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PTD-hFOXP3融合蛋白的表达、纯化、鉴定及生物学功能的初步研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
第一章 绪论第12-22页
   ·Treg与Foxp3第12-20页
     ·调节性T细胞第12-13页
     ·Foxp3与FOX家族第13-15页
     ·Foxp3与Treg细胞表面标记的表达第15-18页
     ·CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞与临床第18-19页
     ·FOXP3发挥抑制功能的机制第19-20页
   ·PTD简介第20-22页
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义第22-24页
   ·研究目的、方法第22页
   ·实验方案的设计第22页
   ·本研究的意义第22-24页
第三章 实验材料第24-28页
   ·细胞系第24页
   ·实验菌株和质粒第24页
   ·主要试剂第24页
   ·其他试剂及材料第24页
   ·实验动物第24页
   ·主要仪器第24-25页
   ·主要溶液第25-28页
第四章 实验方法第28-38页
   ·pET28a-PTD-eGFP-hFOXP3及pET28a-PTD-hFOXP3重组载体的构建第28-33页
     ·pET28a-PTD-eGFP-hFOXP3重组载体的构建第28-32页
     ·pET28a-PTD-hFOXP3重组载体的构建第32-33页
   ·两种融合蛋白的表达、纯化第33-35页
     ·PTD-eGFP-FOXP3和PTD-FOXP3融合蛋白的表达第33-34页
     ·融合蛋白的SDS-PAGE电泳鉴定第34页
     ·两种融合蛋白的溶解性分析第34页
     ·融合蛋白纯化第34-35页
     ·融合蛋白鉴定(Western blot)第35页
     ·蛋白去盐第35页
   ·融合蛋白的功能试验(与许逊、蔺昕合作)第35-38页
     ·融合蛋白穿膜能力分析第35-36页
     ·细胞增殖实验第36-38页
第五章 实验结果与讨论第38-54页
   ·pET28a-PTD-eGFP-hFOXP3和pET28a-PTD-hFOXP3重组质粒的鉴定第38-46页
     ·pET28a-PTD-eGFP-hFOXP3重组质粒的鉴定第38-43页
     ·pET28a-PTD-hFOXP3重组质粒的鉴定第43-44页
     ·PTD-eGFP-FOXP3和PTD-FOXP3融合蛋白可溶性分析第44-45页
     ·PTD-eGFP-hFOXP3和PTD-hFOXP3融合蛋白的纯化第45-46页
     ·PTD-eGFP-hFOXP3和PTD-hFOXP3融合蛋白的鉴定第46页
   ·融合蛋白穿膜功能的检测结果第46-51页
     ·PTD-eGFP-FOXP3融合蛋白穿膜的FCS分析第46-49页
     ·荧光显微镜及激光共聚焦显微镜观察结果第49-50页
     ·融合蛋白穿膜功能的western blot分析第50-51页
   ·细胞增殖实验结果第51-53页
     ·Jurkat细胞活化条件的确立第51-52页
     ·CCK8法检测融合蛋白对Jurkat细胞增殖的影响第52-53页
   ·讨论第53-54页
第六章 主要结论及展望第54-56页
   ·主要结论第54页
   ·展望第54-56页
参考文献第56-64页
英文缩写索引第64-66页
致谢第66-67页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第67页

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