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LSD1通过调节mTOR信号通路抑制卵巢癌细胞自噬的机制研究

摘要第5-8页
ABSTRACT第8-10页
第一章 绪论第17-25页
    1.1 研究背景第17-19页
        1.1.1 卵巢癌第17-18页
        1.1.2 卵巢癌与表观遗传学第18-19页
    1.2 LSD1第19-20页
        1.2.1 LSD1概述第19页
        1.2.2 LSD1与肿瘤的关系第19-20页
    1.3 细胞自噬第20-24页
        1.3.1 自噬概念及类型第20-21页
        1.3.2 自噬与肿瘤的关系第21-22页
        1.3.3 自噬的调控第22-24页
    1.4 研究意义第24-25页
第二章 建立诱导型稳定敲低LSD1的卵巢癌HO8910细胞株第25-43页
    2.1 实验材料与试剂第25-31页
        2.1.1 实验细胞第25页
        2.1.2 实验试剂第25-27页
        2.1.3 实验主要溶剂第27-29页
        2.1.4 实验耗材第29-30页
        2.1.5 实验仪器第30-31页
    2.2 实验方法第31-38页
        2.2.1 细胞培养第31-32页
        2.2.2 质粒的转化与抽提第32页
        2.2.3 慢病毒包装转染第32-34页
        2.2.4 筛选诱导型稳定干扰LSD1的HO8910细胞第34页
        2.2.5 Western blotting检测LSD1及其底物H3K4me2蛋白表达第34-36页
        2.2.6 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LSD1 mRNA表达第36-38页
    2.3 数据处理及统计学分析第38页
    2.4 实验结果第38-40页
        2.4.1 诱导型稳定干扰LSD1的效率验证第38-39页
        2.4.2 LSD1的下调效果与Dox呈时间剂量依赖性关系第39-40页
    2.5 讨论第40-43页
第三章 敲低LSD1表达诱导卵巢癌细胞自噬的发生第43-55页
    3.1 实验材料第43-45页
        3.1.1 实验细胞第43页
        3.1.2 实验试剂第43-44页
        3.1.3 实验主要溶剂第44页
        3.1.4 实验耗材第44-45页
        3.1.5 实验仪器第45页
    3.2 试验方法第45-47页
        3.2.1 细胞培养第45页
        3.2.2 Western blotting第45页
        3.2.3 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第45页
        3.2.4 免疫荧光第45-46页
        3.2.5 GFP-LC3单荧光体系示踪实验第46-47页
    3.3 数据处理及统计学分析第47页
    3.4 实验结果第47-52页
        3.4.1 敲低或抑制LSD1促进自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的累积第47-49页
        3.4.2 敲低或抑制LSD1不影响LC3 mRNA的表达第49-50页
        3.4.3 敲低LSD1表达诱导卵巢癌细胞自噬第50-52页
    3.5 讨论第52-55页
第四章 干扰LSD1表达诱导卵巢癌细胞自噬的机制研究第55-64页
    4.1 实验材料第55-56页
        4.1.1 实验细胞第55页
        4.1.2 实验试剂第55页
        4.1.3 实验主要溶剂第55-56页
        4.1.4 实验耗材第56页
        4.1.5 实验仪器第56页
    4.2 实验方法第56页
        4.2.1 细胞培养第56页
        4.2.2 Western blotting第56页
        4.2.3 免疫荧光第56页
    4.3 数据处理及统计学分析第56页
    4.4 实验结果第56-61页
        4.4.1 饥饿和雷帕霉素诱导卵巢癌细胞自噬第56-57页
        4.4.2 LSD1参与饥饿和雷帕霉素诱导的细胞自噬过程第57-59页
        4.4.3 LSD1通过mTOR信号通路调节细胞自噬第59-61页
    4.5 讨论第61-64页
结论与展望第64-65页
    结论第64页
    展望第64-65页
参考文献第65-76页
综述第76-84页
    参考文献第81-84页
致谢第84-85页
攻读硕士学位期间所发表的论文及参与的课题第85页

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