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胡萝卜高效遗传转化体系的建立及遗传稳定性的研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-7页
缩略词表第7-11页
第一章 文献综述第11-30页
   ·植物基因工程的研究进展第11-16页
     ·球转基因植物的发展现状及其应用第11-12页
     ·转基因植物的遗传转化方法第12-15页
       ·载体系统转化方法第12-14页
       ·直接遗传转化方法第14-15页
     ·植物基因工程存在的技术问题第15-16页
   ·转基因植物口服疫苗的研究进展第16-21页
     ·转基因植物口服疫苗的作用机理第16-17页
     ·口服疫苗抗原和受体植物的选择第17页
     ·利用转基因植物生产疫苗的途径第17-18页
       ·瞬时表达系统第17-18页
       ·稳定表达系统第18页
     ·转基因植物口服疫苗的优点第18-19页
     ·转基因植物口服疫苗研究成功事例第19页
     ·转基因植物疫苗在临床实验上的效果第19-20页
     ·转基因植物疫苗存在的问题和对策第20-21页
   ·轮状病毒(RV)研究概述第21-28页
     ·轮状病毒的基因结构及病毒蛋白第22-23页
       ·轮状病毒的基因组结构及编码产物第22页
       ·病毒蛋白第22-23页
     ·轮状病毒的发病机理及免疫保护机制第23-24页
     ·轮状病毒的流行病学第24-26页
     ·轮状病毒疫苗的研究进展第26-28页
       ·早期的轮状病毒疫苗—轮状病毒口服减毒活疫苗第26页
       ·多价重组疫苗第26-27页
       ·亚单位疫苗第27页
       ·DNA疫苗第27-28页
   ·研究的目的和意义第28-29页
   ·技术路线第29-30页
第二章 材料与方法第30-38页
   ·材料第30-32页
     ·菌株与质粒第30页
     ·植物材料第30-31页
     ·化学试剂、生长调节剂和酶试剂第31页
       ·组织培养试剂第31页
       ·酶和试剂盒第31页
       ·主要仪器第31页
     ·主要试剂、培养基的配制第31-32页
       ·主要溶液的配制第31页
       ·主要培养基第31-32页
   ·实验方法第32-38页
     ·无菌苗的获得第32页
     ·根癌农杆菌浸染液的准备第32页
     ·外植体处理第32页
     ·遗传转化体系的建立及优化第32-34页
       ·浸染时间对转化的影响第32页
       ·共培养时间对转化的影响第32-33页
       ·卡那霉素(Kan)敏感性实验第33页
       ·羧苄青霉素(Cab)和头孢霉素(Cef)浓度对比试验第33页
       ·叶盘法转化胡萝卜下胚轴第33-34页
     ·炼苗和移栽方法第34页
       ·无菌炼苗第34页
       ·炼苗第34页
       ·陆地和大棚低温对比试验第34页
     ·T_0代种子和T_1代植株的获得第34页
     ·T_0和T1_代转基因植株的分子生物学检测第34-38页
       ·T_0和T_1代植株基因组DNA的提取第34-35页
       ·T_0代转基因植株的PCR检测第35-36页
       ·T_0代植株总RNA的提取第36页
       ·T_0代植株的RT-PCR检测第36页
       ·T_1代植株的PCR检测第36-37页
       ·T_1代植株的PCR-Southern blot检测第37页
       ·T_1代植株的Southern blot检测第37-38页
第三章 结果与分析第38-44页
   ·胡萝卜转化体系的建立第38-40页
     ·浸染时间的影响第38页
     ·共培养时间对转化的影响第38-39页
     ·Kan对抗性植株的影响第39页
     ·Cab和Cef浓度对比试验结果第39-40页
   ·抗性植株的炼苗和移栽方法第40-41页
   ·转基因胡萝卜的分子生物学检测第41-44页
     ·T_0代转基因胡萝卜植株的PCR分析第41页
     ·T_0代转基因胡萝卜植株的转基因植株的RT-PCR分析第41-42页
     ·T_1代胡萝卜植株的遗传分析和PCR检测第42页
     ·T_1代转基因胡萝卜植株的PCR-Southern分析第42-43页
     ·T_1代转基因胡萝卜植株的Southernblot结果分析第43-44页
第四章 讨论第44-48页
   ·胡萝卜下胚轴遗传转化体系的建立第44-45页
   ·抗性植株炼苗第45页
   ·关于转基因植株的检测第45-46页
   ·关于T_1代转基因胡萝卜遗传稳定性的分析第46页
   ·本研究下一步的工作第46-48页
第五章 结论第48-49页
致谢第49-50页
参考文献第50-60页
图版第60-61页
个人简介第61-62页
导师简介第62-63页
独创性声明第63页

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