上篇 文献综述 | 第1-24页 |
第一章 杨树遗传转化技术研究进展 | 第8-12页 |
1. 杨树遗传转化体系研究进展 | 第8-10页 |
·农杆菌介导法 | 第8-10页 |
·直接导入法 | 第10页 |
2. 影响农杆菌转化效果的主要因素 | 第10-12页 |
·不同类型菌株致病力的强弱不同 | 第10-11页 |
·不同杨树无性系间的差异 | 第11页 |
·外界因素对转化效果的影响 | 第11-12页 |
第二章 杨树抗虫基因的研究进展 | 第12-14页 |
1. 苏云金芽孢杆菌杀虫结晶蛋白(Bt)基因 | 第12页 |
2. 豇豆胰蛋白酶抑制剂(CpTI)基因 | 第12-13页 |
3. 其他抗虫基因 | 第13-14页 |
第三章 转基因植物的鉴定方法的研究概况 | 第14-20页 |
1. 外源基因整合的鉴定 | 第14-16页 |
·选择标记基因 | 第14-15页 |
·PCR检测与分子标记 | 第15-16页 |
·Southern杂交 | 第16页 |
2. 外源基因表达的检测 | 第16-17页 |
3. 外源基因转录的检测 | 第17-18页 |
4. 外源基因表达蛋白的检测 | 第18-19页 |
·免疫技术 | 第18页 |
·Western印迹 | 第18页 |
·DNA芯片技术 | 第18-19页 |
5. 利用生理生化指标检测转基因的表达 | 第19页 |
6. 利用生物鉴定法 | 第19-20页 |
第四章 杨树基因工程育种中存在的问题及展望 | 第20-23页 |
1. 遗传转化过程中存在的技术问题 | 第20页 |
2. 转基因杨树稳定表达的问题 | 第20页 |
3. 昆虫对转基因植物产生抗性的问题 | 第20-21页 |
4. 转基因林木对环境造成的生态风险问题 | 第21-23页 |
第五章 南林895杨背景简介 | 第23-24页 |
下篇 研究报告 | 第24-50页 |
第一章 南林895杨遗传转化受体系统的建立 | 第24-30页 |
1. 实验材料与方法 | 第24页 |
·植物材料 | 第24页 |
·培养基 | 第24页 |
·培养条件 | 第24页 |
·外植体的脱毒 | 第24页 |
·外植体的制备 | 第24页 |
·卡那霉素筛选浓度的确定 | 第24页 |
2. 结果与分析 | 第24-29页 |
·组培再生体系的建立 | 第24-25页 |
·高效组培再生体系的优化 | 第25-28页 |
·卡那霉素筛选浓度的确定 | 第28-29页 |
3. 讨论 | 第29-30页 |
·外植体的脱毒培养 | 第29页 |
·高效组培再生体系的建立 | 第29页 |
·卡那霉素筛选浓度的确定 | 第29-30页 |
第二章 南林895 杨遗传转化条件的优化 | 第30-43页 |
1. 实验材料与方法 | 第30-33页 |
·实验材料 | 第30-31页 |
·植物材料 | 第30页 |
·菌株和质粒 | 第30页 |
·抗生素 | 第30页 |
·培养基 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-33页 |
·外植体的制备 | 第31页 |
·正负对照的设置 | 第31页 |
·菌株的活化 | 第31-32页 |
·菌株的保存 | 第32页 |
·菌液的制备 | 第32页 |
·抗虫基因的转化 | 第32页 |
·影响农杆菌转化各因素 | 第32-33页 |
·转化效率评价指标 | 第33页 |
2. 结果与分析 | 第33-41页 |
·预培养时间对芽分化的影响 | 第33-34页 |
·菌液浓度对芽分化的影响 | 第34-35页 |
·侵染时间对芽分化的影响 | 第35-37页 |
·共培养时间对芽分化的影响 | 第37-38页 |
·共培养温度对芽分化的影响 | 第38页 |
·共培培养基pH值对芽分化的影响 | 第38-39页 |
·乙酰丁香酮的添加对芽分化的影响 | 第39-40页 |
·共培培养基中的CoCl_2·6H_2O对转化的影响 | 第40-41页 |
3. 讨论 | 第41-43页 |
·外植体状态对转化的影响 | 第41页 |
·假转化体的产生 | 第41页 |
·乙酰丁香酮的添加对转化的影响 | 第41-42页 |
·影响转化效率的因素 | 第42-43页 |
第三章 转基因植株的分子检测 | 第43-49页 |
1. 实验材料与方法 | 第43-46页 |
·实验材料 | 第43页 |
·实验方法 | 第43-46页 |
·CTAB法提取植物总DNA | 第43-44页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第44页 |
·碱裂解法小量提取质粒DNA | 第44-45页 |
·转基因植株的PCR检测 | 第45-46页 |
·转基因植株的移栽 | 第46页 |
2. 结果与分析 | 第46-48页 |
·叶片总DNA提取 | 第46页 |
·转基因植株PCR检测 | 第46-47页 |
·转基因植株的移栽 | 第47-48页 |
3. 讨论 | 第48-49页 |
第四章 主要结论和进一步研究展望 | 第49-50页 |
1. 主要结论 | 第49页 |
2. 展望 | 第49-50页 |
主要英文缩略词表 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-55页 |
详细摘要 | 第55-58页 |