| 致谢 | 第5-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第14-24页 |
| 1 绪论 | 第24-56页 |
| 1.1 系统素研究进展 | 第24-28页 |
| 1.1.1 系统素在系统性抗性反应中的作用 | 第25-26页 |
| 1.1.2 系统素受体的发现 | 第26-27页 |
| 1.1.3 系统素/茉莉酸介导的系统性抗性反应 | 第27-28页 |
| 1.2 茉莉酸研究进展 | 第28-40页 |
| 1.2.1 茉莉酸的发现 | 第28-29页 |
| 1.2.2 茉莉酸的生物学功能 | 第29-30页 |
| 1.2.3 茉莉酸的生物合成 | 第30-36页 |
| 1.2.4 茉莉酸生物合成的调控 | 第36-37页 |
| 1.2.5 茉莉酸的代谢及其衍生物 | 第37-40页 |
| 1.3 茉莉酸的信号转导途径 | 第40-51页 |
| 1.3.1 茉莉酸受体COI1 | 第40-41页 |
| 1.3.2 抑制子JAZ | 第41-43页 |
| 1.3.3 核心转录因子MYC2 | 第43-49页 |
| 1.3.4 中介体亚基MED25 | 第49-51页 |
| 1.4 茉莉酸信号的消减/终止 | 第51-54页 |
| 1.4.1 JA-Ile的代谢和转运 | 第51-52页 |
| 1.4.2 稳定JAZ的从头合成 | 第52-53页 |
| 1.4.3 BHLH Ⅲd家族的JAMs类转录抑制因子 | 第53页 |
| 1.4.4 依赖于发育时期的茉莉酸信号减弱 | 第53-54页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第54-56页 |
| 2 番茄MED25作为MYC2共激活因子正向调控茉莉酸信号 | 第56-78页 |
| 2.1 引言 | 第56-57页 |
| 2.2 材料与方法 | 第57-69页 |
| 2.2.1 植物材料 | 第57页 |
| 2.2.2 相关菌株 | 第57页 |
| 2.2.3 相关质粒 | 第57-58页 |
| 2.2.4 生物信息分析学软件及数据库网站 | 第58页 |
| 2.2.5 相关生化试剂 | 第58-59页 |
| 2.2.6 主要仪器设备 | 第59-60页 |
| 2.2.7 植物培养 | 第60页 |
| 2.2.8 基因克隆与载体构建 | 第60-64页 |
| 2.2.9 番茄稳定转基因材料的获取 | 第64-65页 |
| 2.2.10 机械损伤处理 | 第65页 |
| 2.2.11 植物基因组DNA的提取 | 第65页 |
| 2.2.12 植物总RNA的提取 | 第65-66页 |
| 2.2.13 反转录cDNA的获取 | 第66-67页 |
| 2.2.14 RT-qPCR分析 | 第67页 |
| 2.2.15 植物总蛋白的提取 | 第67页 |
| 2.2.16 蛋白质免疫印迹(western blot) | 第67-68页 |
| 2.2.17 酵母双杂交实验 | 第68页 |
| 2.2.18 原核蛋白诱导表达和纯化 | 第68-69页 |
| 2.2.19 Pull-down实验 | 第69页 |
| 2.3 结果与分析 | 第69-77页 |
| 2.3.1 MED25低表达转基因材料MED25-AS (anti-sense)的获得 | 第69-70页 |
| 2.3.2 MED25正向调控机械损伤诱导的抗性基因表达 | 第70-71页 |
| 2.3.3 番茄和拟南芥的中介体亚基MED25高度保守 | 第71-72页 |
| 2.3.4 MED25与核心转录因子MYC2互作 | 第72-74页 |
| 2.3.5 MED25与JAZ7竞争性地结合MYC2(Y3H) | 第74-75页 |
| 2.3.6 MED25与JAZ7竞争性地结合MYC2(pull-down) | 第75-77页 |
| 2.4 讨论与小结 | 第77-78页 |
