| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-11页 |
| 第一章 RNA干涉的研究进展 | 第11-41页 |
| 1．1 RNAi的发现 | 第11-12页 |
| 1．2 RNAi的分子机制 | 第12-23页 |
| 1．2．1 通过DNA甲基化在转录水平调节基因表达 | 第12-14页 |
| 1．2．2 转录后水平基因沉默 | 第14-21页 |
| 1．2．2．1 起始阶段 | 第15-16页 |
| 1．2．2．2 效应阶段 | 第16-18页 |
| 1．2．2．3 沉默信号放大和扩散 | 第18-21页 |
| 1．2．3 在翻译水平调节机体发育 | 第21-23页 |
| 1．3 RNAi的特征 | 第23-26页 |
| 1．3．1 miRNA和siRNA的异同 | 第24-26页 |
| 1．4 RNAi的应用 | 第26-38页 |
| 1．4．1 基因功能研究 | 第26-28页 |
| 1．4．2 抗病毒治疗 | 第28-33页 |
| 抗HIV作用 | 第28-29页 |
| 抗丙型肝炎病毒 | 第29-31页 |
| 抗乙型肝炎病毒 | 第31-32页 |
| 其他抗病毒研究 | 第32-33页 |
| 1．4．3 肿瘤基因治疗 | 第33-35页 |
| 1．4．4 RNAi在哺乳动物系统中的应用 | 第35-37页 |
| 1．4．5 RNAi机制中待解决的问题 | 第37-38页 |
| 1．5 siRNA的制备 | 第38-41页 |
| 1．5．1 体外制备 | 第38-39页 |
| 化学合成 | 第38页 |
| 体外转录 | 第38-39页 |
| 用RNase Ⅲ消化长片断双链RNA | 第39页 |
| 1．5．2 体内表达 | 第39-41页 |
| siRNA表达载体 | 第39-40页 |
| siRNA表达框架 | 第40-41页 |
| 第二章 麻疹病毒受体研究进展 | 第41-58页 |
| 2．1 麻疹病毒第一受体CD46 | 第42-47页 |
| 2．1．1 CD46受体功能的发现 | 第42-43页 |
| 2．1．2 CD46的分子结构 | 第43-45页 |
| 2．1．3 CD46是一个多功能分子 | 第45-47页 |
| 2．2 主要受体SLAM | 第47-52页 |
| 2．2．1 SLAM是麻疹病毒的第二受体 | 第47-49页 |
| 2．2．2 SLAM的分子结构 | 第49-51页 |
| 2．2．3 SLAM与麻疹病毒引起免疫抑制的关系 | 第51-52页 |
| 2．3 麻疹病毒与两个受体的关系 | 第52-54页 |
| 2．4 麻疹病毒H蛋白对受体CD46和SLAM的表达调控 | 第54页 |
| 2．5 研究背景和研究目的 | 第54-58页 |
| 2．5．1 关于麻疹病毒的研究背景 | 第54-56页 |
| 2．5．2 本研究的目的和意义 | 第56-58页 |
| 第三章：RNAi抑制麻疹病毒侵染细胞的研究 | 第58-91页 |
| 3．1 前言 | 第58-60页 |
| 3．2 材料与方法 | 第60-80页 |
| 3．2．1 载体，细胞，病毒，抗体和试剂 | 第60页 |
| 3．2．2 质粒DNA的小量制备 | 第60-61页 |
| 3．2．3 质粒DNA的大量制备 | 第61-62页 |
| 3．2．4 Bacmid DNA(＞100kb)的提取与制备 | 第62-63页 |
| 3．2．5 限制性酶消化 | 第63页 |
| 3．2．6 DNA片段回收 | 第63-65页 |
| 3．2．6．1 低熔点琼脂糖凝胶法 | 第63-64页 |
| 3．2．6．2 玻璃奶(Glass-milk)法 | 第64-65页 |
| 3．2．7 DNA片段和载体的连接 | 第65页 |
| 3．2．7．1 限制性酶消化 | 第65页 |
| 3．2．7．2 线状质粒DNA的去磷酸化 | 第65页 |
| 3．2．8 DNA片段和载体的连接 | 第65-66页 |
| 3．2．9 感受态细胞的制备与转化 | 第66-69页 |
| 3．2．9．1 冷氯化钙法制备新鲜感受态细胞 | 第66页 |
| 3．2．9．2 电转化感受态细胞的制备 | 第66-67页 |
| 3．2．9．3 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第67-68页 |
| A．TSS法： | 第67页 |
| B．氯化钙法： | 第67-68页 |
| 3．2．9．4 质粒的快速转化法 | 第68页 |
| 3．2．9．5 电转化感受态细胞的制备以及电转化 | 第68-69页 |
| 3．2．10 菌种的保存 | 第69页 |
| 3．2．11 菌落PCR | 第69-70页 |
| 3．2．12 细胞学实验方法 | 第70-73页 |
| 3．2．12．1 细胞培养基的配制(以RPMI 1640为例) | 第70页 |
| 3．2．12．2 细胞传代培养 | 第70-71页 |
| 3．2．12．3 细胞的冻存与复苏 | 第71-72页 |
| 冻存 | 第71页 |
| 复苏 | 第71-72页 |
| 3．2．12．4 细胞转染 | 第72-73页 |
| A．脂质体转染 | 第72页 |
| B．电转染法 | 第72-73页 |
| 3．2．13 流式细胞仪分析 | 第73-74页 |
| 3．2．14 Western blot分析 | 第74-75页 |
| A．SDS-PAGE： | 第74页 |
| B．转膜： | 第74-75页 |
| C．杂交： | 第75页 |
| 3．2．15 逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第75-77页 |
| A．细胞总RNA的提取 | 第75-76页 |
| B．逆转录 | 第76页 |
| C．PCR | 第76-77页 |
| 3．2．16 病毒学实验方法 | 第77-78页 |
| 3．2．16．1 病毒的增殖 | 第77页 |
| 3．2．16．2 病毒粒子的纯化 | 第77-78页 |
| A．硫酸铵纯化法 | 第77页 |
| B．PEG8000纯化法 | 第77-78页 |
| 3．2．16．3 空斑滴定 | 第78页 |
| 3．2．17 实验中所用到的溶液及试剂 | 第78-80页 |
| 3．3 实验结果 | 第80-88页 |
| 3．3．1 siRNA靶序列的设计 | 第80-81页 |
| 3．3．2 siRNA载体的构建和鉴定 | 第81-83页 |
| 3．3．3 SLAM—RNAi3对SLAM转录的抑制 | 第83-86页 |
| 3．3．4 SLAM—RNAi3抑制了麻疹病毒对B95—8细胞的侵染 | 第86-88页 |
| 3．4 讨论 | 第88-91页 |
| 研究总结和创新点 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-121页 |
| 硕士期间发表和待发表论文 | 第121-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
