摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
1 引言 | 第13-23页 |
·胚胎着床的动物模型 | 第13-14页 |
·子宫内膜接受性的建立 | 第14-16页 |
·接受态子宫内膜腔上皮的形态学变化 | 第14-15页 |
·子宫内膜接受性的分子调控 | 第15-16页 |
·调节型非编码RNA 与胚胎着床 | 第16-19页 |
·miRNA 与胚胎着床 | 第16-18页 |
·长的非编码RNA 与胚胎着床 | 第18-19页 |
·高通量方法在胚胎着床研究中的应用 | 第19-21页 |
·转录组学方法 | 第19-20页 |
·高通量的miRNA 表达检测方法 | 第20-21页 |
·蛋白组学方法的应用 | 第21页 |
·研究的目的和意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-36页 |
·实验动物与材料的收集 | 第23页 |
·实验动物 | 第23页 |
·材料的收集和保存 | 第23页 |
·小分子RNA 深度测序分析 | 第23-25页 |
·小分子RNA 文库构建与高通量测序 | 第23-24页 |
·测序结果分析 | 第24-25页 |
·基因表达标签测序 | 第25-26页 |
·基因表达标签文库的构建与高通量测序 | 第25页 |
·基因表达标签数据分析 | 第25-26页 |
·Real-time PCR | 第26-29页 |
·RNA 提取 | 第26页 |
·miRNA 定量 | 第26-27页 |
·mRNA 定量 | 第27-29页 |
·RNA 杂交探针的制备 | 第29-31页 |
·引物设计 | 第29页 |
·组织中总RNA 提取与DNA 的消化 | 第29页 |
·反转录 | 第29-30页 |
·扩增及产物回收 | 第30页 |
·pGEM-T 载体的连接及转化 | 第30-31页 |
·目的片段的PCR 扩增 | 第31页 |
·地高辛标记 cRNA 探针 | 第31页 |
·Northern blot | 第31-34页 |
·Northern blot 试剂配制 | 第32页 |
·RNA 提取 | 第32-33页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
·探针杂交 | 第33页 |
·杂交后洗涤和显影 | 第33-34页 |
·miRNA 靶基因3'-UTR 载体构建与荧光酶素活性分析 | 第34-36页 |
·miRNA 靶基因预测 | 第34页 |
·3'-UTR-载体的构建 | 第34-35页 |
·ECC-1 细胞转染 | 第35页 |
·荧光素酶活性的测定 | 第35-36页 |
3 结果 | 第36-51页 |
·小分子RNA 深度测序结果分析 | 第36-44页 |
·恒河猴子宫中小分子RNA 的组成 | 第36-37页 |
·已知的miRNA 的表达 | 第37-39页 |
·新发现的miRNA 的表达 | 第39-40页 |
·miRNA 的差异表达 | 第40-44页 |
·Real-time RT-PCR 验证 | 第44页 |
·基因标签测序结果分析 | 第44-48页 |
·差异表达基因的筛选 | 第44-45页 |
·real-time RT-PCR 验证 | 第45-46页 |
·基因3'-UTR 序列的鉴定 | 第46-47页 |
·PGR 的3'-UTR 变体的鉴定 | 第47-48页 |
·miRNA 对PGR 基因的调节 | 第48-51页 |
·潜在调节PGR 基因的miRNA | 第48页 |
·miR-375 对PGR 的调节 | 第48-49页 |
·miR-96 对PGR 的调节 | 第49页 |
·miR-219-5p 对PGR 的调节 | 第49-51页 |
4 讨论 | 第51-60页 |
·子宫内膜 miRNA 表达谱 | 第51-53页 |
·miRNA 丰度的比较 | 第51-52页 |
·miRNA 表达差异的比较 | 第52-53页 |
·PGR 基因的3'-UTR 变体形式 | 第53-54页 |
·miRNA 可能通过 PGR 调节子宫内膜接受性 | 第54-55页 |
·miRNA 对靶基因调节的物种特异性 | 第55-57页 |
·物种特异的miRNA | 第55页 |
·miRNA 结合位点的保守性 | 第55-56页 |
·3'-UTR 长度的变化 | 第56-57页 |
·lncRNA 的物种特异性 | 第57页 |
·lncRNA 作为miRNA 靶基因的潜力 | 第57-60页 |
·miRNA 调节lncRNA 的表达 | 第57-58页 |
·miRNA 通过 lncRNA 调节 PGR | 第58-59页 |
·lncRNA 作为miRNA 靶基因的意义 | 第59-60页 |
5 结论 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-73页 |
图版 | 第73-80页 |
攻读博士期间发表的论文 | 第80页 |