| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-37页 |
| ·水稻插入突变体库创建的现状 | 第12-15页 |
| ·植物DNA双链断裂(Double Strand Break,DSB)修复概述 | 第15-16页 |
| ·植物减数分裂过程中同源染色体配对与重组的研究进展 | 第16-27页 |
| ·减数分裂的细胞学过程 | 第17-18页 |
| ·减数分裂时同源染色体配对和重组的过程 | 第18-22页 |
| ·拟南芥中与同源染色体配对、修复与重组的相关基因 | 第22-26页 |
| ·DSB的形成 | 第22-23页 |
| ·RecA/RAD51基因家族在减数分裂过程中的作用 | 第23-24页 |
| ·其它参与减数分裂DNA修复和重组的基因 | 第24-25页 |
| ·减数分裂过程前期Ⅰ交叉结的形成 | 第25-26页 |
| ·水稻减数分裂相关基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·DNA复制蛋白A(Replication Protein A,RPA)的研究进展 | 第27-37页 |
| ·RPA的研究概述 | 第27页 |
| ·RPA的结构 | 第27-30页 |
| ·RPA与DNA的互作 | 第30页 |
| ·RPA与蛋白质的互作及其功能 | 第30-35页 |
| ·RPA与DNA复制因子的互作 | 第31-32页 |
| ·RPA和DNA修复因子的互作 | 第32-34页 |
| ·RPA和重组因子的互作 | 第34-35页 |
| ·植物中的RPA研究进展 | 第35-37页 |
| 2 本研究的目的和意义 | 第37-38页 |
| 3 材料与方法 | 第38-45页 |
| ·试验材料 | 第38页 |
| ·水稻材料 | 第38页 |
| ·菌株、质粒和感受态细胞 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-45页 |
| ·水稻的DNA抽提 | 第38页 |
| ·水稻T-DNA插入突变体库T0代单株的阳性检测 | 第38-39页 |
| ·FST的扩增和测序 | 第39-40页 |
| ·不同物种中RPA蛋白序列的获得、结构域分析和进化树的构建 | 第40-41页 |
| ·遗传转化载体的构建和转化 | 第41页 |
| ·互补载体的构建 | 第41页 |
| ·RNAi载体的构建 | 第41页 |
| ·遗传转化 | 第41页 |
| ·互补植株的阳性检测和拷贝数检测 | 第41-42页 |
| ·总RNA的抽提以及RT-PCR和Real-time PCR | 第42页 |
| ·水稻胚囊发育过程的观察 | 第42-43页 |
| ·成熟花粉的碘染 | 第43页 |
| ·减数分裂和有丝分裂的观察 | 第43-44页 |
| ·水稻对MMS,MMC的敏感性检测 | 第44页 |
| ·水稻对UV的敏感性检测 | 第44页 |
| ·TUNEL检测 | 第44-45页 |
| 4 结果与分析 | 第45-76页 |
| ·突变体库To代植株的阳性检测和FST的分离 | 第45-46页 |
| ·代表性植物物种中RPA基因家族的结构和进化分析 | 第46-49页 |
| ·水稻RPA基因家族的表达分析 | 第49-52页 |
| ·OsRPA突变体的鉴定和分析 | 第52-60页 |
| ·双链RNA抑制野生型植株中OsRPA1a和OsRPA2-3的表达导致水稻育性降低 | 第60-62页 |
| ·Osrpa1a和osrpa2-3突变体的互补遗传分析 | 第62-64页 |
| ·Osrpa1a和osrpa2-3的胚囊败育发生在大孢子母细胞减数分裂过程中 | 第64-67页 |
| ·Osrpa1a和osrpa2-3花粉母细胞的减数分裂过程受到严重影响 | 第67-71页 |
| ·Osrpa1a和osrpa2-3突变体的有丝分裂未受影响 | 第71-72页 |
| ·Osrpa1a和osrpa2-3突变体对DNA诱变剂的敏感性检测 | 第72-74页 |
| ·TUNEL检测osrpa1a突变体体内的DNA损伤情况 | 第74-76页 |
| 5 讨论 | 第76-85页 |
| ·Osrpa1a突变体的育性 | 第76-77页 |
| ·Osrpa1a突变体减数分裂染色体行为的独特性 | 第77-78页 |
| ·OsRPAla对多种DNA的修复途径都是必需的 | 第78-79页 |
| ·OsRPAs的功能分化 | 第79-81页 |
| ·水稻减数分裂研究的策略与展望 | 第81-83页 |
| ·本研究后续工作的一些设想 | 第83-85页 |
| ·OsRPA基因家族成员对DNA诱变剂的应答反应 | 第83页 |
| ·不同OsRPA2亚基在DNA损伤后的磷酸化 | 第83页 |
| ·OsRPA1b,OsRPA1c,OsRPA2-1,OsRPA2-2和OsRPA3基因的功能分析 | 第83-84页 |
| ·减数分裂标志蛋白在osrp1a和osrpa2-3突变体中的变化 | 第84-85页 |
| 6 参考文献 | 第85-103页 |
| 7 附录 | 第103-116页 |
| 附录1.水稻DNA的少量制备法 | 第103页 |
| 附录2.水稻DNA的大量制备法(CTAB法) | 第103-104页 |
| 附录3.Southern blotting | 第104-107页 |
| 附录4.互补载体的构建方法 | 第107-109页 |
| 附录5.RNA的抽提 | 第109页 |
| 附录6.RNA的反转录 | 第109-110页 |
| 附录7.改良卡宝品红染液的配制 | 第110页 |
| 附录8.10mM柠檬酸缓冲液(pH=4.5)的配制 | 第110页 |
| 附录9.TUNEL assay | 第110-112页 |
| 附录10.本实验中用到的引物序列表 | 第112-114页 |
| 附录11.CREP芯片数据库中组织/器官样品编号 | 第114-115页 |
| 附录12.RiceGE芯片数据库中组织/器官样品编号 | 第115-116页 |
| 作者简历 | 第116-117页 |
| 致谢 | 第117页 |
