致谢 | 第1-7页 |
摘要 | 第7-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
1 引言 | 第10-18页 |
·微卫星综述 | 第10-14页 |
·微卫星的产生 | 第10-11页 |
·微卫星的分布 | 第11页 |
·微卫星的应用 | 第11-12页 |
·微卫星的获取 | 第12-13页 |
·微卫星的不足 | 第13-14页 |
·亲子鉴定 | 第14-17页 |
·亲子鉴定的遗传标记 | 第14-15页 |
·亲子鉴定的主要方法 | 第15页 |
·亲子鉴定中的关键问题 | 第15-17页 |
·豚鹿 | 第17页 |
·本论文的研究目的和意义 | 第17-18页 |
2 豚鹿多态性微卫星位点分离 | 第18-36页 |
·实验材料 | 第18-20页 |
·样品来源 | 第18-19页 |
·主要仪器设备 | 第19页 |
·主要试剂耗材 | 第19-20页 |
·方法 | 第20-29页 |
·基因组DNA提取 | 第20-21页 |
·基因组DNA酶切 | 第21页 |
·适宜酶切片段回收 | 第21-22页 |
·回收片段的接头连接 | 第22页 |
·连接产物PCR扩增 | 第22-23页 |
·PCR产物清洁回收 | 第23页 |
·回收产物与微卫星探针杂交 | 第23页 |
·磁珠富集微卫星片段 | 第23-24页 |
·PCR增大洗脱液核酸浓度及产物清洁回收 | 第24页 |
·载体连接 | 第24-25页 |
·重组质粒转化 | 第25页 |
·阳性克隆筛选 | 第25-26页 |
·微卫星引物设计及特异性检测 | 第26页 |
·多态性微卫星筛选 | 第26-27页 |
·dPAGE结果银染处理 | 第27页 |
·基因分型 | 第27-28页 |
·软件数据处理 | 第28-29页 |
·结果和讨论 | 第29-36页 |
3 成都动物园圈养豚鹿亲子关系鉴定 | 第36-41页 |
·实验材料 | 第36-37页 |
·样品来源 | 第36页 |
·主要设备仪器 | 第36页 |
·主要试剂耗材 | 第36-37页 |
·实验方法 | 第37-39页 |
·基因组DNA提取 | 第37页 |
·微卫星扩增及基因分型获取 | 第37-38页 |
·亲子关系鉴定 | 第38页 |
·谱系建立 | 第38-39页 |
·结果和讨论 | 第39-41页 |
·亲子关系 | 第39页 |
·谱系构建 | 第39-40页 |
·讨论 | 第40-41页 |
参考文献 | 第41-47页 |
附录Ⅰ: 26个豚鹿9个多态性微卫星位点信息列表 | 第47-48页 |
附录Ⅱ: 成都动物园27只豚鹿7个微卫星位点信息列表 | 第48-49页 |
附录Ⅲ: COI编码部分中国濒危哺乳动物 | 第49-72页 |
Ⅲ.1 摘要 | 第49-50页 |
Ⅲ.2 Abstract | 第50-51页 |
Ⅲ.3 引言 | 第51-54页 |
Ⅲ.3.1 生命条码 | 第51页 |
Ⅲ.3.2 COI | 第51-52页 |
Ⅲ.3.3 COI作为生命条码的应用 | 第52-53页 |
Ⅲ.3.4 COI的局限性 | 第53页 |
Ⅲ.3.5 生命条码展望 | 第53-54页 |
Ⅲ.4 本项研究的目的和意义 | 第54-55页 |
Ⅲ.5 研究材料 | 第55-57页 |
Ⅲ.5.1 样品来源 | 第55-56页 |
Ⅲ.5.2 主要仪器设备 | 第56页 |
Ⅲ.5.3 主要试剂耗材 | 第56-57页 |
Ⅲ.6 研究方法 | 第57-60页 |
Ⅲ.6.1 基因组DNA提取 | 第57页 |
Ⅲ.6.2 COI基因PCR扩增 | 第57-58页 |
Ⅲ.6.3 序列获取 | 第58页 |
Ⅲ.6.4 数据处理 | 第58-60页 |
Ⅲ.7 结果 | 第60-62页 |
Ⅲ.7.1 序列数量 | 第60页 |
Ⅲ.7.2 种内差异度 | 第60页 |
Ⅲ.7.3 种间差异度 | 第60页 |
Ⅲ.7.4 655bp与404bp COI效果比对 | 第60-62页 |
Ⅲ.8 讨论 | 第62-67页 |
Ⅲ.8.1 线粒体假基因(Numts) | 第62-64页 |
Ⅲ.8.2 马鹿遗传分析 | 第64-65页 |
Ⅲ.8.3 物种鉴定 | 第65-67页 |
Ⅲ.9 结论 | 第67-68页 |
Ⅲ.10 参考文献 | 第68-72页 |
附录Ⅳ: BOLD来源COI序列信息 | 第72-74页 |
作者简历 | 第74页 |