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疟疾荧光定量PCR诊断技术的研究

中英对照第1-6页
中文摘要第6-9页
英文摘要(ABSTRACT)第9-12页
前言第12-15页
材料和方法第15-23页
 一、 材料第15-16页
 二、 实验方法第16-23页
  (一) 恶性疟原虫荧光定量PCR检测方法的建立第16-21页
   1. 引物及探针的设计及合成第16-17页
   2. 靶基因的扩增与纯化第17-18页
    2.1 模板DNA的制备第17页
    2.2 常规PCR扩增第17页
    2.3 检测第17-18页
    2.4 靶基因的纯化第18页
   3. PCR扩增产物的克隆第18-19页
    3.1 重组质粒的构建第18-19页
    3.2 重组质粒的筛选第19页
   4. 荧光定量PCR反应条件的优化和标准曲线的建立第19-20页
    4.1 阳性定量标准模板的建立第19页
    4.2 荧光定量PCR反应条件的优化及标准曲线的建立第19-20页
     Mg~(2+)浓度的优化第20页
     退火温度的优化第20页
     荧光定量标准曲线的建立第20页
     模板提取方法的选择第20页
   5. 样品的检测结果第20-21页
    5.1 与镜检、常规PCR检测法比较第20-21页
    5.2 荧光定量PCR方法的评价第21页
     敏感度第21页
     特异度第21页
     仪器的稳定性第21页
     操作的稳定性第21页
     统计学处理第21页
  (二) 间日疟原虫荧光定量PCR检测方法的建立第21-23页
   1. 血样采集及模板DNA的制备第22页
   2. 引物及探针的设计与合成第22页
   3. 靶基因的扩增与纯化第22页
   4. PCR产物的克隆第22页
   5. 阳性定量标准曲线的建立第22页
   6. 样品的检测第22-23页
结果第23-41页
 一、 恶性疟原虫荧光定量PCR方法的建立第23-35页
  1. PCR扩增产物的鉴定第23页
  2. 重组质粒的筛选第23-27页
  3. 荧光定量PCR反应条件的优化及标准曲线的建立第27-30页
   Mg~(2+)浓度的优化第27-28页
   退火温度的优化第28-30页
  4. 样品的检测及荧光定量PCR检测方法的评价第30-35页
   4.1 模板提取方法的选择第30页
   4.2 样品的检测第30-35页
    4.2.1 镜检结果第30-31页
    4.2.2 常规PCR检测结果第31页
    4.2.3 FQ-PCR检测结果及评价第31-35页
 二、 间日疟原虫荧光定量PCR检测方法的建立第35-41页
  1. 常规PCR扩增产物的鉴定第35页
  2. 重组质粒的筛选第35-37页
  3. 定量标准曲线的建立第37-38页
  4. 样品检测结果及评价第38-41页
讨论第41-49页
参考文献第49-48页
结论第48-53页
致谢第53-54页
综述第54-58页

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