摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-8页 |
前言 | 第8-9页 |
第一章 文献综述 | 第9-22页 |
·引言 | 第9页 |
·Nrf2-Keap1-ARE 信号通路 | 第9-16页 |
·Nrf2 的基本结构与功能 | 第10-11页 |
·Keap1 基本结构与功能 | 第11-12页 |
·Nrf2-Keap1-ARE 信号通路激活机制 | 第12-15页 |
·Nrf2-Keap1-ARE 信号通路的生物学功能 | 第15-16页 |
·NF-κB 信号通路 | 第16-20页 |
·NF-κB/ IκB/IKK 组成结构及功能 | 第16-17页 |
·NF-κB 信号通路的激活 | 第17-20页 |
·NF-κB 生物学功能 | 第20页 |
·NF-κB 通路与Nrf2 通路的交互 | 第20-22页 |
第二章 材料与方法 | 第22-33页 |
·仪器设备 | 第22-23页 |
·溶液配制 | 第23-25页 |
·细菌培养相关溶液 | 第23页 |
·细胞培养相关溶液 | 第23页 |
·Western-Blot 相关试剂 | 第23-24页 |
·细胞裂解溶液 | 第24页 |
·核蛋白提取相关溶液 | 第24页 |
·凝胶迁移实验相关溶液 | 第24-25页 |
·实验材料 | 第25-26页 |
·质粒 | 第25页 |
·菌株 | 第25页 |
·细胞 | 第25页 |
·试剂 | 第25-26页 |
·实验方法 | 第26-33页 |
·细胞培养条件 | 第26页 |
·细胞总蛋白质的提取 | 第26页 |
·质粒DNA 的小量提取 | 第26-27页 |
·细胞转染 | 第27页 |
·免疫印迹Western Blot | 第27-28页 |
·细胞总RNA 的提取 | 第28页 |
·反转录PCR | 第28-29页 |
·重组质粒载体的构建 | 第29页 |
·双荧光素酶报告基因检测 | 第29-30页 |
·凝胶迁移实验 | 第30-32页 |
·免疫共沉淀 | 第32页 |
·Pull Down | 第32-33页 |
第三章 实验结果 | 第33-60页 |
·双荧光素酶报告基因检测系统的建立 | 第33-37页 |
·报告基因在HEK293 细胞系和HepG2 细胞系中的活性 | 第33-35页 |
·HEK293 细胞中pGL3-ARE 剂量与活性关系 | 第35-36页 |
·Keap1 对pGL3-ARE 的影响 | 第36-37页 |
·外源刺激活化NF-κB 通路对Nrf2 通路的调控 | 第37-43页 |
·HEK293 细胞中外源刺激对NF-κB 通路及Nrf2 通路的影响 | 第38-40页 |
·HepG2 细胞中外源刺激对NF-κB 通路和Nrf2 通路的影响 | 第40-43页 |
·NF-κB 通路蛋白对于Nrf2 通路的调控 | 第43-53页 |
·NF-κB 通路激活蛋白对Nrf2 通路的调控 | 第44-50页 |
·IκBα对Nrf2 通路的调控 | 第50-51页 |
·p65 对Nrf2 通路的调控 | 第51-53页 |
·p65 对Nrf2 的DNA 结合活性的影响 | 第53-55页 |
·p65 截短体对Nrf2 的调控 | 第55-57页 |
·p65 与Keap1 相互作用验证 | 第57-60页 |
第四章 讨论 | 第60-66页 |
·双荧光素酶报告基因检测系统有效性 | 第60页 |
·NF-κB 通路负调控Nrf2 通路 | 第60-63页 |
·p65 负调控Nrf2 通路的分子机制 | 第63-64页 |
·NF-κB 通路负调控Nrf2 通路意义 | 第64-66页 |
第五章 结论与展望 | 第66-67页 |
·结论 | 第66页 |
·展望 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
致谢 | 第71页 |