| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 一、文献综述 | 第9-31页 |
| 1 植物抗旱性研究 | 第9-22页 |
| ·植物抗旱的生理、生化机制 | 第10-11页 |
| ·植物抗旱的分子机制 | 第11-22页 |
| ·水分胁迫诱导表达的基因 | 第11-16页 |
| ·调控蛋白 | 第12页 |
| ·功能蛋白 | 第12-16页 |
| ·水分胁迫应答基因的表达调控 | 第16-19页 |
| ·转录水平调控 | 第16-18页 |
| ·转录后水平调控 | 第18-19页 |
| ·水分胁迫信号感知与转导 | 第19-22页 |
| ·水分胁迫的信号感知 | 第19页 |
| ·水分胁迫的信号转导 | 第19-22页 |
| ·玉米水分胁迫应答基因的研究状况 | 第22页 |
| 2 差异显示(Differential Display)技术 | 第22-29页 |
| ·差异显示技术的原理和实验程序 | 第23页 |
| ·差异显示技术的优点与缺陷 | 第23-24页 |
| ·DDRT-PCR引物设计 | 第24-25页 |
| ·DDRT-PCR产物鉴定方法 | 第25-27页 |
| ·差异显示凝胶的选择 | 第27-28页 |
| ·全基因序列获得 | 第28页 |
| ·应用差异显示技术对玉米基因的研究进展 | 第28-29页 |
| ·应用差异显示技术对作物抗旱相关序列的研究进展 | 第29页 |
| 3 研究的目的与意义 | 第29-31页 |
| 二、材料与方法 | 第31-41页 |
| 1 材料 | 第31-33页 |
| ·试验材料 | 第31页 |
| ·引物 | 第31页 |
| ·锚定引物 | 第31页 |
| ·随机引物 | 第31页 |
| ·载体、菌株与抗生素 | 第31-32页 |
| ·试剂 | 第32页 |
| ·分析软件 | 第32-33页 |
| 2 方法 | 第33-41页 |
| ·总RNA提取 | 第33页 |
| ·总RNA提取步骤 | 第33页 |
| ·逆转录及DDRT-PCR反应 | 第33-34页 |
| ·DDRT-PCR产物凝胶电泳分析和差异片段的回收、重扩增 | 第34-35页 |
| ·差异片段的克隆 | 第35-37页 |
| ·PCR产物与载体连接 | 第35页 |
| ·感受态细胞制备 | 第35页 |
| ·重组子热击转化入E.coli DH5α | 第35-36页 |
| ·克隆片段的鉴定 | 第36-37页 |
| ·质粒DNA提取 | 第36-37页 |
| ·PCR法鉴定 | 第37页 |
| ·Nothern杂交 | 第37-39页 |
| ·总RNA的电泳和转膜 | 第37-38页 |
| ·探针标记 | 第38-39页 |
| ·预杂交和杂交 | 第39页 |
| ·严格洗脱 | 第39页 |
| ·底物反应 | 第39页 |
| ·序列测定与分析 | 第39-41页 |
| 三、结果与分析 | 第41-52页 |
| 1 总RNA的质量和浓度检测 | 第41页 |
| 2 逆转录 | 第41-42页 |
| 3 差异显示结果 | 第42-43页 |
| 4 差异片段的回收、重扩增 | 第43-44页 |
| 5 差异片段的克隆 | 第44页 |
| 6 阳性克隆的Northern杂交分析 | 第44-45页 |
| 7 序列分析 | 第45-52页 |
| ·MD1片段 | 第45-47页 |
| ·MD2片段 | 第47-49页 |
| ·MD3片段 | 第49-52页 |
| 四、讨论 | 第52-57页 |
| 1 RNA的制备与逆转录 | 第52-53页 |
| 2 PCR反应及其产物分析时凝胶的选择 | 第53-54页 |
| 3 差异显示技术中假阳性的产生和排除 | 第54页 |
| 4 PCR产物克隆 | 第54-55页 |
| 5 玉米对干旱胁迫的应答 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |