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NF-κB通路负调控Keap1-Nrf2通路及其分子机制研究

摘要第1-4页
ABSTRACT第4-8页
前言第8-9页
第一章 文献综述第9-22页
   ·引言第9页
   ·Nrf2-Keap1-ARE 信号通路第9-16页
     ·Nrf2 的基本结构与功能第10-11页
     ·Keap1 基本结构与功能第11-12页
     ·Nrf2-Keap1-ARE 信号通路激活机制第12-15页
     ·Nrf2-Keap1-ARE 信号通路的生物学功能第15-16页
   ·NF-κB 信号通路第16-20页
     ·NF-κB/ IκB/IKK 组成结构及功能第16-17页
     ·NF-κB 信号通路的激活第17-20页
     ·NF-κB 生物学功能第20页
   ·NF-κB 通路与Nrf2 通路的交互第20-22页
第二章 材料与方法第22-33页
   ·仪器设备第22-23页
   ·溶液配制第23-25页
     ·细菌培养相关溶液第23页
     ·细胞培养相关溶液第23页
     ·Western-Blot 相关试剂第23-24页
     ·细胞裂解溶液第24页
     ·核蛋白提取相关溶液第24页
     ·凝胶迁移实验相关溶液第24-25页
   ·实验材料第25-26页
     ·质粒第25页
     ·菌株第25页
     ·细胞第25页
     ·试剂第25-26页
   ·实验方法第26-33页
     ·细胞培养条件第26页
     ·细胞总蛋白质的提取第26页
     ·质粒DNA 的小量提取第26-27页
     ·细胞转染第27页
     ·免疫印迹Western Blot第27-28页
     ·细胞总RNA 的提取第28页
     ·反转录PCR第28-29页
     ·重组质粒载体的构建第29页
     ·双荧光素酶报告基因检测第29-30页
     ·凝胶迁移实验第30-32页
     ·免疫共沉淀第32页
     ·Pull Down第32-33页
第三章 实验结果第33-60页
   ·双荧光素酶报告基因检测系统的建立第33-37页
     ·报告基因在HEK293 细胞系和HepG2 细胞系中的活性第33-35页
     ·HEK293 细胞中pGL3-ARE 剂量与活性关系第35-36页
     ·Keap1 对pGL3-ARE 的影响第36-37页
   ·外源刺激活化NF-κB 通路对Nrf2 通路的调控第37-43页
     ·HEK293 细胞中外源刺激对NF-κB 通路及Nrf2 通路的影响第38-40页
     ·HepG2 细胞中外源刺激对NF-κB 通路和Nrf2 通路的影响第40-43页
   ·NF-κB 通路蛋白对于Nrf2 通路的调控第43-53页
     ·NF-κB 通路激活蛋白对Nrf2 通路的调控第44-50页
     ·IκBα对Nrf2 通路的调控第50-51页
     ·p65 对Nrf2 通路的调控第51-53页
   ·p65 对Nrf2 的DNA 结合活性的影响第53-55页
   ·p65 截短体对Nrf2 的调控第55-57页
   ·p65 与Keap1 相互作用验证第57-60页
第四章 讨论第60-66页
   ·双荧光素酶报告基因检测系统有效性第60页
   ·NF-κB 通路负调控Nrf2 通路第60-63页
   ·p65 负调控Nrf2 通路的分子机制第63-64页
   ·NF-κB 通路负调控Nrf2 通路意义第64-66页
第五章 结论与展望第66-67页
   ·结论第66页
   ·展望第66-67页
参考文献第67-71页
致谢第71页

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