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鱼类异尖线虫检测方法的研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-9页
前言第9-10页
第一部分 文献综述 异尖科线虫相关研究第10-24页
 摘要第11页
 1 异尖线虫病研究动态第11-12页
   ·异尖线虫病的流行第11-12页
   ·异尖线虫病的危害第12页
 2 异尖线虫检测研究进展第12-16页
   ·常规检测方法第12-13页
   ·清学方法第13-14页
   ·分子生物学方法第14-16页
 3 简单异尖线虫抗原基因研究第16-18页
   ·寄生虫ES抗原研究进展第16-17页
   ·简单异尖线虫ES抗原研究第17-18页
 4 结语第18页
 参考文献第18-24页
第二部分 研究内容第24-80页
 第一章 东海海鱼异尖线虫幼虫感染及生态分布的初步研究第25-30页
  摘要第25页
  1 材料和方法第25-26页
   ·所检鱼类来源第25页
   ·虫体分离和判定第25-26页
   ·感染率及感染强度确定第26页
  2 结果第26-28页
   ·东海海域捕获海鱼感染情况第26-27页
   ·东海海域网箱养殖海鱼感染情况第27页
   ·不同体重海鱼异尖线虫幼虫感染情况第27-28页
  3 讨论第28-29页
  参考文献第29-30页
 第二章 简单异尖线虫PCR检测方法的建立第30-46页
  摘要第30页
  1 材料和方法第30-36页
   ·主要材料和试剂第30-31页
   ·试验方法第31-36页
  2 结果第36-43页
   ·序列分析及引物设计第36-40页
   ·异尖科线虫鉴定结果第40页
   ·检测体系扩增及鉴定结果第40-41页
   ·序列测定与结果分析第41-42页
   ·特异性试验结果第42页
   ·敏感性试验结果第42-43页
  3 讨论第43-45页
  参考文献第45-46页
 第三章 异尖科三种线虫多重PCR检测方法的建立第46-64页
  摘要第46-47页
  1 材料和方法第47-53页
   ·主要材料和试剂第47页
   ·试验方法第47-53页
  2 结果第53-60页
   ·单重PCR结果第53-54页
   ·阳性克隆的筛选及鉴定第54-55页
   ·序列分析第55-57页
   ·多重PCR结果第57-58页
   ·特异性试验结果第58-59页
   ·敏感性试验结果第59-60页
  3 讨论第60-63页
   ·引物选择第60-61页
   ·引物设计第61页
   ·反应条件的优化第61-62页
   ·问题及展望第62-63页
  参考文献第63-64页
 第四章 简单异尖线虫ANIS4抗原基因的克隆和表达第64-80页
  摘要第64页
  1 材料和方法第64-72页
   ·材料第64-65页
   ·方法第65-72页
  2 结果第72-78页
   ·RT-PCR扩增结果第72页
   ·阳性克隆的筛选第72-73页
   ·p18-T-Ani-s4测序结果第73-74页
   ·原核表达载体的构建及鉴定第74-75页
   ·表达载体连接序列测定及分析第75-77页
   ·SDS-PAGE及Western-blot第77-78页
  3 讨论第78页
  参考文献第78-80页
结论第80-81页
附录A 溶液配制第81-83页
附录B 英文缩写注释第83-84页
攻读硕士期间发表或录用的学术论文第84-85页
致谢第85页

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