| 中文摘要 | 第1-9页 |
| 英文摘要 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-19页 |
| ·文献综述 | 第11-18页 |
| ·干扰素简介 | 第11页 |
| ·干扰素的分类和特点 | 第11页 |
| ·IFN-α | 第11-13页 |
| ·干扰素产生的机理 | 第13-14页 |
| ·干扰素发挥抗病毒活性的机理 | 第14-15页 |
| ·鸡干扰素的研究概况 | 第15-16页 |
| ·基因工程药物 | 第16-17页 |
| ·包涵体的复性原理 | 第17页 |
| ·蛋白质体外复性的方法 | 第17-18页 |
| ·研究的目的与意义 | 第18-19页 |
| 2 材料 | 第19-22页 |
| ·质粒、宿主菌、病毒 | 第19页 |
| ·细胞培养基、血清和胚 | 第19页 |
| ·酶和生化试剂 | 第19页 |
| ·软件和网站 | 第19页 |
| ·主要仪器和设备 | 第19-20页 |
| ·主要试剂的配制 | 第20-22页 |
| 3 实验方法 | 第22-30页 |
| ·利用生物信息学优化设计鸡干扰素-α成熟蛋白基因 | 第22-25页 |
| ·稀有密码子的分析和优化 | 第22页 |
| ·密码子适应性指数分析 | 第22-24页 |
| ·起始密码子区域的碱基优化 | 第24页 |
| ·终止密码子区域的碱基优化 | 第24页 |
| ·密码子对的优化 | 第24页 |
| ·表达水平的预测 | 第24-25页 |
| ·全基因合成的鸡IFN-α成熟蛋白的原核表达 | 第25-27页 |
| ·载体pWL-ChIFN-α的构建 | 第25-26页 |
| ·全基因合成鸡IFN-α成熟蛋白的原核表达及条件优化 | 第26-27页 |
| ·蛋白的复性和纯化 | 第27-28页 |
| ·生物学活性的检定 | 第28-30页 |
| ·鸡胚成纤维细胞的制备 | 第28页 |
| ·高滴度病毒的制备 | 第28-29页 |
| ·活性测定 | 第29-30页 |
| 4 结果 | 第30-38页 |
| ·基因高效表达的设计 | 第30-32页 |
| ·鸡IFN-α的稀有密码子的分析 | 第30-31页 |
| ·鸡IFN-αCAI 的分析 | 第31页 |
| ·鸡IFN-αmRNA 二级结构和自由能的分析结果 | 第31-32页 |
| ·鸡全基因合成IFN-α基因的克隆 | 第32-35页 |
| ·鸡全基因合成IFN-α基因的鉴定 | 第32-33页 |
| ·重组表达载体的构建 | 第33页 |
| ·重组鸡IFN-α的表达和优化 | 第33-35页 |
| ·重组鸡IFN-α的一步复性并纯化 | 第35-36页 |
| ·重组鸡IFN-α复性和纯化过程中的得率计算 | 第36页 |
| ·鸡IFN-α抗病毒活性检测 | 第36-38页 |
| 5 讨论 | 第38-43页 |
| ·关于基因优化设计 | 第38-39页 |
| ·蛋白的复性和纯化 | 第39-41页 |
| ·IFN-α活性的测定 | 第41-43页 |
| 6 结论 | 第43-44页 |
| 致谢 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-49页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第49页 |