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定量PCR技术在环境水体病原细菌检测中的应用研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
1 绪论第8-26页
   ·国内外水环境中病原体污染现状及危害第8-10页
   ·环境水体中主要肠道病原细菌第10-17页
     ·志贺氏菌第10-11页
     ·沙门氏菌第11-13页
     ·致病性大肠埃希氏菌第13-15页
     ·霍乱弧菌第15-17页
   ·PCR技术及其研究进展第17-19页
   ·定量PCR技术及其发展现状第19-22页
     ·荧光定量PCR技术原理第20页
     ·荧光定量PCR分类第20-22页
     ·荧光定量PCR特点第22页
   ·PCR技术在环境微生物研究领域中的应用第22-24页
   ·课题研究的目的和意义第24-25页
   ·课题来源第25-26页
2 材料和方法第26-36页
   ·实验材料第26-27页
     ·实验菌株第26页
     ·仪器设备第26页
     ·分子生物学试剂及配制方法第26-27页
   ·水样采集第27-28页
     ·采样点第27-28页
     ·采样时间及方法第28页
   ·实验研究方法第28-36页
     ·病原细菌特异性引物设计第28-30页
     ·病原细菌总DNA提取第30页
     ·PCR扩增方法第30-32页
     ·线性标准曲线的绘制第32-34页
     ·定量PCR检测方法第34-35页
     ·环境水体中病原细菌的定量PCR检测第35-36页
3 结果与分析第36-58页
   ·PCR扩增方法的建立第36-43页
     ·病原细菌引物设计特异性分析第36-39页
     ·病原细菌总DNA提取结果第39页
     ·病原细菌常规PCR方法的建立第39-43页
   ·定量PCR检测方法的建立第43-48页
     ·大肠埃希氏菌荧光定量PCR检测方法的建立第43-45页
     ·沙门氏菌荧光定量PCR检测方法的建立第45-46页
     ·志贺氏菌荧光定量PCR检测方法的建立第46-48页
     ·霍乱弧菌荧光定量PCR检测方法的建立第48页
   ·环境水体中病原细菌定量PCR检测结果第48-54页
     ·黑河水源水病原细菌定量PCR检测结果第48-49页
     ·景观水体(北湖)病原细菌定量PCR检测结果第49-50页
     ·景观水体(兴庆湖)病原细菌定量PCR检测结果第50页
     ·纳污水体(浐河)病原细菌定量PCR检测结果第50-51页
     ·污水厂二级出水病原细菌定量PCR检测结果第51-52页
     ·五种环境水体中各病原细菌检测结果分析第52-54页
   ·环境水体中病原细菌常规PCR与定量PCR检测结果分析比较第54-58页
     ·常规PCR与定量PCR检测结果特异性分析第54-57页
     ·常规PCR与定量PCR检测灵敏度分析第57-58页
4 讨论第58-61页
   ·定量PCR技术存在问题第58-59页
   ·影响定量PCR反应的因素第59页
   ·定量PCR技术在环境水体病原细菌检测中应用的可行性第59-61页
5 结论第61-63页
致谢第63-64页
参考文献第64-66页

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