| 3 MYC2的靶标基因MTB负向调控茉莉酸信号响应 | 第78-107页 |
| 3.1 引言 | 第78-79页 |
| 3.2 材料与方法 | 第79-86页 |
| 3.2.1 植物材料 | 第79页 |
| 3.2.2 相关菌株 | 第79页 |
| 3.2.3 相关质粒 | 第79-80页 |
| 3.2.4 生物信息分析学软件及数据库网站 | 第80页 |
| 3.2.5 相关生化试剂 | 第80页 |
| 3.2.6 主要仪器设备 | 第80页 |
| 3.2.7 植物培养 | 第80页 |
| 3.2.8 基因克隆与载体构建 | 第80页 |
| 3.2.9 番茄稳定转基因材料的获取 | 第80-81页 |
| 3.2.10 外源茉莉酸甲酯(MeJA) | 第81页 |
| 3.2.11 机械损伤处理 | 第81页 |
| 3.2.12 昆虫饲喂 | 第81页 |
| 3.2.13 灰霉菌(Botrytis cinerea)侵染 | 第81-82页 |
| 3.2.14 Pst DC3000侵染 | 第82页 |
| 3.2.15 植物基因组DNA的提取 | 第82页 |
| 3.2.16 植物总RNA的提取 | 第82页 |
| 3.2.17 反转录cDNA的获取 | 第82页 |
| 3.2.18 RT-qPCR分析 | 第82-83页 |
| 3.2.19 植物总蛋白的提取 | 第83页 |
| 3.2.20 蛋白质免疫印迹(western blot) | 第83页 |
| 3.2.21 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第83-84页 |
| 3.2.22 原核蛋白诱导表达和纯化 | 第84页 |
| 3.2.23 凝胶迁移阻滞实验(EMSA) | 第84-85页 |
| 3.2.24 茉莉酸含量的测定 | 第85页 |
| 3.2.25 花青素含量的测定 | 第85-86页 |
| 3.3 结果与分析 | 第86-105页 |
| 3.3.1 过表达MYC2降低茉莉酸调控的抗性反应 | 第86-90页 |
| 3.3.2 MYC2直接调控一类MYC2-like转录因子MTB | 第90-95页 |
| 3.3.3 MTB负向调控茉莉酸响应 | 第95-105页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第105-107页 |
| 4 番茄MTB发挥负向调控功能的分子机理 | 第107-141页 |
| 4.1 引言 | 第107-108页 |
| 4.2 材料与方法 | 第108-112页 |
| 4.2.1 植物材料 | 第108-109页 |
| 4.2.2 相关菌株 | 第109页 |
| 4.2.3 相关质粒 | 第109-110页 |
| 4.2.4 生物信息分析学软件及数据库网站 | 第110页 |
| 4.2.5 相关生化试剂 | 第110页 |
| 4.2.6 主要仪器设备 | 第110页 |
| 4.2.7 植物培养 | 第110页 |
| 4.2.8 基因克隆与载体构建 | 第110页 |
| 4.2.9 番茄稳定转基因材料的获取 | 第110页 |
| 4.2.10 外源茉莉酸甲酯(MeJA) | 第110页 |
| 4.2.11 机械损伤处理 | 第110-111页 |
| 4.2.12 植物基因组DNA的提取 | 第111页 |
| 4.2.13 植物总RNA的提取 | 第111页 |
| 4.2.14 反转录cDNA的获取 | 第111页 |
| 4.2.15 RT-qPCR分析 | 第111页 |
| 4.2.16 植物总蛋白的提取 | 第111页 |
| 4.2.17 蛋白质免疫印迹(western blot) | 第111页 |
| 4.2.18 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第111页 |
| 4.2.19 酵母双杂交实验 | 第111页 |
