摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
1 绪论 | 第8-26页 |
·国内外水环境中病原体污染现状及危害 | 第8-10页 |
·环境水体中主要肠道病原细菌 | 第10-17页 |
·志贺氏菌 | 第10-11页 |
·沙门氏菌 | 第11-13页 |
·致病性大肠埃希氏菌 | 第13-15页 |
·霍乱弧菌 | 第15-17页 |
·PCR技术及其研究进展 | 第17-19页 |
·定量PCR技术及其发展现状 | 第19-22页 |
·荧光定量PCR技术原理 | 第20页 |
·荧光定量PCR分类 | 第20-22页 |
·荧光定量PCR特点 | 第22页 |
·PCR技术在环境微生物研究领域中的应用 | 第22-24页 |
·课题研究的目的和意义 | 第24-25页 |
·课题来源 | 第25-26页 |
2 材料和方法 | 第26-36页 |
·实验材料 | 第26-27页 |
·实验菌株 | 第26页 |
·仪器设备 | 第26页 |
·分子生物学试剂及配制方法 | 第26-27页 |
·水样采集 | 第27-28页 |
·采样点 | 第27-28页 |
·采样时间及方法 | 第28页 |
·实验研究方法 | 第28-36页 |
·病原细菌特异性引物设计 | 第28-30页 |
·病原细菌总DNA提取 | 第30页 |
·PCR扩增方法 | 第30-32页 |
·线性标准曲线的绘制 | 第32-34页 |
·定量PCR检测方法 | 第34-35页 |
·环境水体中病原细菌的定量PCR检测 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-58页 |
·PCR扩增方法的建立 | 第36-43页 |
·病原细菌引物设计特异性分析 | 第36-39页 |
·病原细菌总DNA提取结果 | 第39页 |
·病原细菌常规PCR方法的建立 | 第39-43页 |
·定量PCR检测方法的建立 | 第43-48页 |
·大肠埃希氏菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第43-45页 |
·沙门氏菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第45-46页 |
·志贺氏菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第46-48页 |
·霍乱弧菌荧光定量PCR检测方法的建立 | 第48页 |
·环境水体中病原细菌定量PCR检测结果 | 第48-54页 |
·黑河水源水病原细菌定量PCR检测结果 | 第48-49页 |
·景观水体(北湖)病原细菌定量PCR检测结果 | 第49-50页 |
·景观水体(兴庆湖)病原细菌定量PCR检测结果 | 第50页 |
·纳污水体(浐河)病原细菌定量PCR检测结果 | 第50-51页 |
·污水厂二级出水病原细菌定量PCR检测结果 | 第51-52页 |
·五种环境水体中各病原细菌检测结果分析 | 第52-54页 |
·环境水体中病原细菌常规PCR与定量PCR检测结果分析比较 | 第54-58页 |
·常规PCR与定量PCR检测结果特异性分析 | 第54-57页 |
·常规PCR与定量PCR检测灵敏度分析 | 第57-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
·定量PCR技术存在问题 | 第58-59页 |
·影响定量PCR反应的因素 | 第59页 |
·定量PCR技术在环境水体病原细菌检测中应用的可行性 | 第59-61页 |
5 结论 | 第61-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-66页 |