pH值和盐析时最佳硫酸铵饱和度的确定 | 第38-40页 |
·抗感样品在分离纯化中蛋白差异带的出现 | 第40页 |
3 讨论 | 第40-42页 |
第五章 免疫扩散法检测目的蛋白 | 第42-46页 |
1 材料与方法 | 第42-44页 |
·材料 | 第42页 |
·植物材料 | 第42页 |
·菌核和菌丝 | 第42页 |
·仪器与试剂 | 第42页 |
·仪器 | 第42页 |
·试剂 | 第42页 |
·方法 | 第42-44页 |
·PDA液体培养基配制和在液体培养基中的菌丝培养 | 第42-43页 |
·菌丝蛋白的分离纯化 | 第43页 |
·切胶、洗脱和浓缩 | 第43页 |
·双向免疫扩散法测菌丝蛋白和特异性功能蛋白的效价 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-45页 |
·菌核菌丝蛋白的分离纯化 | 第44-45页 |
·免疫扩散法检测功能蛋白 | 第45页 |
3 讨论 | 第45-46页 |
第六章 结论 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
个人简介 | 第53页 |