摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 绪论 | 第13-27页 |
1.1 引言 | 第13-14页 |
1.2 构树研究概况 | 第14-15页 |
1.3 构树对环境胁迫的适应机制 | 第15-17页 |
1.4 MYB转录因子研究进展 | 第17-22页 |
1.4.1 MYB转录因子的分类 | 第18页 |
1.4.2 R2R3-MYB的抗逆研究进展 | 第18-20页 |
1.4.3 TT2类MYB的研究进展 | 第20-22页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第22-24页 |
1.6 本研究的创新点 | 第24页 |
1.7 研究技术线路 | 第24-27页 |
2 构树组培体系建立及镉胁迫响应生理 | 第27-39页 |
2.1 实验材料 | 第27-28页 |
2.1.1 植物材料 | 第27页 |
2.1.2 常用试剂 | 第27-28页 |
2.1.3 药品配置 | 第28页 |
2.2 实验方法 | 第28-29页 |
2.2.1 构树无菌苗的获得 | 第28页 |
2.2.2 构树组培体系建立 | 第28页 |
2.2.3 构树Cd胁迫浓度及时间确定 | 第28-29页 |
2.2.4 相关生理指标的测定 | 第29页 |
2.2.5 数据处理与分析 | 第29页 |
2.3 实验结果与分析 | 第29-37页 |
2.3.1 构树无菌苗的获得 | 第29页 |
2.3.2 构树组培体系 | 第29-30页 |
2.3.3 构树Cd胁迫浓度及时间确定 | 第30-32页 |
2.3.4 构树抗镉胁迫生理响应 | 第32-37页 |
2.4 本章讨论 | 第37-38页 |
2.5 本章小结 | 第38-39页 |
3 镉胁迫下构树转录组分析 | 第39-71页 |
3.1 实验材料 | 第39页 |
3.1.1 植物材料 | 第39页 |
3.1.2 常用试剂 | 第39页 |
3.1.3 药品配置 | 第39页 |
3.2 实验方法 | 第39-42页 |
3.2.1 RNA分离、文库构建及测序 | 第39-40页 |
3.2.2 转录组组装机基因功能注释 | 第40-41页 |
3.2.3 基因表达水平的定量化及差异表达分析 | 第41页 |
3.2.4 差异表达基因的表达验证 | 第41-42页 |
3.2.5 数据处理与分析 | 第42页 |
3.3 实验结果与分析 | 第42-67页 |
3.3.1 测序结果及组装 | 第42-43页 |
3.3.2 基因注释及功能分析 | 第43-46页 |
3.3.3 DEGs的一般表达模式 | 第46-58页 |
3.3.4 响应镉胁迫的基因鉴定 | 第58-61页 |
3.3.5 部分代表基因的定量表达分析 | 第61-67页 |
3.4 本章讨论 | 第67-70页 |
3.5 本章小结 | 第70-71页 |
4 构树MYB转录因子的筛选及镉响应分析 | 第71-97页 |
4.1 实验材料 | 第71页 |
4.1.1 植物材料 | 第71页 |
4.1.2 常用试剂 | 第71页 |
4.1.3 药品配置 | 第71页 |
4.2 实验方法 | 第71-73页 |
4.2.1 构树MYB转录因子的筛选及生物信息分析 | 第71-72页 |
4.2.2 cDNA准备及qRT-PCR分析 | 第72-73页 |
4.2.3 数据处理与分析 | 第73页 |
4.3 实验结果与分析 | 第73-90页 |
4.3.1 构树候选MYB家族基因的序列特征 | 第73-74页 |
4.3.2 构树R2R3-MYB转录因子的进化分析 | 第74-75页 |
4.3.3 构树R2R3-MYB的亚细胞定位预测 | 第75-76页 |
4.3.4 构树R2R3-MYB对镉胁迫的响应分析 | 第76-90页 |
4.4 本章讨论 | 第90-95页 |
4.5 本章小结 | 第95-97页 |
5 构树BpTT2及BpMYB6基因的抗镉功能分析 | 第97-133页 |
5.1 实验材料 | 第97-98页 |
5.1.1 植物材料 | 第97页 |
5.1.2 菌株与载体 | 第97页 |
5.1.3 主要试剂药品 | 第97页 |
5.1.4 药品及培养基制备 | 第97-98页 |
5.1.5 引物合成与重组载体测序 | 第98页 |
5.2 实验方法 | 第98-105页 |
5.2.1 BpTT2及BpMYB6基因ORF的扩增确认 | 第98-99页 |
5.2.2 植物过表达载体prokⅡ-BpTT2及prokⅡ-BpMYB6的构建 | 第99-102页 |
5.2.3 构树的瞬时遗传转化 | 第102-103页 |
5.2.4 转化构树的抗镉功能分析 | 第103-104页 |
5.2.5 BpTT2及BpMYB6对下游相关基因的表达调控 | 第104-105页 |
5.3 结果与分析 | 第105-128页 |
5.3.1 BpTT2及BpMYB6基因的序列特征 | 第105-110页 |
5.3.2 植物过表达载体prokⅡ-BpTT2和prokⅡ-BpMYB6的构建 | 第110-111页 |
5.3.3 瞬时转化BpTT2及BpMYB6构树的表达检测 | 第111-113页 |
5.3.4 BpTT2基因的抗镉功能 | 第113-120页 |
5.3.5 BpMYB6基因的抗镉功能 | 第120-128页 |
5.4 本章讨论 | 第128-130页 |
5.4.1 BpTT2的表达能有效改善植株的抗镉能力 | 第128-129页 |
5.4.2 BpMYB6的表达能增强植株的抗镉响应功能力 | 第129-130页 |
5.5 本章小结 | 第130-133页 |
6 结论与展望 | 第133-137页 |
6.1 结论 | 第133-134页 |
6.2 研究展望 | 第134-137页 |
参考文献 | 第137-159页 |
附录A | 第159-163页 |
附录B | 第163-199页 |
附录C (攻读学位期间的主要学术成果) | 第199-201页 |
致谢 | 第201页 |