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营养相关基因(fdr3和TaNRT1)功能的进一步研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-6页
缩写词一览表第6-7页
第一部分 fdr3功能的进一步研究第7-33页
 导言第7-12页
 材料与试剂第12-14页
 方法第14-19页
  一. fdr3重组质粒融合蛋白的诱导及western blotting第14-15页
   1. 诱导重组体的融合蛋白的表达第14页
   2. 融合蛋白的SDS-PAGE第14页
   3. 银染第14页
   4. 考染第14页
   5. 大肠杆菌粗提物的制备及对抗血清的处理第14-15页
   6. 转膜和杂交第15页
  二. 玉米可溶性蛋白的western blotting第15-16页
   1. 缺铁胁迫玉米的栽培第15-16页
   2. 可溶性蛋白的提取第16页
   3. SDS-PAGE第16页
   4. 可溶性蛋白的western blotting第16页
  三. 原fdr3 ORF的鉴定及其部分片段的获得第16-17页
   1. 原fdr3重组质粒的双酶切第16页
   2. 双酶切产物的回收第16-17页
  四. fdr3中ORF的Southern blotting检测第17-18页
   1. 植物组织基因组DNA的提取第17页
   2. 转膜第17页
   3. 预杂交第17页
   4. 探针的制备第17-18页
   5. 杂交第18页
   6. 洗膜及放射自显影第18页
  五. fdr3基因的扩增第18-19页
   1. 引物的设计第18页
   2. 引物的合成第18页
   3. PCR第18-19页
 结果与分析第19-26页
 讨论第26-28页
 展望第28-29页
 结论第29-30页
 参考文献第30-33页
第二部分 TaNRT1的进一步克隆第33-54页
 导言第33-37页
 材料与试剂第37-38页
 方法第38-42页
  一. pBluescript质粒载体与AF片段(前RT-PCR产物)重组体的构建及鉴定第38-39页
   1. 载体与外源片段的连接第38页
   2. DH5α感受态细菌的制备第38页
   3. 重组质粒的转化与蓝白筛选第38-39页
   4. 质粒的提取第39页
   5. 重组质粒的双酶切第39页
   6. 重组质粒的测序第39页
  二. pGEX-1,pGEX-2T,pGEX-3X质粒表达载体与AF片段重组体的构建及鉴定第39-41页
   1. 质粒表达载体进行双酶切第39-40页
   2. pBluescript-T-TaNRT1重组体进行双酶切第40页
   3. 双酶切产物的回收第40页
   4. 质粒表达载体与外源片段的连接第40页
   5. JM109感受态细菌的制备第40页
   6. 重组质粒的转化第40-41页
   7. 质粒的提取第41页
   8. 重组质粒的单酶切第41页
   9. 测序第41页
  三. 融合蛋白的诱导及SDS-PAGE第41-42页
   1. 融合蛋白的诱导表达第41页
   2. 融合蛋白的SDS-PAGE第41页
   3. 考染第41-42页
 结果与分析第42-47页
 讨论第47-48页
 展望第48-49页
 结论第49-50页
 参考文献第50-52页
 致谢第52-54页

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