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油菜抗菌核病蛋白的分离、纯化及鉴定的研究

独创性声明第1页
关于论文使用授权的说明第3-8页
摘要第8-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 文献综述第11-23页
 1 油菜抗菌核病的研究现状第11-18页
   ·油菜与菌核病相互作用机理的研究第11-14页
     ·油菜植株的抗病机理第11-13页
       ·避病第11页
       ·形态结构的抗病性第11-12页
       ·油菜抗病的组织病理学及生理生化第12-13页
     ·菌核病的致病机理第13-14页
       ·组织病理学第13页
       ·致病机理第13-14页
   ·抗性鉴定方法研究第14-16页
     ·菌丝体接种鉴定第14页
     ·子囊孢子接种法第14-15页
     ·草酸鉴定法第15-16页
   ·抗菌核病育种途径第16-17页
     ·杂交和选择第16页
     ·无花瓣育种第16页
     ·组织培养第16-17页
     ·基因工程第17页
     ·蛋白质组学第17页
   ·展望第17-18页
 2 蛋白质在分离纯化过程中影响其活性因素的研究第18-23页
   ·蛋白质结构对其活性的影响第18-19页
   ·纯化条件对蛋白活性的影响第19-21页
     ·影响蛋白质活性的物理因素第19页
     ·影响蛋白质活性的化学因素第19-21页
     ·影响蛋白质活性的生物因素第21页
   ·蛋白质分离纯化时维持其活性的措施第21-22页
     ·分离纯化中操作条件的优化第21页
     ·纯化步骤的简化第21页
     ·采用新型分离技术第21-22页
   ·展望第22-23页
第二章 抗感油菜材料的筛选第23-29页
 1 材料与方法第23-26页
   ·材料第23页
     ·植物材料第23页
     ·菌核第23页
     ·仪器与试剂第23页
       ·仪器第23页
       ·试剂第23页
   ·方法第23-26页
     ·油菜品种的大田播种第23-24页
     ·PDA培养基的制作第24页
     ·菌核的萌发及带菌丝牙签的制作第24页
     ·田间油菜植株的接种方法第24-26页
     ·田间接种后的观测及测量第26页
 2 结果与分析第26-27页
 3 讨论第27-29页
第三章 初提汁对菌丝的抑菌作用第29-34页
 1 材料与方法第29-31页
   ·材料第29页
     ·植物材料第29页
     ·菌核和菌丝第29页
     ·仪器与试剂第29页
       ·仪器第29页
       ·试剂第29页
   ·方法第29-31页
     ·油菜样品叶片的初处理第29-30页
     ·样品浆中总蛋白浓度的测定(Bradford检测法)第30页
       ·溶液的配制第30页
       ·检测第30页
       ·标准曲线的制作第30页
       ·标准曲线的应用第30页
     ·样品初处理物对菌核菌丝的抑菌作用第30-31页
       ·先长菌后滴定法第31页
       ·先滴定后长菌法第31页
 2 结果与分析第31-33页
 3 讨论第33-34页
第四章 纯化条件的优化和目的蛋白的分离第34-42页
 1 材料与方法第34-38页
   ·材料第34页
     ·植物材料第34页
     ·菌核和菌丝第34页
     ·仪器与试剂第34页
       ·仪器第34页
       ·试剂第34页
   ·方法第34-38页
     ·四种提取蛋白缓冲液的配制第34-35页
     ·蛋白质溶解的初始操作步骤第35页
     ·硫酸铵的分级盐析第35页
     ·非变性条件下的凝胶电泳第35-38页
       ·储存液第35-36页
       ·工作溶液第36页
       ·分离胶(12.5%)的制备第36-37页
       ·堆积胶(5%)的制备第37页
       ·点样、电泳、染色和脱色第37-38页
         ·点样第37页
         ·电泳第37-38页
         ·染色和脱色第38页
 2 结果与分析第38-40页
   ·缓冲液种类和成分的确立第38页
   ·Tb缓冲液的最佳pH值和盐析时最佳硫酸铵饱和度的确定第38-40页
   ·抗感样品在分离纯化中蛋白差异带的出现第40页
 3 讨论第40-42页
第五章 免疫扩散法检测目的蛋白第42-46页
 1 材料与方法第42-44页
   ·材料第42页
     ·植物材料第42页
     ·菌核和菌丝第42页
     ·仪器与试剂第42页
       ·仪器第42页
       ·试剂第42页
   ·方法第42-44页
     ·PDA液体培养基配制和在液体培养基中的菌丝培养第42-43页
     ·菌丝蛋白的分离纯化第43页
     ·切胶、洗脱和浓缩第43页
     ·双向免疫扩散法测菌丝蛋白和特异性功能蛋白的效价第43-44页
 2 结果与分析第44-45页
   ·菌核菌丝蛋白的分离纯化第44-45页
   ·免疫扩散法检测功能蛋白第45页
 3 讨论第45-46页
第六章 结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52-53页
个人简介第53页

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