| 课题来源 | 第2-6页 |
| 中文摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 缩略词 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-20页 |
| 第一章 贵州省ALV-J临床病例检测及gp85序列分析 | 第20-42页 |
| 1.材料 | 第20-21页 |
| 1.1 样品来源 | 第20页 |
| 1.2 主要试剂 | 第20-21页 |
| 1.3 主要仪器 | 第21页 |
| 2.方法 | 第21-28页 |
| 2.1 引物设计 | 第21-22页 |
| 2.2 临床病料的PCR鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3 临床病料的混合感染情况 | 第23-24页 |
| 2.4 gp85基因克隆 | 第24-26页 |
| 2.5 序列分析 | 第26-28页 |
| 3.结果 | 第28-40页 |
| 3.1 临床病料ALV-J的PCR鉴定结果 | 第28页 |
| 3.2 混合感染情况 | 第28-30页 |
| 3.3 重组质粒鉴定结果 | 第30页 |
| 3.4 gp85基因序列分析 | 第30-34页 |
| 3.5 gp85基因的生物信息学分析 | 第34-40页 |
| 4.讨论 | 第40-42页 |
| 4.1 流行株的gp85基因序列分析 | 第40页 |
| 4.2 ALV-J的混合感染 | 第40-41页 |
| 4.3 gp85蛋白生物信息学分析 | 第41-42页 |
| 第二章 p27基因的原核表达及其编码蛋白高免血清的制备 | 第42-55页 |
| 1.材料 | 第42-43页 |
| 1.1 实验动物及毒株 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
| 1.3 主要仪器 | 第43页 |
| 2.方法 | 第43-50页 |
| 2.1 引物设计 | 第43页 |
| 2.2 总RNA的提取及反转录 | 第43-44页 |
| 2.3 携带ALV-Ap27基因的原核表达载体的构建 | 第44-46页 |
| 2.4 重组蛋白的诱导表达 | 第46-47页 |
| 2.5 重组蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 2.6 Western-blotting鉴定 | 第48-49页 |
| 2.7 抗p27多克隆抗体的制备 | 第49-50页 |
| 3.结果 | 第50-53页 |
| 3.1 原核表达质粒PCR鉴定及酶切鉴定结果 | 第50-51页 |
| 3.2 重组蛋白的诱导及纯化结果 | 第51-53页 |
| 4.讨论 | 第53-55页 |
| 4.1 关于重组蛋白的表达 | 第53页 |
| 4.2 关于动物的免疫 | 第53-55页 |
| 第三章 中药最大安全浓度的测定 | 第55-64页 |
| 1.材料 | 第55-56页 |
| 1.1 中药 | 第55页 |
| 1.2 细胞 | 第55-56页 |
| 1.3 试剂 | 第56页 |
| 1.4 仪器 | 第56页 |
| 2.方法 | 第56-58页 |
| 2.1 细胞培养 | 第56-57页 |
| 2.2 中药药液的制备 | 第57页 |
| 2.3 中药最大安全浓度的测定 | 第57-58页 |
| 3.结果 | 第58-62页 |
| 3.1 细胞病变法测定结果 | 第58-59页 |
| 3.2 MTT法测定结果 | 第59-62页 |
| 4.讨论 | 第62-64页 |
| 4.1 关于MTT法 | 第62页 |
| 4.2 中药对细胞增殖的影响 | 第62-63页 |
| 4.3 中药提取方法 | 第63-64页 |
| 第四章 不同中药对ALV转录水平的影响 | 第64-75页 |
| 1.材料 | 第64-65页 |
| 1.1 毒株 | 第64页 |
| 1.2 试剂 | 第64页 |
| 1.3 仪器 | 第64-65页 |
| 2.方法 | 第65-67页 |
| 2.1 荧光定量PCR方法的建立 | 第65-66页 |
| 2.2 病毒TCID50的测定 | 第66页 |
| 2.3 中药对ALV转录水平的影响 | 第66-67页 |
| 3.结果 | 第67-72页 |
| 3.1 荧光定量PCR方法的建立结果 | 第67-69页 |
| 3.2 病毒TCID50的测定结果 | 第69-70页 |
| 3.3 中药对ALV转录水平的影响结果 | 第70-72页 |
| 4.讨论 | 第72-75页 |
| 4.1 实时荧光定量PCR技术在ALV检测中的应用 | 第72-73页 |
| 4.2 黄芪抗肿瘤作用 | 第73页 |
| 4.3 中药抗ALV | 第73-75页 |
| 全文结论 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 附录一 发表文章 | 第83-84页 |
| 附录二 各种培养基、溶液及试剂的配制 | 第84-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
