| 中文摘要 | 第1-11页 |
| 英文摘要 | 第11-14页 |
| 1 引言 | 第14-29页 |
| 1．1 高盐胁迫与植物 | 第14-15页 |
| 1．2 低温胁迫与植物 | 第15-16页 |
| 1．3 植物胁迫诱导基因的研究进展 | 第16-28页 |
| 1．3．1 甜菜碱合成酶的研究进展 | 第17-22页 |
| 1．3．1．1 甜菜碱对盐胁迫下植物的保护作用 | 第18-19页 |
| 1．3．1．2 甜菜碱在植物中的合成途径 | 第19-21页 |
| 1．3．1．3 甜菜碱合成酶基因的转化及在植物抗盐研究中的应用 | 第21-22页 |
| 1．3．2 DREB家族的研究进展 | 第22-28页 |
| 1．3．2．1 AP2/EREBP转录因子家族 | 第24-25页 |
| 1．3．2．2 DREB转录因子 | 第25-28页 |
| 1．4 本课题的研究目的及意义 | 第28-29页 |
| 2 材料与方法 | 第29-51页 |
| 2．1 试验材料 | 第29-30页 |
| 2．1．1 植物材料 | 第29页 |
| 2．1．2 菌株与质粒 | 第29页 |
| 2．1．3 酶及生化试剂 | 第29页 |
| 2．1．4 PCR引物 | 第29-30页 |
| 2．2 试验方法 | 第30-51页 |
| 2．2．1 烟草(棉花)无菌苗的种植，和处理方法 | 第30页 |
| 2．2．2 棉花GhDREB1A/BcDNA序列的克隆 | 第30-37页 |
| 2．2．2．1 利用TRIZOL试剂盒提取总RNA | 第30-31页 |
| 2．2．2．2 RNA反转录及cDNA纯化 | 第31页 |
| 2．2．2．3 GhDREB1A/B中间片段的获得 | 第31-32页 |
| 2．2．2．4 棉花GhDREB1 A/B cDNA的3′RACE | 第32-33页 |
| 2．2．2．5 棉花GhDREB1 A/b cDNA的5′RACE | 第33页 |
| 2．2．2．6 棉花GhDREB1 A/B cDNA全长片段的获得 | 第33-34页 |
| 2．2．2．7 棉花基因组中GhDREB1B基因的上游启动子序列的克隆与分析 | 第34-37页 |
| 2．2．3 棉花GhBADH基因的克隆 | 第37-40页 |
| 2．2．3．1 棉花总RNA提取和反转录 | 第37页 |
| 2．2．3．2 GhBADH中间片段的获得 | 第37页 |
| 2．2．3．3 棉花GhBADH基因的3′RACE | 第37-39页 |
| 2．2．3．4 棉花GhBADH基因的5′RACE | 第39页 |
| 2．2．3．5 棉花GhBADH基因全长片段的获得 | 第39-40页 |
| 2．2．4 棉花GhDREB1及GhBADH基因的克隆及测序 | 第40-43页 |
| 2．2．4．1 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第40-41页 |
| 2．2．4．2 电泳目的基因片段的回收 | 第41页 |
| 2．2．4．3 连接 | 第41-42页 |
| 2．2．4．4 转化及克隆筛选 | 第42页 |
| 2．2．4．5 碱法小量提取质粒DNA及酶切鉴定 | 第42-43页 |
| 2．2．4．6 序列测定 | 第43页 |
| 2．2．5 表达载体的构建 | 第43-45页 |
| 2．2．5．1 碱法大量提取质粒DNA | 第43-45页 |
| 2．2．5．2 载体构建 | 第45页 |
| 2．2．6 根癌农杆菌LBA4404感受态细胞的制备及转化 | 第45-46页 |
| 2．2．6．1 农杆菌感受态细胞的制备 | 第45页 |
| 2．2．6．2 冻融法转化农杆菌 | 第45-46页 |
| 2．2．7 利用农杆菌介导转化烟草 | 第46-47页 |
