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柿果实扩张蛋白基因cDNA克隆及原核表达

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第一章 文献综述第11-26页
   ·植物细胞壁扩张蛋白( Expansin)研究进展第11-16页
     ·植物 Expansin 的发现第11-12页
     ·Expansin 与细胞生长第12-13页
     ·Expansin 与果实成熟软化第13-14页
     ·Expansin 引起的细胞壁松弛特性及作用模式第14-15页
     ·Expansin 的序列分析第15页
     ·Expansin 研究展望第15-16页
   ·果实采后生物技术的应用第16-18页
     ·PG 与果实延熟第16-17页
     ·ACC 合成酶与果实延熟第17页
     ·ACC 氧化酶与果实延熟第17-18页
   ·RACE 技术第18-20页
     ·克隆全长cDNA 的方法第18页
     ·RACE 技术的原理和优缺点第18-19页
     ·RACE 技术的应用及前景第19-20页
   ·基因体外原核表达技术第20-25页
     ·细菌表达系统的应用范围第20-21页
     ·外源基因在原核细胞中表达的重要调控元件第21-22页
     ·原核表达系统中几中常见的载体系统第22-25页
     ·宿主菌的选择第25页
   ·本研究的目的意义第25-26页
第二章 材料与方法第26-36页
   ·材料第26页
     ·果实材料第26页
     ·质粒和菌株第26页
     ·试剂与仪器第26页
   ·方法第26-36页
     ·柿果实总 RNA 提取与检测第26-27页
     ·反转录及RT-PCR 扩增EXP 基因片段第27-28页
     ·PCR 产物回收纯化第28-29页
     ·cDNA 克隆第29-30页
     ·3’RACE 和5’RACE 反应第30页
     ·EXP 基因全长序列的获得及分析第30-31页
     ·原核表达载体构建第31-33页
     ·融合蛋白诱导表达第33-36页
第三章 结果分析第36-43页
   ·柿果实总 RNA 的提取第36页
   ·RT-PCR 扩增柿果实EXP 基因片段第36页
   ·5’RACE 和3’RACE 扩增结果第36-37页
   ·柿果实EXP 基因cDNA 全长扩增第37-38页
   ·序列分析第38-42页
     ·核苷酸序列比对分析第38页
     ·柿果实扩张蛋白基因推导的氨基酸序列分析第38-41页
     ·柿果实扩张蛋白基因氨基酸序列系统进化分析第41页
     ·信号肽预测结果第41-42页
   ·原核表达第42-43页
第四章 讨论第43-45页
   ·柿果实基因cDNA 克隆第43-44页
   ·CDK-Exp3 的原核表达第44-45页
     ·设计扩增ORF 的引物第44页
     ·表达系统及表达条件的选择第44-45页
第五章 结论第45-46页
参考文献第46-54页
缩略语第54-55页
致谢第55-56页
作者简介第56页

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