中英对照 | 第1-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
英文摘要(ABSTRACT) | 第9-12页 |
前言 | 第12-15页 |
材料和方法 | 第15-23页 |
一、 材料 | 第15-16页 |
二、 实验方法 | 第16-23页 |
(一) 恶性疟原虫荧光定量PCR检测方法的建立 | 第16-21页 |
1. 引物及探针的设计及合成 | 第16-17页 |
2. 靶基因的扩增与纯化 | 第17-18页 |
2.1 模板DNA的制备 | 第17页 |
2.2 常规PCR扩增 | 第17页 |
2.3 检测 | 第17-18页 |
2.4 靶基因的纯化 | 第18页 |
3. PCR扩增产物的克隆 | 第18-19页 |
3.1 重组质粒的构建 | 第18-19页 |
3.2 重组质粒的筛选 | 第19页 |
4. 荧光定量PCR反应条件的优化和标准曲线的建立 | 第19-20页 |
4.1 阳性定量标准模板的建立 | 第19页 |
4.2 荧光定量PCR反应条件的优化及标准曲线的建立 | 第19-20页 |
Mg~(2+)浓度的优化 | 第20页 |
退火温度的优化 | 第20页 |
荧光定量标准曲线的建立 | 第20页 |
模板提取方法的选择 | 第20页 |
5. 样品的检测结果 | 第20-21页 |
5.1 与镜检、常规PCR检测法比较 | 第20-21页 |
5.2 荧光定量PCR方法的评价 | 第21页 |
敏感度 | 第21页 |
特异度 | 第21页 |
仪器的稳定性 | 第21页 |
操作的稳定性 | 第21页 |
统计学处理 | 第21页 |
(二) 间日疟原虫荧光定量PCR检测方法的建立 | 第21-23页 |
1. 血样采集及模板DNA的制备 | 第22页 |
2. 引物及探针的设计与合成 | 第22页 |
3. 靶基因的扩增与纯化 | 第22页 |
4. PCR产物的克隆 | 第22页 |
5. 阳性定量标准曲线的建立 | 第22页 |
6. 样品的检测 | 第22-23页 |
结果 | 第23-41页 |
一、 恶性疟原虫荧光定量PCR方法的建立 | 第23-35页 |
1. PCR扩增产物的鉴定 | 第23页 |
2. 重组质粒的筛选 | 第23-27页 |
3. 荧光定量PCR反应条件的优化及标准曲线的建立 | 第27-30页 |
Mg~(2+)浓度的优化 | 第27-28页 |
退火温度的优化 | 第28-30页 |
4. 样品的检测及荧光定量PCR检测方法的评价 | 第30-35页 |
4.1 模板提取方法的选择 | 第30页 |
4.2 样品的检测 | 第30-35页 |
4.2.1 镜检结果 | 第30-31页 |
4.2.2 常规PCR检测结果 | 第31页 |
4.2.3 FQ-PCR检测结果及评价 | 第31-35页 |
二、 间日疟原虫荧光定量PCR检测方法的建立 | 第35-41页 |
1. 常规PCR扩增产物的鉴定 | 第35页 |
2. 重组质粒的筛选 | 第35-37页 |
3. 定量标准曲线的建立 | 第37-38页 |
4. 样品检测结果及评价 | 第38-41页 |
讨论 | 第41-49页 |
参考文献 | 第49-48页 |
结论 | 第48-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
综述 | 第54-58页 |