摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
1 前言 | 第9-17页 |
·心肌梗死的背景 | 第9页 |
·心肌梗塞与干细胞的疗法 | 第9-14页 |
·胚胎干细胞 | 第10页 |
·成体干细胞 | 第10页 |
·造血干细胞 | 第10-11页 |
·内皮祖细胞 | 第11-12页 |
·多能成体祖细胞 | 第12页 |
·骨骼肌成肌细胞 | 第12页 |
·心肌祖细胞 | 第12-13页 |
·间充质细胞 | 第13-14页 |
·骨髓干细胞的归巢及SDF-1/CXCR4轴在归巢中的作用 | 第14-16页 |
·干细胞的归巢 | 第14页 |
·SDF-1/CXCR4轴在骨髓干细胞迁移和归巢的作用 | 第14-15页 |
·SDF-1/CXCR4轴在心肌梗死治疗中的应用 | 第15-16页 |
·本论文研究的主要内容、目的及意义 | 第16-17页 |
·本论文研究的目的及意义 | 第16页 |
·本论文研究的主要内容 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-34页 |
·实验材料 | 第17-20页 |
·实验动物 | 第17页 |
·实验仪器 | 第17页 |
·主要试剂 | 第17-18页 |
·主要试剂的配制 | 第18-20页 |
·实验方法 | 第20-34页 |
·MSCs的培养与鉴定 | 第20-22页 |
·CXCR4基因逆转录病毒表达载体的构建 | 第22-28页 |
·CXCR4体外转染MSCs及转染后MSCs的表达检测 | 第28-33页 |
·CXCR4/SDF-1轴的体外靶向性实验 | 第33-34页 |
3 结果与讨论 | 第34-62页 |
·MSCs的鉴定 | 第34-37页 |
·形态特征 | 第34-35页 |
·MSCs的免疫染色鉴定结果 | 第35-36页 |
·MSCs的生长动力学检测 | 第36页 |
·MSCs的冻存与复苏 | 第36页 |
·本节讨论 | 第36-37页 |
·CXCR4逆转录病毒质粒的构建 | 第37-48页 |
·逆转录病毒一的目的基因片断CXCR4的酶切及回收 | 第37-38页 |
·载体质粒pMSCV-IRES-GFP的补平反应及回收 | 第38-39页 |
·pMSCV-GFP与CXCR4的连接及双酶切鉴定 | 第39-40页 |
·重组质粒pMSCV-CXCR4-IRES-GFP的PCR鉴定 | 第40页 |
·重组质粒pMSCV-CXCR4-IRES-GFP的CXCR4基因片段测序 | 第40页 |
·逆转录病毒二的目的基因片断CXCR4的酶切及回收 | 第40-41页 |
·中间载体质粒pBlue-script的补平反应及回收 | 第41-42页 |
·pBlue-script与和hCXCR4的连接及双酶切鉴定 | 第42页 |
·载体质粒pMSCV-neo~r的双酶切反应及回收 | 第42-43页 |
·pMSCV-neo~r与CXCR4的连接及双酶切鉴定 | 第43-44页 |
·重组质粒pMSCV-neo~r-CXCR4的PCR鉴定 | 第44-45页 |
·重组质粒pMSCV-neo~r-CXCR4的CXCR4基因片段的测序 | 第45页 |
·本节讨论 | 第45-48页 |
·两种CXCR4基因质粒体外修饰MSCs及转导效率的比较 | 第48-56页 |
·质粒的纯度及浓度检测 | 第48页 |
·病毒的制备 | 第48-49页 |
·逆转录病毒感染大鼠的MSCs并进行转导效率的比较 | 第49-53页 |
·RT-PCR检测CXCR4基因修饰的MSCs表达 | 第53页 |
·基因修饰的MSCs生长动力学检测 | 第53-54页 |
·本节讨论 | 第54-56页 |
·SDF-1对CXCR4的体外靶向作用 | 第56-62页 |
·transwell细胞体外穿越试验 | 第56-57页 |
·CXCR4阻断型抗体AMD3100对MSCs迁移的影响 | 第57-58页 |
·无血清条件下SDF-1/CXCR4轴对MSCs凋亡的影响 | 第58-60页 |
·本节讨论 | 第60-62页 |
4 结论 | 第62-63页 |
·结论 | 第62页 |
·论文创新点 | 第62-63页 |
5 展望 | 第63-64页 |
6 参考文献 | 第64-71页 |
7 攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第71-72页 |
8 致谢 | 第72页 |