综述:蜱功能基因研究进展 | 第1-16页 |
引言 | 第16-18页 |
第一章:亚洲璃眼蜱AP27基因的克隆和序列分析 | 第18-37页 |
1.材料 | 第18-19页 |
·实验动物 | 第18页 |
·菌种 | 第18页 |
·仪器设备 | 第18-19页 |
·主要试剂的配制 | 第19页 |
2.方法 | 第19-26页 |
·亚洲璃眼蜱的实验室饲养 | 第19-20页 |
·亚洲璃眼蜱唾液腺总RNA的制备 | 第20页 |
·亚洲璃眼蜱功能基因的克隆 | 第20-25页 |
·目的序列的生物信息学和RT-PCR分析 | 第25-26页 |
3.结果与分析 | 第26-34页 |
·亚洲璃眼蜱的实验室饲养 | 第26-27页 |
·目的基因5’端的克隆结果 | 第27-29页 |
·基因的全长克隆 | 第29-30页 |
·目的基因AP27的生物信息学和RT-PCR分析 | 第30-34页 |
4.讨论 | 第34-37页 |
·PCR特异性的改进 | 第34页 |
·RNA质量对RACE方法的影响 | 第34-35页 |
·RACE方法在获取未知基因方面的应用 | 第35页 |
·RT-PCR方法在分析目的基因表达变化中的应用 | 第35-36页 |
·生物信息学与基因功能的预测 | 第36-37页 |
第二章:亚洲璃眼蜱AP18基因的功能研究 | 第37-59页 |
1.材料 | 第37-39页 |
·实验动物 | 第37页 |
·菌种和试剂 | 第37-38页 |
·仪器设备 | 第38页 |
·主要试剂的配制 | 第38-39页 |
2.方法 | 第39-47页 |
·AP18基因的生物信息学和RT-PCR分析 | 第39页 |
·原核表达载体的构建 | 第39-41页 |
·基因的原核表达 | 第41-42页 |
·融合蛋白的纯化及浓度测定 | 第42-44页 |
·动物免疫试验 | 第44-45页 |
·免疫分析实验 | 第45-47页 |
3.结果与分析 | 第47-55页 |
·AP18基因的功能初步预测 | 第47-49页 |
·AP18/PET32a重组质粒鉴定 | 第49-50页 |
·AP18/PET32a重组蛋白的原核表核和纯化 | 第50-52页 |
·蛋白质的浓度测定 | 第52-53页 |
·琼扩试验 | 第53页 |
·酶联免疫吸附实验 | 第53-54页 |
·Western Blotting分析抗TRX-AP18血清结果 | 第54-55页 |
4.讨论 | 第55-59页 |
·原核表达 | 第55-56页 |
·蛋白的纯化和复性 | 第56-57页 |
·Western blot | 第57-59页 |
第三章:结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
致谢 | 第66-67页 |
作者简介及硕士期间发表的论文 | 第67页 |