| 2．2．8 转基因烟草植株的PCR检测 | 第47-48页 |
| 2．2．8．1 CTAB法微量法提取基因组DNA | 第47页 |
| 2．2．8．2 转基因植株的PCR筛选 | 第47-48页 |
| 2．2．9 Northern杂交分析 | 第48页 |
| 2．2．10 Southern杂交分析 | 第48-50页 |
| 2．2．10．1 植物基因组DNA的制备 | 第48-49页 |
| 2．2．10．2 限制性内切酶消化 | 第49页 |
| 2．2．10．3 电泳、转膜 | 第49-50页 |
| 2．2．10．4 预杂交 | 第50页 |
| 2．2．10．5 探针合成及杂交 | 第50页 |
| 2．2．10．6 洗膜及显影 | 第50页 |
| 2．2．11 转基因植株生理指标测定 | 第50-51页 |
| 2．2．11．1 植株光合表速率与相关参数的测定 | 第50页 |
| 2．2．11．2 植物叶片的荧光测定 | 第50-51页 |
| 3． 结果与分析 | 第51-82页 |
| 3．1 棉花总RNA的提取及反转录 | 第51页 |
| 3．2 棉花GhDREB1A/B基因的克隆 | 第51-63页 |
| 3．2．1 棉花GhDREB1A/B基因中间片段的克隆与测序 | 第51-52页 |
| 3．2．2 棉花GhDREB1A/B基因3′端的克隆与测序 | 第52-54页 |
| 3．2．3 棉花GhDREB1A/B基因5′端的克隆与测序 | 第54-55页 |
| 3．2．4 棉花GhDREB1A/B基因全长序列的获得 | 第55-61页 |
| 3．2．5 棉花GhDREB1A/B蛋白可能的空间结构 | 第61页 |
| 3．2．6 棉花GhDREB1A/BDNA全长及GhDREB1B上游片段的克隆及分析 | 第61-63页 |
| 3．3 棉花GhDREB1A/B基因表达分析 | 第63-65页 |
| 3．4 棉花野生植株的Southern blot分析 | 第65-66页 |
| 3．5 烟草表达载体pBI-GhDREB1的构建 | 第66页 |
| 3．6 质粒pBI一GhDREB1转化农杆菌 | 第66-67页 |
| 3．7 烟草转基因植株的获得 | 第67页 |
| 3．8 转基因烟草的PCR检测 | 第67-68页 |
| 3．9 转基因烟草的Northern杂交分析 | 第68-69页 |
| 3．10 转基因烟草的光合参数测定 | 第69-70页 |
| 3．11 转基因烟草的荧光参数测定 | 第70-71页 |
| 3．12 转基因烟草的表型特征 | 第71-72页 |
| 3．12．1 株高变矮 | 第71-72页 |
| 3．12．2 开花期推迟 | 第72页 |
| 3．13 棉花GhBADH基因的克隆 | 第72-82页 |
| 3．13．1 棉花GhBADH基因中间片段的克隆与测序 | 第72-74页 |
| 3．13．2 棉花GhBADH基因3′端的克隆与测序 | 第74-75页 |
| 3．13．3 棉花GhBADH基因5′端的克隆与测序 | 第75-77页 |
| 3．13．4 棉花GhBADH基因全长序列的获得 | 第77-82页 |
| 4． 讨论 | 第82-87页 |
| 4．1 棉花GhDREB1A/B、GhBADH基因及其同源基因之间的序列分析 | 第82-83页 |
| 4．2 棉花GhDREB1A/B基因的表达模式与其功能的关系 | 第83页 |
| 4．3 GhDREB1B上游启动子序列的克隆及分析 | 第83-85页 |
| 4．4 转GhDREB1基因的烟草植株的表型变化 | 第85页 |
| 4．5 GhDREB1A/B与GhBADH对于提高作物抗逆能力的作用 | 第85-87页 |
| 5． 结论 | 第87-89页 |
| 参考文献 | 第89-99页 |
| 致谢 | 第99页 |
