| 英文缩略表 | 第1-10页 |
| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1 引言 | 第15-44页 |
| ·蛋白质的降解在生命活动过程中的地位 | 第16-17页 |
| ·泛素(Ub)的结构、分布与含量 | 第17-20页 |
| ·Ub 的发现 | 第17-18页 |
| ·Ub 的结构 | 第18-19页 |
| ·Ub 的分布及含量变化 | 第19-20页 |
| ·Ub 基因的种类和结构 | 第20-23页 |
| ·泛素连接级联反应 | 第23-30页 |
| ·HECT 类型 | 第26-27页 |
| ·Ring/U-box 类型 | 第27-28页 |
| ·SCF 类型 | 第28-29页 |
| ·APC 类型 | 第29-30页 |
| ·26S 蛋白酶体 | 第30-32页 |
| ·Ub-C末端水解酶 | 第32页 |
| ·Ub/26s 蛋白酶体途径的生理功能 | 第32-42页 |
| ·Ub/26s 蛋白酶体途径与植物激素 | 第33-35页 |
| ·Ub/26s 蛋白酶体途径与信号转导 | 第35页 |
| ·Ub/26s 蛋白酶体途径与植物抗病 | 第35-36页 |
| ·Ub/26s 蛋白酶体途径与光形态建成 | 第36-37页 |
| ·Ub/26s 蛋白酶体途径与植物的环境胁迫抗性 | 第37-42页 |
| ·干旱 | 第37-39页 |
| ·热胁迫 | 第39-40页 |
| ·机械与化学损伤 | 第40页 |
| ·冷胁迫 | 第40-41页 |
| ·光辐射 | 第41页 |
| ·细胞周期调控 | 第41-42页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第42-44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-65页 |
| ·试验材料与处理 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·材料处理 | 第44页 |
| ·菌株与质粒 | 第44页 |
| ·酶及生化试剂 | 第44页 |
| ·PCR 引物 | 第44-45页 |
| ·试验方法 | 第45-65页 |
| ·利用TRIZOL试剂盒提取RNA | 第45-46页 |
| ·RNA 反转录 | 第46-47页 |
| ·小麦 Ub 基因片段的克隆 | 第47-50页 |
| ·中间片段的获得 | 第47-48页 |
| ·Ub 基因全长的分离 | 第48-50页 |
| ·小麦 Ub 基因的克隆及测序 | 第50-53页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第50页 |
| ·连接 | 第50-51页 |
| ·转化及克隆筛选 | 第51-52页 |
| ·碱法小量提取质粒 DNA 及酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·酶切鉴定 | 第53页 |
| ·序列测定 | 第53页 |
| ·Northern 杂交 | 第53-55页 |
| ·RNA 提取及电泳 | 第53-54页 |
| ·转膜及烘膜 | 第54页 |
| ·探针合成 | 第54-55页 |
| ·预杂交及杂交及放射自显影 | 第55页 |
| ·Southern 杂交 | 第55-57页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第55-56页 |
| ·基因组 DNA 的限制性内切酶消化 | 第56页 |
| ·转膜 | 第56-57页 |
| ·探针合成 | 第57页 |
| ·预杂交、杂交及放射自显影 | 第57页 |
| ·表达载体的构建 | 第57-60页 |
| ·碱法大量提取质粒DNA | 第57-59页 |
| ·载体构建 | 第59-60页 |
| ·根癌农杆菌 LBA4404 感受态细胞的制备及转化 | 第60-62页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第60页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第60-61页 |
| ·利用农杆菌介导转化烟草 | 第61-62页 |
| ·转基因烟草植株的 PCR 检测 | 第62-65页 |
| ·CTAB 法微量法提取基因组 DNA | 第62-63页 |
| ·转基因植株的 PCR 筛选 | 第63-65页 |
| 3 结果与分析 | 第65-81页 |
| ·小麦 Ub 基因的克隆 | 第65-69页 |
| ·小麦胚芽鞘 RNA 的提取及反转录 | 第65页 |
| ·基因中间片段的克隆 | 第65-67页 |
| ·Ub基因全长的克隆 | 第67-69页 |
| ·基因序列同源性分析 | 第69-72页 |
| ·基因表达特性分析 | 第72-75页 |
| ·小麦 Ub2 基因 Southern 杂交分析 | 第72-74页 |
| ·小麦 Ub2 基因表达的 Northern 杂交分析 | 第74-75页 |
| ·不同程度水分胁迫对小麦胚芽鞘中 Ub2 基因转录表达的影响 | 第74页 |
| ·不同水分胁迫时间对小麦胚芽鞘中 Ub2 基因转录表达的影响 | 第74-75页 |
| ·Ub2 基因转化烟草 | 第75-81页 |
| ·正义表达载体 PBI-UBP 和反义表达载体 PBI-UBN 的构建 | 第75-76页 |
| ·克隆载体的 PCR 检测 | 第76-77页 |
| ·正、反义表达载体的 PCR 检测 | 第77-79页 |
| ·小麦 Ub2 基因转化烟草及转基因植株的分子检测 | 第79-81页 |
| 4 讨论 | 第81-85页 |
| ·小麦 Ub 基因及其同源基因之间的序列分析 | 第81-82页 |
| ·小麦中 Ub2 基因的表达特征 | 第82-84页 |
| ·展望 | 第84-85页 |
| ·进一步研究的设想 | 第85页 |
| 5 主要结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-100页 |
| 致谢 | 第100-101页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第101-102页 |
| 附录 | 第102-106页 |
