| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 前言 | 第13-17页 |
| 第一章 赤点石斑鱼性逆转前后抑制性差减杂交cDNA(SSH cDNA)文库构建及差异表达克隆的筛选 | 第17-47页 |
| 摘要 | 第17页 |
| 1 引言 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-33页 |
| ·材料 | 第18-20页 |
| ·常用溶液的配制 | 第20-21页 |
| ·实验方法和步骤 | 第21-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-42页 |
| ·总RNA的提取与mRNA的纯化 | 第33页 |
| ·SMART cDNA的合成 | 第33-34页 |
| ·抑制性差减杂交 | 第34-36页 |
| ·PCR筛选差减文库 | 第36-37页 |
| ·斑点杂交分析 | 第37-38页 |
| ·差异cDNA片段的序列分析 | 第38-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 5 小结与展望 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |
| 第二章 赤点石斑鱼一氧化氮合酶蛋白抑制剂基因(EPIN)的克隆及其表达分析 | 第47-87页 |
| 摘要 | 第47页 |
| 1 引言 | 第47-48页 |
| 2 材料和方法 | 第48-68页 |
| ·材料 | 第48-53页 |
| ·方法 | 第53-68页 |
| 3 结果与分析 | 第68-82页 |
| ·石斑鱼的成功性反转及血液中激素浓度变化 | 第68页 |
| ·差减基因EPIN的检出 | 第68-69页 |
| ·EPIN的核苷酸序列和推测的氨基酸序列 | 第69-71页 |
| ·同源性分析 | 第71页 |
| ·EPIN基因的生物信息学分析 | 第71-72页 |
| ·石斑鱼性反转不同时期性腺组织和性反转雄鱼不同组织中EPIN的转录水平 | 第72-74页 |
| ·表达EPIN cDNA的克隆和鉴定 | 第74页 |
| ·重组表达载体pET-EPIN的构建 | 第74-76页 |
| ·重组质粒pET-GST-EPIN的克隆和筛选 | 第76-77页 |
| ·PIN的表达分析 | 第77-79页 |
| ·IgG的滴定 | 第79页 |
| ·表达产物的免疫学分析 | 第79-80页 |
| ·Western印迹分析性反转不同时期性腺中EPIN的表达 | 第80-81页 |
| ·EPIN基因的免疫组化分析 | 第81-82页 |
| 4 讨论 | 第82-83页 |
| 5 小结与展望 | 第83-84页 |
| 参考文献 | 第84-87页 |
| 第三章 赤点石斑鱼钙调蛋白基因(ECaM)的克隆及其表达分析 | 第87-110页 |
| 摘要 | 第87页 |
| 1 引言 | 第87-88页 |
| 2 材料和方法 | 第88-95页 |
| ·材料 | 第88-89页 |
| ·方法 | 第89-95页 |
| 3 结果与分析 | 第95-106页 |
| ·差减基因ECaM的检出 | 第95页 |
| ·ECaM的cDNA全长序列及推测的氨基酸序列 | 第95-97页 |
| ·同源性分析 | 第97-98页 |
| ·ECaM基因的生物信息学分析 | 第98页 |
| ·石斑鱼性反转不同时期性腺组织和性反转雄鱼不同组织中ECaM的转录水平 | 第98页 |
| ·表达ECaMcDNA的克隆和鉴定 | 第98-101页 |
| ·重组表达载体pET-ECaM的构建 | 第101-103页 |
| ·重组质粒pET-GST-ECaM的克隆和筛选 | 第103页 |
| ·ECaM的表达分析 | 第103-105页 |
| ·表达产物的免疫学分析 | 第105-106页 |
| ·Western印迹分析性反转不同时期性腺中ECaM的表达 | 第106页 |
| 4 讨论 | 第106-107页 |
| 5 小结与展望 | 第107-108页 |
| 参考文献 | 第108-110页 |
| 第四章 赤点石斑鱼Sox9基因的克隆及其特征分析 | 第110-125页 |
| 摘要 | 第110页 |
| 1 引言 | 第110-111页 |
| 2.材料和方法 | 第111-115页 |
| ·材料 | 第111-112页 |
| ·方法 | 第112-115页 |
| 3 结果与分析 | 第115-122页 |
| ·石斑鱼下丘脑SMART cDNA合成 | 第115页 |
| ·Sox9的扩增及鉴定 | 第115页 |
| ·Sox9的编码区序列及其推断的氨基酸序列 | 第115-116页 |
| ·同源性分析 | 第116-118页 |
| ·Sox9基因的生物信息学分析 | 第118页 |
| ·不同组织中Sox9基因的转录水平 | 第118-122页 |
| 4 讨论 | 第122-123页 |
| 5 小结与展望 | 第123页 |
| 参考文献 | 第123-125页 |
| 文献综述之一 鱼类性别决定的遗传基础研究概况 | 第125-164页 |
| 参考文献 | 第148-164页 |
| 文献综述之二 抑制性差减杂交技术研究进展 | 第164-178页 |
| 参考文献 | 第174-178页 |
| 致谢 | 第178-179页 |
| 附录 | 第179-182页 |
| 声明 | 第182页 |
