| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 1 绪论 | 第9-23页 |
| ·引言 | 第9-23页 |
| ·Bt抗虫基因 | 第10-14页 |
| ·植物遗传转化方法 | 第14-16页 |
| ·Bt抗虫基因转化杨树的研究进展 | 第16-18页 |
| ·展望 | 第18-21页 |
| ·本研究的立题依据和技术路线 | 第21-23页 |
| 2 塔形毛白杨CV-BJHR01再生体系的建立 | 第23-28页 |
| ·引言 | 第23页 |
| ·实验材料 | 第23-24页 |
| ·植物材料 | 第23页 |
| ·植物培养试剂 | 第23页 |
| ·培养设备 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24页 |
| ·无菌材料的获得 | 第24页 |
| ·外植体的分化、伸长以及生根培养 | 第24页 |
| ·炼苗及移栽 | 第24页 |
| ·结果与分析 | 第24-27页 |
| ·讨论 | 第27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 3 塔形毛白杨CV-BJHR01遗传转化系统的验证和优化 | 第28-37页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·实验材料 | 第28-29页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·菌株与载体 | 第28页 |
| ·试剂盒和生化试剂 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·GUS染色所需的溶液配制 | 第29页 |
| ·实验方法 | 第29-33页 |
| ·碱法小量提取质粒DNA | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第30页 |
| ·热击转化大肠杆菌感受态细胞 | 第30-31页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第31页 |
| ·电击法转化农杆菌感受态细胞 | 第31页 |
| ·农杆菌C58介导的gus基因的转化及GUS染色 | 第31-33页 |
| ·杨树外植体材料的Kan浓度梯度筛选 | 第33页 |
| ·结果与分析 | 第33-36页 |
| ·塔形毛白杨CV-BJHR01遗传转化系统的验证 | 第33-35页 |
| ·对塔形毛白杨CV-BJHR01卡那霉素抗性研究 | 第35-36页 |
| ·讨论 | 第36页 |
| ·本章小结 | 第36-37页 |
| 4 抗虫转基因塔形毛白杨的获得 | 第37-52页 |
| ·引言 | 第37页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·植物材料 | 第37页 |
| ·菌株与载体 | 第37页 |
| ·试剂盒和生化试剂 | 第37页 |
| ·培养基 | 第37页 |
| ·提取杨树DNA溶液的配制 | 第37-38页 |
| ·PCR-Southern所需要的溶液配制 | 第38页 |
| ·mBt-Cry3A ImmunoStrip Test缓冲液的配制 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-44页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第38页 |
| ·酶切验证载体pBin438-Mcry3 | 第38-39页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·电击法转化农杆菌感受态细胞 | 第39页 |
| ·农杆菌C58介导的mBt886cry3Aa抗虫基因的转化 | 第39-40页 |
| ·再生植株的PCR检测 | 第40-41页 |
| ·PCR-Southem杂交 | 第41-43页 |
| ·mBt-Cry3A ImmunoStrip检测 | 第43页 |
| ·mBt-Cry3A ELISA Kit检测 | 第43-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-49页 |
| ·双酶切验证载体pBin438-Mcry3 | 第44-46页 |
| ·PCR检测阳性植株 | 第46-47页 |
| ·PCR-Southem杂交检测阳性植株 | 第47页 |
| ·mBt-Cry3A ImmunoStrip检测 | 第47-49页 |
| ·mBt-Cry3A ELISA Kit检测 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| ·本章小结 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 附录 | 第59-60页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
