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microRNA在恒河猴子宫内膜中的表达及其对靶基因的调节

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
1 引言第13-23页
   ·胚胎着床的动物模型第13-14页
   ·子宫内膜接受性的建立第14-16页
     ·接受态子宫内膜腔上皮的形态学变化第14-15页
     ·子宫内膜接受性的分子调控第15-16页
   ·调节型非编码RNA 与胚胎着床第16-19页
     ·miRNA 与胚胎着床第16-18页
     ·长的非编码RNA 与胚胎着床第18-19页
   ·高通量方法在胚胎着床研究中的应用第19-21页
     ·转录组学方法第19-20页
     ·高通量的miRNA 表达检测方法第20-21页
     ·蛋白组学方法的应用第21页
   ·研究的目的和意义第21-23页
2 材料与方法第23-36页
   ·实验动物与材料的收集第23页
     ·实验动物第23页
     ·材料的收集和保存第23页
   ·小分子RNA 深度测序分析第23-25页
     ·小分子RNA 文库构建与高通量测序第23-24页
     ·测序结果分析第24-25页
   ·基因表达标签测序第25-26页
     ·基因表达标签文库的构建与高通量测序第25页
     ·基因表达标签数据分析第25-26页
   ·Real-time PCR第26-29页
     ·RNA 提取第26页
     ·miRNA 定量第26-27页
     ·mRNA 定量第27-29页
   ·RNA 杂交探针的制备第29-31页
     ·引物设计第29页
     ·组织中总RNA 提取与DNA 的消化第29页
     ·反转录第29-30页
     ·扩增及产物回收第30页
     ·pGEM-T 载体的连接及转化第30-31页
     ·目的片段的PCR 扩增第31页
     ·地高辛标记 cRNA 探针第31页
   ·Northern blot第31-34页
     ·Northern blot 试剂配制第32页
     ·RNA 提取第32-33页
     ·琼脂糖凝胶电泳第33页
     ·探针杂交第33页
     ·杂交后洗涤和显影第33-34页
   ·miRNA 靶基因3'-UTR 载体构建与荧光酶素活性分析第34-36页
     ·miRNA 靶基因预测第34页
     ·3'-UTR-载体的构建第34-35页
     ·ECC-1 细胞转染第35页
     ·荧光素酶活性的测定第35-36页
3 结果第36-51页
   ·小分子RNA 深度测序结果分析第36-44页
     ·恒河猴子宫中小分子RNA 的组成第36-37页
     ·已知的miRNA 的表达第37-39页
     ·新发现的miRNA 的表达第39-40页
     ·miRNA 的差异表达第40-44页
     ·Real-time RT-PCR 验证第44页
   ·基因标签测序结果分析第44-48页
     ·差异表达基因的筛选第44-45页
     ·real-time RT-PCR 验证第45-46页
     ·基因3'-UTR 序列的鉴定第46-47页
     ·PGR 的3'-UTR 变体的鉴定第47-48页
   ·miRNA 对PGR 基因的调节第48-51页
     ·潜在调节PGR 基因的miRNA第48页
     ·miR-375 对PGR 的调节第48-49页
     ·miR-96 对PGR 的调节第49页
     ·miR-219-5p 对PGR 的调节第49-51页
4 讨论第51-60页
   ·子宫内膜 miRNA 表达谱第51-53页
     ·miRNA 丰度的比较第51-52页
     ·miRNA 表达差异的比较第52-53页
   ·PGR 基因的3'-UTR 变体形式第53-54页
   ·miRNA 可能通过 PGR 调节子宫内膜接受性第54-55页
   ·miRNA 对靶基因调节的物种特异性第55-57页
     ·物种特异的miRNA第55页
     ·miRNA 结合位点的保守性第55-56页
     ·3'-UTR 长度的变化第56-57页
     ·lncRNA 的物种特异性第57页
   ·lncRNA 作为miRNA 靶基因的潜力第57-60页
     ·miRNA 调节lncRNA 的表达第57-58页
     ·miRNA 通过 lncRNA 调节 PGR第58-59页
     ·lncRNA 作为miRNA 靶基因的意义第59-60页
5 结论第60-61页
致谢第61-62页
参考文献第62-73页
图版第73-80页
攻读博士期间发表的论文第80页

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