高赖氨酸蛋白基因在转基因生菜中的表达和遗传研究
| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 第一部分 文献综述 | 第10-23页 |
| ·植物转基因研究历史回顾 | 第10页 |
| ·转基因植物应用情况简述 | 第10-13页 |
| ·培育转基因抗虫作物 | 第11-12页 |
| ·Bt毒蛋白基因 | 第11页 |
| ·植物凝集素基因 | 第11页 |
| ·蛋白酶抑制剂基因 | 第11页 |
| ·淀粉酶抑制剂基因 | 第11-12页 |
| ·培育抗除草剂植物 | 第12页 |
| ·培育抗病毒植物 | 第12页 |
| ·培育抗逆境植物 | 第12页 |
| ·培育改良品质的农作物 | 第12-13页 |
| ·植物蛋白质改良基因工程研究进展 | 第13-19页 |
| ·蛋白质序列的修饰 | 第13-15页 |
| ·人工合成优质蛋白基因 | 第15-16页 |
| ·异源优质蛋白基因的转移和过量表达 | 第16-18页 |
| ·同源优质蛋白基因的过量表达 | 第18页 |
| ·增加游离的必需氨基酸的含量 | 第18-19页 |
| ·生菜转基因研究现状 | 第19-20页 |
| ·提高作物赖氨酸(Lys)含量所采取的方法 | 第20-21页 |
| ·赖氨酸(Lys)基因研究进展 | 第21页 |
| ·转基因植物的生物安全性 | 第21-23页 |
| 第二部分 本研究目的、意义和技术路线 | 第23-24页 |
| 第三部分 材料和方法 | 第24-30页 |
| ·材料 | 第24-25页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·植物材料 | 第24页 |
| ·酶与试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24页 |
| ·主要基本培养基的配制 | 第24-25页 |
| ·方法 | 第25-30页 |
| ·生菜遗传转化体系的建立及优化 | 第25-26页 |
| ·消毒时间对种子发芽的影响 | 第25页 |
| ·浸染时间对转化的影响 | 第25页 |
| ·共培养时间对转化的影响 | 第25页 |
| ·卡那霉素选择压的确定 | 第25页 |
| ·羧苄青霉素(Carb)选择压的确定 | 第25页 |
| ·植株再生及再生植株的管理 | 第25-26页 |
| ·高赖氨酸基因对生菜的遗传转化及抗性植株的筛选 | 第26页 |
| ·根癌农杆菌浸染液的准备 | 第26页 |
| ·浸染与转化 | 第26页 |
| ·抗性愈伤组织的诱导和筛选 | 第26页 |
| ·抗性植株的获得 | 第26页 |
| ·转基因生菜植株的检测 | 第26-30页 |
| ·植株基因组DNA的提取 | 第26-27页 |
| ·转基因植株PCR检测 | 第27页 |
| ·转基因植株的Southernblot检测 | 第27-28页 |
| ·植株总RNA的提取 | 第28页 |
| ·转基因植株RT-PCR检测 | 第28-29页 |
| ·转基因植株赖氨酸含量检测 | 第29-30页 |
| 第四部分 结果与分析 | 第30-36页 |
| ·生菜遗传转化体系的建立 | 第30-33页 |
| ·种子消毒试剂和时间 | 第30页 |
| ·浸染时间对抗性芽的影响 | 第30页 |
| ·共培养时间 | 第30-31页 |
| ·抗生素选择压的确定 | 第31-32页 |
| ·羧苄青霉素(Carb)对子叶外植体再生的影响 | 第32页 |
| ·植株再生及再生植株的管理 | 第32-33页 |
| ·T0代转基因生菜植株的分子检测 | 第33-34页 |
| ·T0代转基因生菜植株赖氨酸含量分析 | 第34页 |
| ·高赖氨酸蛋白基因在生菜中的遗传稳定性 | 第34-36页 |
| 第五部分 讨论 | 第36-41页 |
| ·影响生菜遗传转化的因素 | 第36-37页 |
| ·农杆菌浸染液 | 第36页 |
| ·子叶外植体的叶龄 | 第36页 |
| ·预培养 | 第36-37页 |
| ·浸染时间 | 第37页 |
| ·共培养 | 第37页 |
| ·其他因素 | 第37页 |
| ·生菜转化植株的筛选 | 第37-39页 |
| ·外植体在卡那霉素选择培养基上生长和芽分化 | 第37-38页 |
| ·转化苗在卡那霉素生根培养基上生根 | 第38页 |
| ·抗性植株总DNA的PCR扩增 | 第38页 |
| ·阳性植株Southernblot分析 | 第38-39页 |
| ·阳性植株RT-PCR分析 | 第39页 |
| ·高赖氨酸蛋白基因在生菜中的表达量和遗传稳定性 | 第39-41页 |
| 第六部分 小结 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 英文缩略词 | 第49-50页 |
| 致谢 | 第50-51页 |
| 个人简介 | 第51-52页 |
| 导师简介 | 第52-53页 |
| 独创性声明 | 第53页 |
