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水稻胞外钙感受器基因CAS的克隆及功能研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-6页
名词缩写第6-7页
第一部分 文献综述第7-22页
 一、 钙信号转导及CAS的研究进展第7-15页
  1 细胞内Ca~(2+)的分布第7-8页
  2 细胞内Ca~(2+)水平的变化及调节—钙通道第8-12页
  3 钙离子的作用及信号转导机制第12-14页
  4 钙信号的研究方法第14-15页
 二、 胞外钙受体的研究进展第15-18页
  1 动物中胞外钙受体研究进展第16-17页
  2 植物中胞外钙受体的研究进展第17-18页
 三、 反义RNA技术原理及应用第18-20页
  1 反义RNA的作用机理第18-19页
  2 反义RNA的优点及应用第19-20页
  3 问题与展望第20页
 四、 本论文的立题依据和目标第20-22页
第二部分 材料和方法第22-39页
 一、 实验材料第22页
  1 植物材料第22页
  2 菌株和质粒第22页
  3 质粒载体第22页
  4 引物、测序第22页
 二、 实验试剂第22-24页
  1 酶及部分试剂第22页
  2 培养基第22-23页
  3 所用的抗生素(储存浓度)第23页
  4 缓冲液第23-24页
  5 常用的溶液第24页
 三、 实验方法第24-39页
  1 水稻CAS基因的RT-PCR扩增第24-27页
  2 重组质粒载体(pGEM-CAS)的构建(流程见图1)第27-29页
  3 CAS基因测序及功能分析第29页
  4 水稻溶液培养及Northern杂交第29-34页
  5 反义载体PBI—CAS的构建及水稻初转化第34-36页
  6 载体pcDNA-CAS的构建第36-39页
第三部分 实验结果和讨论第39-53页
 一、 CAS基因的RT-PCR扩增第39页
  1 CAS Gene cDNA引物设计及合成第39页
  2 提取水稻总RNA,逆转录及PCR扩增第39页
 二、 CAS基因及蛋白的序列分析第39-46页
  1 重组载体pGEM-CAS的构建与鉴定第39-41页
  2 CAS基因及蛋白结构及与功能分析第41-46页
 三、 CAS在不同钙离子胁迫条件下的表达第46-48页
  1 水稻的消毒及初培第47页
  2 Northern bloting分析第47-48页
 四、 PBI121-CAS反义载体的构建与水稻愈伤的转化第48-49页
 五、 pcDNA-CAS载体的构建第49页
 六、 讨论第49-53页
第四部分 小结与展望第53-54页
 一、 小结第53页
 二、 展望第53-54页
第五部分 参考文献第54-59页
读硕期间发表论文情况第59-60页
致谢第60-61页
附录:CAS序列第61-63页

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