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鸡传染性支气管炎病毒(793/B)M基因与截短M基因的克隆测序、原核表达及鉴定

中文摘要第1-10页
英文摘要第10-12页
第一部分 文献综述 鸡传染性支气管炎病毒793/B 的研究进展第12-37页
 1. IBV 分类第13页
 2. IBV 基因组第13-14页
 3. IBV 病毒粒子结构第14-15页
 4. IBV 主要结构蛋白及功能第15-20页
   ·纤突蛋白(S 蛋白或E1)第15-17页
   ·包膜蛋白(基质蛋白或M 蛋白)第17-19页
   ·核衣壳蛋白(N 蛋白)第19页
   ·其它蛋白第19-20页
 5. IBV 复制第20-22页
 6. IBV 血清型第22-27页
   ·国外对 IBV 的分型研究第22-23页
   ·国内对 IBV 分型的研究第23-24页
   ·血清抗体分析第24-27页
 7. IBV RNA 重组与基因工程苗第27-29页
 8. IBV 793/B 特性第29-36页
   ·分子生物学特性第29-32页
     ·793/B 血清亚群第29-30页
     ·核苷酸序列第30-31页
     ·氨基酸序列第31-32页
   ·793/B 致病性第32-33页
   ·流行病学第33页
   ·诊断第33-35页
     ·病毒的分离第33页
     ·血清学鉴定第33-34页
     ·分子生物学诊断方法第34-35页
   ·防制及存在的问题第35-36页
 9. 研究的意义第36-37页
第二部分 研究内容第37-64页
 第一章 鸡传染性支气管炎病毒变异株(793/B)M 基因的克隆与序列分析第37-50页
  1 材料与方法第38-44页
   ·病毒株和菌株第38页
   ·器材和试剂第38页
   ·SPF 鸡胚第38页
   ·引物第38-39页
   ·病毒的增殖与浓缩第39页
   ·病毒基因组 RNA 的提取第39页
   ·RT-PCR第39-40页
     ·cDNA 合成第39-40页
     ·PCR 扩增第40页
   ·PCR 产物的克隆和序列测定第40-44页
     ·PCR 产物的纯化回收第40-41页
     ·PCR 产物与pMD 18-T Vector 的连接反应第41页
     ·TG1 感受态细胞的制备第41-42页
     ·连接产物转化感受态细胞第42页
     ·重组质粒的鉴定第42-44页
   ·序列分析第44页
  2 结果第44-48页
   ·RT-PCR 扩增结果第44页
   ·重组质粒的鉴定第44页
   ·测序结果及核苷酸、氨基酸序列比较第44-46页
   ·同源性分析第46-48页
  3 讨论第48-50页
 第二章 IBV(793/B)M基因与2种截短M基因原核表达及鉴定第50-64页
  1 材料和方法第51-57页
   ·质粒及菌种第51-52页
   ·主要试剂和器材第52页
   ·实验动物第52页
   ·鼠抗IBV(793/B)血清的制备第52页
   ·引物的设计与合成第52-53页
   ·pGEX6p-M、pGEX6p-M1 和 pGEX6p-M2 原核表达质粒的构建第53-55页
     ·M 基因及M1、M2 截短基因的扩增第53页
     ·pGEX6p-M、pGEX6p-M1 和 pGEX6p-M2 原核表达质粒的构建第53-54页
     ·重组质粒的鉴定第54-55页
   ·GST-M1、GST-M2 和 GST-M 重组蛋白的诱导表达第55-57页
     ·重组蛋白的诱导表达第55页
     ·SDS-PAGE 样品的制备第55页
     ·聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第55-57页
   ·Western blot 鉴定第57页
  2 结果第57-62页
   ·pGEX6p-M、pGEX6p-M1 和 pGEX6p-M2 原核表达质粒的构建及鉴定第57-59页
   ·GST-M、GST-M1 和 GST-M2 重组蛋白的诱导第59-61页
   ·Western blot 鉴定第61-62页
  3 讨论第62-64页
结论第64-65页
参考文献第65-77页
附录第77-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表论文情况第80页

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