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来源于橄榄绿链霉菌A1的高比活木聚糖酶在植物中的高效表达

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
第一章 引言第12-33页
 第一节 木聚糖酶及其基因工程第12-24页
  1.木聚糖及其结构第12-13页
  2.木聚糖酶(Xylanase)及其分子生物学第13-18页
   ·木聚糖酶分子的结构区域第14-15页
   ·木聚糖酶的理化性质第15-17页
   ·木聚糖酶基因及其克隆第17-18页
  3.木聚糖酶基因在原核生物中的的表达第18-19页
  4.木聚糖酶基因在真核微生物中的表达第19-20页
  5.木聚糖酶基因的改造第20-21页
  6.木聚糖酶的应用第21-24页
   ·在饲料行业中的运用第21-22页
   ·在造纸工业中的运用第22页
   ·在食品和医药行业中的运用第22-23页
   ·在酿酒行业及其它领域中的应用第23-24页
 第二节 利用转基因植物表达饲料用非淀粉多糖水解酶第24-32页
  1.葡聚糖酶和木聚糖酶的来源第24-25页
  2.β-葡聚糖酶和木聚糖酶的植物基因工程第25-28页
   ·β-葡聚糖酶转基因植物研究第25-26页
   ·木聚糖酶转基因植物研究第26-28页
  3 外源β-葡聚糖酶和木聚糖酶对转基因植物的影响第28-29页
  4 转基因植物饲喂动物的效果研究第29页
  5 问题与展望第29-32页
   ·转基因植物表达酶的表达量及其提高第29-31页
   ·外源酶与转基因植物的相互影响第31页
   ·转基因植物表达外源酶的性质第31-32页
 本研究的目的和意义第32-33页
第二章 高比活性木聚糖酶XYNB在烟草中的表达第33-48页
 1 材料与方法第33-38页
   ·实验材料第33-34页
   ·实验方法第34-38页
     ·植物表达载体的构建第34页
     ·烟草的遗传转化第34-35页
     ·转基因烟草的PCR分析第35页
     ·转基因烟草的RT-PCR分析第35-36页
     ·转基因烟草的ELISA筛选第36页
     ·重组酶蛋白的SDS-PAGE以及Western Blot分析第36-37页
     ·重组酶的活性分析第37-38页
     ·重组酶的稳定性分析第38页
     ·分泌型重组酶的提取及酶活测定第38页
 2 结果与分析第38-46页
   ·马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ信号肽序列的克隆与植物表达载体的构建第38-40页
   ·转基因植物的获得与ELISA筛选第40-41页
   ·转基因植株的PCR分析第41-42页
   ·转基因植株的酶活性分析第42-43页
   ·转基因植株的RT-PCR分析第43页
   ·转基因烟草重组木聚糖酶的SDS-PAGE和Western Blot分析第43-44页
   ·转基因烟草重组酶的稳定性分析第44-45页
   ·转基因烟草的遗传性初步分析第45-46页
 3 小结第46-48页
第三章 高比活性木聚糖酶XYNB在转基因马铃薯中的组成型表达第48-61页
 1 材料与方法第48-52页
   ·实验材料第48页
   ·实验方法第48-52页
     ·植物表达载体的构建第48页
     ·马铃薯的遗传转化第48-49页
     ·转基因马铃薯的PCR分析第49-50页
     ·转基因马铃薯的RT-PCR分析第50页
     ·转基因马铃薯的ELISA筛选第50-51页
     ·重组酶蛋白的SDS-PAGE以及Western Blot分析第51页
     ·重组酶的活性分析第51页
     ·重组酶的稳定性分析第51-52页
     ·分泌型重组酶的提取及酶活测定第52页
 2 结果与分析第52-60页
   ·植物表达载体的构建第52页
   ·转基因马铃薯的获得第52-53页
   ·转基因植株的PCR分析第53页
   ·组成型表达木聚糖酶的转基因马铃薯的RT-PCR分析第53-54页
   ·组成型表达木聚糖酶的转基因马铃薯SDS-PAGE和Western blot第54-56页
   ·组成型表达木聚糖酶的转基因马铃薯酶活性分析第56-58页
   ·转基因马铃薯表达木聚糖酶的热稳定性分析第58-59页
   ·转基因马铃薯的遗传稳定性第59-60页
 3 小结第60-61页
第四章 高比活性木聚糖酶XYNB在马铃薯块茎中的特异性表达第61-72页
 1 材料与方法第61-65页
   ·实验材料第61页
   ·实验方法第61-65页
     ·Patatin启动子的克隆与序列分析与植物表达载体的构建第61页
     ·马铃薯的遗传转化第61-62页
     ·转基因马铃薯的PCR分析第62-63页
     ·转基因马铃薯的RT-PCR分析第63页
     ·块茎蛋白质的提取第63-64页
     ·重组酶蛋白的SDS-PAGE以及Western Blot分析第64页
     ·转基因马铃薯块茎表达木聚糖酶的活性分析第64-65页
 2 结果与分析第65-71页
   ·Patatin启动子的克隆和序列分析第65-66页
   ·植物表达载体的构建第66页
   ·转基因马铃薯的获得第66-67页
   ·块茎特异表达木聚糖酶转基因马铃薯的RT-PCR分析第67-68页
   ·块茎特异表达木聚糖酶转基因马铃薯的SDS-PAGE和Western blot分析第68-70页
   ·块茎特异表达木聚糖酶转基因马铃薯的酶活性分析第70-71页
 3.小结第71-72页
第五章 讨论第72-77页
第六章 结论第77-79页
参考文献第79-93页
致谢第93-94页
作者简历第94页

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