摘要 | 第5-8页 |
ABSTRACT | 第8-10页 |
第一章 绪论 | 第17-25页 |
1.1 研究背景 | 第17-19页 |
1.1.1 卵巢癌 | 第17-18页 |
1.1.2 卵巢癌与表观遗传学 | 第18-19页 |
1.2 LSD1 | 第19-20页 |
1.2.1 LSD1概述 | 第19页 |
1.2.2 LSD1与肿瘤的关系 | 第19-20页 |
1.3 细胞自噬 | 第20-24页 |
1.3.1 自噬概念及类型 | 第20-21页 |
1.3.2 自噬与肿瘤的关系 | 第21-22页 |
1.3.3 自噬的调控 | 第22-24页 |
1.4 研究意义 | 第24-25页 |
第二章 建立诱导型稳定敲低LSD1的卵巢癌HO8910细胞株 | 第25-43页 |
2.1 实验材料与试剂 | 第25-31页 |
2.1.1 实验细胞 | 第25页 |
2.1.2 实验试剂 | 第25-27页 |
2.1.3 实验主要溶剂 | 第27-29页 |
2.1.4 实验耗材 | 第29-30页 |
2.1.5 实验仪器 | 第30-31页 |
2.2 实验方法 | 第31-38页 |
2.2.1 细胞培养 | 第31-32页 |
2.2.2 质粒的转化与抽提 | 第32页 |
2.2.3 慢病毒包装转染 | 第32-34页 |
2.2.4 筛选诱导型稳定干扰LSD1的HO8910细胞 | 第34页 |
2.2.5 Western blotting检测LSD1及其底物H3K4me2蛋白表达 | 第34-36页 |
2.2.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LSD1 mRNA表达 | 第36-38页 |
2.3 数据处理及统计学分析 | 第38页 |
2.4 实验结果 | 第38-40页 |
2.4.1 诱导型稳定干扰LSD1的效率验证 | 第38-39页 |
2.4.2 LSD1的下调效果与Dox呈时间剂量依赖性关系 | 第39-40页 |
2.5 讨论 | 第40-43页 |
第三章 敲低LSD1表达诱导卵巢癌细胞自噬的发生 | 第43-55页 |
3.1 实验材料 | 第43-45页 |
3.1.1 实验细胞 | 第43页 |
3.1.2 实验试剂 | 第43-44页 |
3.1.3 实验主要溶剂 | 第44页 |
3.1.4 实验耗材 | 第44-45页 |
3.1.5 实验仪器 | 第45页 |
3.2 试验方法 | 第45-47页 |
3.2.1 细胞培养 | 第45页 |
3.2.2 Western blotting | 第45页 |
3.2.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第45页 |
3.2.4 免疫荧光 | 第45-46页 |
3.2.5 GFP-LC3单荧光体系示踪实验 | 第46-47页 |
3.3 数据处理及统计学分析 | 第47页 |
3.4 实验结果 | 第47-52页 |
3.4.1 敲低或抑制LSD1促进自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的累积 | 第47-49页 |
3.4.2 敲低或抑制LSD1不影响LC3 mRNA的表达 | 第49-50页 |
3.4.3 敲低LSD1表达诱导卵巢癌细胞自噬 | 第50-52页 |
3.5 讨论 | 第52-55页 |
第四章 干扰LSD1表达诱导卵巢癌细胞自噬的机制研究 | 第55-64页 |
4.1 实验材料 | 第55-56页 |
4.1.1 实验细胞 | 第55页 |
4.1.2 实验试剂 | 第55页 |
4.1.3 实验主要溶剂 | 第55-56页 |
4.1.4 实验耗材 | 第56页 |
4.1.5 实验仪器 | 第56页 |
4.2 实验方法 | 第56页 |
4.2.1 细胞培养 | 第56页 |
4.2.2 Western blotting | 第56页 |
4.2.3 免疫荧光 | 第56页 |
4.3 数据处理及统计学分析 | 第56页 |
4.4 实验结果 | 第56-61页 |
4.4.1 饥饿和雷帕霉素诱导卵巢癌细胞自噬 | 第56-57页 |
4.4.2 LSD1参与饥饿和雷帕霉素诱导的细胞自噬过程 | 第57-59页 |
4.4.3 LSD1通过mTOR信号通路调节细胞自噬 | 第59-61页 |
4.5 讨论 | 第61-64页 |
结论与展望 | 第64-65页 |
结论 | 第64页 |
展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-76页 |
综述 | 第76-84页 |
参考文献 | 第81-84页 |
致谢 | 第84-85页 |
攻读硕士学位期间所发表的论文及参与的课题 | 第85页 |