中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
第一章 引言 | 第12-33页 |
第一节 木聚糖酶及其基因工程 | 第12-24页 |
1.木聚糖及其结构 | 第12-13页 |
2.木聚糖酶(Xylanase)及其分子生物学 | 第13-18页 |
·木聚糖酶分子的结构区域 | 第14-15页 |
·木聚糖酶的理化性质 | 第15-17页 |
·木聚糖酶基因及其克隆 | 第17-18页 |
3.木聚糖酶基因在原核生物中的的表达 | 第18-19页 |
4.木聚糖酶基因在真核微生物中的表达 | 第19-20页 |
5.木聚糖酶基因的改造 | 第20-21页 |
6.木聚糖酶的应用 | 第21-24页 |
·在饲料行业中的运用 | 第21-22页 |
·在造纸工业中的运用 | 第22页 |
·在食品和医药行业中的运用 | 第22-23页 |
·在酿酒行业及其它领域中的应用 | 第23-24页 |
第二节 利用转基因植物表达饲料用非淀粉多糖水解酶 | 第24-32页 |
1.葡聚糖酶和木聚糖酶的来源 | 第24-25页 |
2.β-葡聚糖酶和木聚糖酶的植物基因工程 | 第25-28页 |
·β-葡聚糖酶转基因植物研究 | 第25-26页 |
·木聚糖酶转基因植物研究 | 第26-28页 |
3 外源β-葡聚糖酶和木聚糖酶对转基因植物的影响 | 第28-29页 |
4 转基因植物饲喂动物的效果研究 | 第29页 |
5 问题与展望 | 第29-32页 |
·转基因植物表达酶的表达量及其提高 | 第29-31页 |
·外源酶与转基因植物的相互影响 | 第31页 |
·转基因植物表达外源酶的性质 | 第31-32页 |
本研究的目的和意义 | 第32-33页 |
第二章 高比活性木聚糖酶XYNB在烟草中的表达 | 第33-48页 |
1 材料与方法 | 第33-38页 |
·实验材料 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-38页 |
·植物表达载体的构建 | 第34页 |
·烟草的遗传转化 | 第34-35页 |
·转基因烟草的PCR分析 | 第35页 |
·转基因烟草的RT-PCR分析 | 第35-36页 |
·转基因烟草的ELISA筛选 | 第36页 |
·重组酶蛋白的SDS-PAGE以及Western Blot分析 | 第36-37页 |
·重组酶的活性分析 | 第37-38页 |
·重组酶的稳定性分析 | 第38页 |
·分泌型重组酶的提取及酶活测定 | 第38页 |
2 结果与分析 | 第38-46页 |
·马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ信号肽序列的克隆与植物表达载体的构建 | 第38-40页 |
·转基因植物的获得与ELISA筛选 | 第40-41页 |
·转基因植株的PCR分析 | 第41-42页 |
·转基因植株的酶活性分析 | 第42-43页 |
·转基因植株的RT-PCR分析 | 第43页 |
·转基因烟草重组木聚糖酶的SDS-PAGE和Western Blot分析 | 第43-44页 |
·转基因烟草重组酶的稳定性分析 | 第44-45页 |
·转基因烟草的遗传性初步分析 | 第45-46页 |
3 小结 | 第46-48页 |
第三章 高比活性木聚糖酶XYNB在转基因马铃薯中的组成型表达 | 第48-61页 |
1 材料与方法 | 第48-52页 |
·实验材料 | 第48页 |
·实验方法 | 第48-52页 |
·植物表达载体的构建 | 第48页 |
·马铃薯的遗传转化 | 第48-49页 |
·转基因马铃薯的PCR分析 | 第49-50页 |
·转基因马铃薯的RT-PCR分析 | 第50页 |
·转基因马铃薯的ELISA筛选 | 第50-51页 |
·重组酶蛋白的SDS-PAGE以及Western Blot分析 | 第51页 |
·重组酶的活性分析 | 第51页 |
·重组酶的稳定性分析 | 第51-52页 |
·分泌型重组酶的提取及酶活测定 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-60页 |
·植物表达载体的构建 | 第52页 |
·转基因马铃薯的获得 | 第52-53页 |
·转基因植株的PCR分析 | 第53页 |
·组成型表达木聚糖酶的转基因马铃薯的RT-PCR分析 | 第53-54页 |
·组成型表达木聚糖酶的转基因马铃薯SDS-PAGE和Western blot | 第54-56页 |
·组成型表达木聚糖酶的转基因马铃薯酶活性分析 | 第56-58页 |
·转基因马铃薯表达木聚糖酶的热稳定性分析 | 第58-59页 |
·转基因马铃薯的遗传稳定性 | 第59-60页 |
3 小结 | 第60-61页 |
第四章 高比活性木聚糖酶XYNB在马铃薯块茎中的特异性表达 | 第61-72页 |
1 材料与方法 | 第61-65页 |
·实验材料 | 第61页 |
·实验方法 | 第61-65页 |
·Patatin启动子的克隆与序列分析与植物表达载体的构建 | 第61页 |
·马铃薯的遗传转化 | 第61-62页 |
·转基因马铃薯的PCR分析 | 第62-63页 |
·转基因马铃薯的RT-PCR分析 | 第63页 |
·块茎蛋白质的提取 | 第63-64页 |
·重组酶蛋白的SDS-PAGE以及Western Blot分析 | 第64页 |
·转基因马铃薯块茎表达木聚糖酶的活性分析 | 第64-65页 |
2 结果与分析 | 第65-71页 |
·Patatin启动子的克隆和序列分析 | 第65-66页 |
·植物表达载体的构建 | 第66页 |
·转基因马铃薯的获得 | 第66-67页 |
·块茎特异表达木聚糖酶转基因马铃薯的RT-PCR分析 | 第67-68页 |
·块茎特异表达木聚糖酶转基因马铃薯的SDS-PAGE和Western blot分析 | 第68-70页 |
·块茎特异表达木聚糖酶转基因马铃薯的酶活性分析 | 第70-71页 |
3.小结 | 第71-72页 |
第五章 讨论 | 第72-77页 |
第六章 结论 | 第77-79页 |
参考文献 | 第79-93页 |
致谢 | 第93-94页 |
作者简历 | 第94页 |