| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-28页 |
| ·Bt 玉米的应用现状 | 第14-15页 |
| ·昆虫对Bt 产生抗性的现状 | 第15-16页 |
| ·Bt 蛋白杀虫机理 | 第16-18页 |
| ·昆虫对Bt 抗性产生的机理 | 第18-25页 |
| ·Bt 毒素的蛋白水解活性变化 | 第18页 |
| ·受体调节的Bt 抗性 | 第18-25页 |
| ·蛋白质组学及其在Bt 抗性研究方面的应用 | 第25-26页 |
| ·本论文研究目的和意义 | 第26-27页 |
| ·研究技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 Cry1Ab 抗性亚洲玉米螟对几种Bt 蛋白的交互抗性 | 第28-34页 |
| ·材料与方法 | 第28-30页 |
| ·供试亚洲玉米螟品系 | 第28页 |
| ·供试Bt 毒素蛋白 | 第28页 |
| ·毒力生测 | 第28-29页 |
| ·数据统计与分析 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-32页 |
| ·不同Bt 蛋白对ACB-AbR 和ACB-BtS 的毒力 | 第30页 |
| ·不同Bt 蛋白对ACB-AbR 和ACB-BtS 品系的生长抑制率 | 第30-32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 Bt 蛋白与亚洲玉米螟BBMV 结合分析 | 第34-45页 |
| ·材料与方法 | 第34-40页 |
| ·供试昆虫 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·缓冲液和培养基 | 第34-36页 |
| ·主要设备仪器 | 第36页 |
| ·BBMV 的提取 | 第36-37页 |
| ·BBMV 浓度的测定（Bradford 法） | 第37页 |
| ·LpNA 测定氨肽酶活性 | 第37页 |
| ·Cry1Ah 和Cry1Fa 的提取 | 第37-38页 |
| ·Cry11e 的提取 | 第38页 |
| ·Bt 蛋白的酶解活化 | 第38页 |
| ·Bt 蛋白的生物素标记 | 第38-39页 |
| ·Bt 蛋白与亚洲玉米螟幼虫中肠BBMV 的竞争结合实验 | 第39页 |
| ·Bt 蛋白与受体的配体结合 | 第39-40页 |
| ·结果与分析 | 第40-43页 |
| ·亚洲玉米螟幼虫中肠BBMV 和Bt 蛋白的SDS-PAGE 电泳图谱 | 第40-41页 |
| ·不同Bt 蛋白与亚洲玉米螟BBMV 的竞争结合 | 第41-43页 |
| ·Bt 蛋白在亚洲玉米螟幼虫中肠BBMV 上受体的检测 | 第43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 亚洲玉米螟BBMV 上Bt 蛋白结合位点鉴定 | 第45-58页 |
| ·材料与方法 | 第45-51页 |
| ·供试昆虫 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·缓冲液 | 第45-46页 |
| ·主要设备仪器 | 第46-47页 |
| ·亚洲玉米螟中肠BBMV 的制备 | 第47页 |
| ·蛋白含量的测定 | 第47页 |
| ·Bt 蛋白的提取、纯化和生物素标记 | 第47页 |
| ·BBMV 纯化 | 第47-48页 |
| ·第一向等电聚焦（IPGphor 系统） | 第48-49页 |
| ·IPG 胶条的平衡 | 第49页 |
| ·第二向SDS-PAGE 电泳 | 第49页 |
| ·Deep Purple 蛋白染色 | 第49-50页 |
| ·配体杂交 | 第50页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第50页 |
| ·凝胶图像匹配和分析 | 第50页 |
| ·蛋白胶内酶解 | 第50-51页 |
| ·质谱鉴定 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-56页 |
| ·亚洲玉米螟BBMV 的分离 | 第51-52页 |
| ·亚洲玉米螟 BBMV 上的Cry1Ab 结合位点 | 第52-53页 |
| ·其它Bt 蛋白在亚洲玉米螟BBMV 上结合位点 | 第53-55页 |
| ·质谱鉴定Bt 与亚洲玉米螟BBMV 的结合蛋白 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-58页 |
| 第五章 Cry1Ab 抗性和敏感亚洲玉米螟APN 基因的克隆及序列差异分析 | 第58-101页 |
| ·材料与方法 | 第58-66页 |
| ·供试亚洲玉米螟品系 | 第58页 |
| ·主要试剂 | 第58页 |
| ·缓冲液 | 第58-59页 |
| ·主要设备仪器 | 第59页 |
| ·亚洲玉米螟中肠总RNA 提取 | 第59-60页 |
| ·cDNA 合成 | 第60页 |
| ·引物设计合成 | 第60-61页 |
| ·中间片段PCR 扩增 | 第61-62页 |
| ·5′RACE | 第62-63页 |
| ·3′RACE. | 第63-64页 |
| ·PCR 产物回收 | 第64-65页 |
| ·连接转化 | 第65页 |
| ·质粒提取 | 第65-66页 |
| ·序列测定 | 第66页 |
| ·全长序列克隆 | 第66页 |
| ·序列分析 | 第66页 |
| ·结果与分析 | 第66-99页 |
| ·亚洲玉米螟幼虫中肠氨肽酶基因扩增和序列特征 | 第66-84页 |
| ·序列同源性分析 | 第84-96页 |
| ·抗性与敏感品系亚洲玉米螟APN 序列差异 | 第96-99页 |
| ·讨论 | 第99-101页 |
| 第六章 亚洲玉米螟幼虫中肠APN、钙粘蛋白基因的表达水平 | 第101-109页 |
| ·材料与方法 | 第101-103页 |
| ·供试昆虫 | 第101页 |
| ·主要试剂 | 第101页 |
| ·主要设备仪器 | 第101页 |
| ·亚洲玉米螟中肠RNA 的提取 | 第101页 |
| ·cDNA 的合成 | 第101-102页 |
| ·PCR 引物设计 | 第102-103页 |
| ·PCR 扩增 | 第103页 |
| ·定量方法 | 第103页 |
| ·结果与分析 | 第103-107页 |
| ·各基因扩增曲线 | 第103-104页 |
| ·各基因的定量结果 | 第104-107页 |
| ·讨论 | 第107-109页 |
| 第七章 结论 | 第109-111页 |
| ·主要结论 | 第109-110页 |
| ·本研究的创新点 | 第110页 |
| ·研究展望 | 第110-111页 |
| 参考文献 | 第111-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
| 作者简历 | 第125页 |
