中文摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-13页 |
英文缩略词(Abbreviation) | 第14-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第一部分 JuA对LPS诱发的BV-2细胞神经炎症的影响 | 第18-37页 |
1 实验材料和仪器 | 第18-20页 |
1.1 细胞株 | 第18页 |
1.2 药物 | 第18页 |
1.3 主要试剂 | 第18页 |
1.4 主要试剂配制 | 第18-19页 |
1.5 主要仪器 | 第19-20页 |
2 实验方法 | 第20-24页 |
2.1 细胞复苏 | 第20页 |
2.2 细胞传代和培养 | 第20页 |
2.3 细胞冻存 | 第20-21页 |
2.4 细胞计数 | 第21页 |
2.5 细胞分组 | 第21页 |
2.6 JuA对BV-2细胞存活率的影响(MTT法) | 第21页 |
2.7 Griess法检测JuA对LPS诱导BV-2细胞NO释放的影响 | 第21-22页 |
2.8 Westernblot法检测CD11b蛋白的表达 | 第22页 |
2.9 激光共聚焦观察JuA对LPS刺激BV-2细胞形态变化的影响 | 第22页 |
2.10 RT-PCR检测BV-2细胞iNOS、TNF-α、IL-1β、COX-2mRNA表达水平 | 第22-24页 |
2.11 Westernblot法检测iNOS、COX-2蛋白表达 | 第24页 |
2.12 统计学方法 | 第24页 |
3 结果 | 第24-36页 |
3.1 JuA对BV-2细胞存活率的影响(MTT法) | 第24-25页 |
3.2 JuA对LPS诱导BV-2细胞NO水平的影响 | 第25-26页 |
3.3 JuA对CD11b表达的调节作用 | 第26页 |
3.4 JuA对LPS诱导BV-2细胞形态变化的影响 | 第26-27页 |
3.5 JuA对LPS诱导BV-2细胞TNF-α、IL-1β、iNOS、COX-mRNA表达水平的影响 | 第27-34页 |
3.6 JuA对LPS诱导BV-2细胞iNOS、COX-2蛋白表达的影响 | 第34-36页 |
4 讨论 | 第36页 |
4.1 LPS与小胶质细胞激活 | 第36页 |
4.2 BV-2细胞炎症发生的表现 | 第36页 |
5 小结 | 第36-37页 |
第二部分 JuA抑制LPS诱发BV-2细胞神经炎症的作用机制. | 第37-50页 |
1 实验材料和仪器 | 第37-39页 |
1.1 细胞株 | 第37页 |
1.2 药物 | 第37页 |
1.3 主要试剂 | 第37页 |
1.4 主要试剂配制 | 第37-38页 |
1.5 主要仪器 | 第38-39页 |
2 实验方法 | 第39-42页 |
2.1 细胞复苏、传代、培养和冻存 | 第39页 |
2.2 实验分组及药物处理 | 第39页 |
2.3 细胞总蛋白提取 | 第39-40页 |
2.4 细胞核蛋白和细胞质蛋白分离 | 第40页 |
2.5 蛋白含量的测定 | 第40-41页 |
2.6 SDS-PAGE凝胶电泳 | 第41页 |
2.7 免疫荧光染色 | 第41-42页 |
2.8 统计学方法 | 第42页 |
3 结果 | 第42-48页 |
3.1 JuA抑制NF-κB蛋白的表达 | 第42-44页 |
3.2 JuA激活Nrf2/ARE通路上调HO-1蛋白表达 | 第44-46页 |
3.3 JuA对BV-2细胞PI3K/Akt调控Nrf2蛋白的影响 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-49页 |
4.1 NF-κB与神经炎症 | 第48页 |
4.2 Nrf2与神经炎症 | 第48页 |
4.3 Akt与Nrf2 | 第48-49页 |
5 小结 | 第49-50页 |
第三部分 JuA对小胶质细胞神经炎症引发的神经元损伤的影响 | 第50-62页 |
1 实验材料和仪器 | 第50-52页 |
1.1 细胞株 | 第50页 |
1.2 药物 | 第50页 |
1.3 主要试剂 | 第50-51页 |
1.4 主要试剂配制 | 第51页 |
1.5 主要仪器 | 第51-52页 |
2 实验方法 | 第52-55页 |
2.1 细胞复苏、传代、培养和冻存 | 第52页 |
2.2 实验分组 | 第52页 |
2.3 JuA对活化的BV-2细胞条件培养液损伤HT-22细胞的影响(MTT法) | 第52-53页 |
2.4 荧光显微镜观察DAPI染色 | 第53页 |
2.5 流式细胞仪检测细胞凋亡率(Annexin-V/PI双染) | 第53页 |
2.6 Westernblot法检测Cleaved-caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白的表达 | 第53-55页 |
3 结果 | 第55-60页 |
3.1 JuA条件培养液对HT-22细胞存活率的影响 | 第55-57页 |
3.2 JuA对L-CM导致的HT-22细胞凋亡的影响 | 第57-60页 |
4 讨论 | 第60-61页 |
4.1 胶质细胞与神经元细胞体外共培养模型的建立 | 第60-61页 |
4.2 凋亡的检测 | 第61页 |
5 小结 | 第61-62页 |
总结 | 第62-65页 |
实验线路图 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-70页 |
综述 | 第70-83页 |
参考文献 | 第81-83页 |
附录 | 第83-84页 |
个人简历 | 第83页 |
硕士期间发表的科研论文 | 第83-84页 |
致谢 | 第84页 |