| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 英文缩略词 | 第13-15页 |
| 1 前言 | 第15-31页 |
| ·硝基酚类物质研究进展 | 第15-19页 |
| ·硝基酚类物质概述 | 第15-16页 |
| ·具有降解硝基酚能力的微生物 | 第16-19页 |
| ·对硝基苯酚降解研究现状 | 第19-25页 |
| ·对硝基苯酚概述 | 第19-20页 |
| ·对硝基苯酚降解菌及代谢方式 | 第20-21页 |
| ·对硝基苯酚生物降解途径 | 第21-22页 |
| ·对硝基苯酚降解基因的研究 | 第22-23页 |
| ·对硝基苯酚降解酶的研究 | 第23-24页 |
| ·存在的问题 | 第24-25页 |
| ·关于菌株对污染物降解的残留及其产物的遗传毒性分 析 | 第25-29页 |
| ·Umu 概述 | 第25-26页 |
| ·Umu 的概念 | 第25页 |
| ·SOS 反应 | 第25-26页 |
| ·SOS/umu 实验（经典umu 实验） | 第26-29页 |
| ·实验原理 | 第26-27页 |
| ·常用实验菌株 | 第27-28页 |
| ·umu 实验方法在环境科学中的应用 | 第28-29页 |
| ·本研究的内容、目的及意义 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-50页 |
| ·实验材料 | 第31-34页 |
| ·药品试剂 | 第31页 |
| ·仪器设备 | 第31页 |
| ·培养基 | 第31-32页 |
| ·试剂配制 | 第32-34页 |
| ·实验方法 | 第34-50页 |
| ·降解菌的富集驯化与筛选分离 | 第34页 |
| ·降解菌的富集驯化 | 第34页 |
| ·降解菌的筛选分离 | 第34页 |
| ·降解菌的形态鉴定及系统发育分析 | 第34-38页 |
| ·形态及生理生化鉴定 | 第34-35页 |
| ·分子生物学鉴定 | 第35-37页 |
| ·系统发育分析 | 第37-38页 |
| ·降解菌的生长特性与降解性能 | 第38-39页 |
| ·降解菌的生长曲线的测定 | 第38页 |
| ·紫外分光光度法测定菌体对 PNP 的降解 | 第38页 |
| ·色谱法测定菌体对 PNP 的降解 | 第38页 |
| ·接种量、外加碳源、温度、pH 及 PNP 浓度对菌株降解能力和菌体 生长的影响 | 第38-39页 |
| ·降解中间产物的检测 | 第39页 |
| ·菌体培养液上清对 PNP 的降解 | 第39-40页 |
| ·降解过程中亚硝酸盐的检测 | 第40页 |
| ·遗传毒性分析 | 第40-41页 |
| ·降解酶基因的定位与克隆 | 第41-46页 |
| ·质粒的提取 | 第41-43页 |
| ·质粒的消除 | 第43-44页 |
| ·PNP 降解酶基因的克隆 | 第44页 |
| ·表达载体 pET-npdA 的构建 | 第44-46页 |
| ·PNP 降解酶特性研究 | 第46-50页 |
| ·降解酶粗酶的提取 | 第47页 |
| ·菌体全细胞蛋白质SDS-PAGE 和Native-PAGE 分析 | 第47-48页 |
| ·胶板的制备方法 | 第48页 |
| ·样品处理 | 第48-49页 |
| ·凝胶的染色与脱色 | 第49页 |
| ·降解酶对PNP 的降解特性 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-75页 |
| ·PNP 降解菌的分离鉴定 | 第50-54页 |
| ·菌株的形态学观察 | 第50页 |
| ·菌株的生理生化特性 | 第50-52页 |
| ·菌株的16SrDNA 系统发育分析 | 第52-54页 |
| ·菌株的生长特性及降解性能分析 | 第54-64页 |
| ·菌株对 PNP 的降解性能测定 | 第54-58页 |
| ·分光光度法测定菌株对 PNP 的降解 | 第54-55页 |
| ·高效液相色谱法测定菌株的降解性能 | 第55-58页 |
| ·菌株对 PNP 耐受浓度的测定 | 第58页 |
| ·初始 PNP 浓度、接种量、外加碳源、培养温度和 pH 对 PNP降解的影响 | 第58-62页 |
| ·经 PNP 诱导培养物的上清液对 PNP 的降解 | 第62页 |
| ·紫外分光光度计法检测亚硝酸盐的产生 | 第62-63页 |
| ·对 PNP 降解的遗传毒性分析 | 第63-64页 |
| ·降解菌底物谱的测定 | 第64-66页 |
| ·对硝基苯酚降解基因的定位与克隆 | 第66-70页 |
| ·对硝基苯酚降解基因的定位 | 第66页 |
| ·对硝基苯酚降解基因的克隆 | 第66-70页 |
| ·工程菌的构建及工程菌对 PNP 的降解性能测定 | 第70-73页 |
| ·工程菌的构建 | 第70-72页 |
| ·工程菌对 PNP 的降解性能测定 | 第72-73页 |
| ·对硝基苯酚降解酶特性研究 | 第73-75页 |
| ·降解酶表达特性 | 第73-74页 |
| ·粗酶液的降解性能 | 第74-75页 |
| 4 讨论 | 第75-79页 |
| ·PNP 降解微生物 | 第75-76页 |
| ·对硝基苯酚的微生物降解途径 | 第76页 |
| ·对硝基苯酚降解酶基因的克隆 | 第76-77页 |
| ·对硝基苯酚降解酶的分离纯化 | 第77-78页 |
| ·下一步工作设想 | 第78-79页 |
| 5 结论 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 攻读学位期间完成论文 | 第89页 |
