SCID-Hu模型建立及循环血单核细胞对假体周围组织形成的影响
| 摘要 | 第1-20页 |
| ABSTRACT | 第20-27页 |
| 符号说明 | 第27-29页 |
| 第一部分 | 第29-59页 |
| 前言 | 第30-33页 |
| 破骨细胞功能调节与骨溶解 | 第30-31页 |
| 成骨细胞功能对骨溶解的影响 | 第31-32页 |
| 颗粒诱导的骨溶解实验模型 | 第32-33页 |
| 材料与方法 | 第33-48页 |
| 1.材料 | 第33-35页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·主要试剂 | 第33-34页 |
| ·主要仪器 | 第34-35页 |
| 2.方法 | 第35-48页 |
| ·小鼠-人假体周围组织嵌合体的制备 | 第36-38页 |
| ·人外周血单核细胞的提取 | 第36页 |
| ·人外周血单核细胞PKH2绿色荧光染色 | 第36-37页 |
| ·小鼠-人假体周围组织嵌合体制备 | 第37页 |
| ·标本取材 | 第37-38页 |
| ·组织学检查 | 第38-39页 |
| ·冰冻切片制备与检查 | 第38页 |
| ·石蜡切片的制备 | 第38-39页 |
| ·苏木精-伊红染色 | 第39页 |
| ·免疫组织化学检查 | 第39-41页 |
| ·实验原理及试剂配制 | 第39-40页 |
| ·实验步骤 | 第40-41页 |
| ·结果分析 | 第41页 |
| ·实时定量PCR分析基因表达 | 第41-44页 |
| ·组织细胞总RNA的提取 | 第41-42页 |
| ·cDNA合成 | 第42-43页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第43-44页 |
| ·酶联免疫吸附实验ELISA | 第44-46页 |
| ·实验原理 | 第44-45页 |
| ·试剂盒组成 | 第45页 |
| ·检测前准备工作 | 第45页 |
| ·洗涤方法 | 第45页 |
| ·操作步骤 | 第45-46页 |
| ·计算 | 第46页 |
| ·MicroCT扫描及骨密度分析 | 第46-47页 |
| ·数据统计分析 | 第47-48页 |
| 结果 | 第48-54页 |
| 1.实验模型建立情况 | 第48页 |
| 2.组织学结果 | 第48-51页 |
| ·PKH2荧光标记PBMC | 第48页 |
| ·PBMC在SCID-Hu内的分布 | 第48页 |
| ·HE染色及细胞计数 | 第48-50页 |
| ·免疫组织化学结果 | 第50-51页 |
| 3.RT-PCR结果 | 第51-52页 |
| 4.ELISA结果 | 第52-53页 |
| 5.MicroCT结果 | 第53-54页 |
| 讨论 | 第54-58页 |
| SCID-Hu嵌合体模型的建立 | 第54-55页 |
| PBMC特异性浸润到假体周围组织及其机理 | 第55-56页 |
| 破骨细胞的分化和功能调节 | 第56页 |
| ASGM1对宿主免疫的影响 | 第56-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 第二部分 | 第59-80页 |
| 前言 | 第60-62页 |
| 材料与方法 | 第62-70页 |
| 1.材料 | 第62-64页 |
| ·实验动物 | 第62页 |
| ·主要试剂 | 第62页 |
| ·主要仪器 | 第62-64页 |
| 2.方法 | 第64-70页 |
| ·小鼠-人组织嵌合体的制备 | 第65-66页 |
| ·人外周血单核细胞的提取 | 第65页 |
| ·人外周血单核细胞PKH2绿色荧光染色 | 第65页 |
| ·SCID小鼠-人假体周围组织嵌合体制备 | 第65-66页 |
| ·标本取材 | 第66页 |
| ·组织学检查 | 第66页 |
| ·冰冻切片制备与检查 | 第66页 |
| ·石蜡切片的制备 | 第66页 |
| ·苏木精-伊红染色 | 第66页 |
| ·免疫组织化学检查 | 第66-67页 |
| ·试剂配制 | 第66页 |
| ·实验步骤 | 第66页 |
| ·结果分析 | 第66-67页 |
| ·实时定量PCR分析基因表达 | 第67-68页 |
| ·组织细胞总RNA的提取 | 第67页 |
| ·cDNA合成 | 第67页 |
| ·实时定量PCR检测 | 第67-68页 |
| ·酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第68-69页 |
| ·试剂盒组成 | 第68页 |
| ·洗涤方法 | 第68页 |
| ·操作步骤 | 第68-69页 |
| ·计算 | 第69页 |
| ·MicroCT扫描及骨密度分析 | 第69页 |
| ·数据统计分析 | 第69-70页 |
| 结果 | 第70-75页 |
| 1.冰冻切片及HE染色检查结果 | 第70-71页 |
| 2.免疫组织化学结果 | 第71-72页 |
| 3.RT-PCR结果 | 第72-73页 |
| 4.ELISA结果 | 第73-74页 |
| 5.MicroCT结果 | 第74-75页 |
| 讨论 | 第75-79页 |
| 颗粒刺激与PBMC组织浸润 | 第75-76页 |
| 颗粒刺激与细胞因子变化 | 第76-77页 |
| 颗粒刺激反应与假体选择 | 第77-79页 |
| 结论 | 第79-80页 |
| 附图 | 第80-92页 |
| 参考文献 | 第92-96页 |
| 致谢 | 第96-98页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第98-99页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第99-100页 |
| 英语论文一 | 第100-117页 |
| 英语论文二 | 第117-139页 |