| 4.2.20 原核蛋白诱导表达和纯化 | 第111页 |
| 4.2.21 Pull-down实验 | 第111页 |
| 4.2.22 凝胶迁移阻滞实验(EMSA) | 第111页 |
| 4.2.23 烟草瞬时转化实验 | 第111-112页 |
| 4.3 结果与分析 | 第112-139页 |
| 4.3.1 MTB的蛋白序列分析 | 第112-114页 |
| 4.3.2 MTB与MYC2竞争性地结合靶基因启动子区G-box基序 | 第114-120页 |
| 4.3.3 MTB1与MYC2形成异源二聚体 | 第120-122页 |
| 4.3.4 MTB不与MED25互作但影响MYC2-MED25的互作 | 第122-129页 |
| 4.3.5 MTB与JAZ蛋白互作,协同抑制茉莉酸信号 | 第129-135页 |
| 4.3.6 MTB1是一个转录抑制因子直接抑制TomLoxD的表达 | 第135-137页 |
| 4.3.7 MTB1蛋白表达量不受茉莉酸处理的影响 | 第137-139页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第139-141页 |
| 5 CRISPR/Cas9系统突变MTB创制抗虫番茄材料 | 第141-150页 |
| 5.1 引言 | 第141-142页 |
| 5.2 材料与方法 | 第142-144页 |
| 5.2.1 植物材料 | 第142页 |
| 5.2.2 相关菌株 | 第142-143页 |
| 5.2.3 相关质粒 | 第143页 |
| 5.2.4 生物信息分析学软件及数据库网站 | 第143页 |
| 5.2.5 相关生化试剂 | 第143页 |
| 5.2.6 主要仪器设备 | 第143页 |
| 5.2.7 植物培养 | 第143页 |
| 5.2.8 基因克隆与载体构建 | 第143页 |
| 5.2.9 番茄稳定转基因材料的获取 | 第143-144页 |
| 5.2.10 昆虫饲喂 | 第144页 |
| 5.2.11 植物基因组DNA的提取 | 第144页 |
| 5.2.12 植物总RNA的提取 | 第144页 |
| 5.2.13 反转录cDNA的获取 | 第144页 |
| 5.2.14 RT-qPCR分析 | 第144页 |
| 5.2.15 植物总蛋白的提取 | 第144页 |
| 5.2.16 蛋白质免疫印迹(western blot) | 第144页 |
| 5.3 结果与分析 | 第144-149页 |
| 5.3.1 CRISPR/Cas9系统产生MTB突变材料 | 第144-146页 |
| 5.3.2 mtb1-c和mtb1 mtb2-c中MTB1和MTB2转录水平和蛋白水平检测 | 第146-147页 |
| 5.3.3 CRISPR/Cas9系统突变MTB提高植株对昆虫的抗性 | 第147-148页 |
| 5.3.4 CRISPR/Cas9系统突变MTB对植物生长发育没有影响 | 第148-149页 |
| 5.4 讨论和小结 | 第149-150页 |
| 6 结论,讨论,创新点和展望 | 第150-159页 |
| 6.1 结论 | 第150-151页 |
| 6.2 讨论 | 第151-157页 |
| 6.2.1 MYC2和MTB形成自我调控的负反馈调控通路终止茉莉酸信号 | 第152-153页 |
| 6.2.2 MYC2-MED25功能复合体激活MTB是终止茉莉酸信号的默认机制 | 第153页 |
| 6.2.3 MTB通过影响MYC2-MED25转录激活复合体的功能终止茉莉酸信号 | 第153-154页 |
| 6.2.4 转录激活因子MYC2和转录抑制因子MTB1在结构与功能上的相关性 | 第154页 |
| 6.2.5 MTB1与JAZ蛋白互作的意义 | 第154-155页 |
| 6.2.6 MTB1蛋白的稳定性与功能的关系 | 第155-156页 |
| 6.2.7 MTB蛋白对植株生长发育和抗性的影响 | 第156-157页 |
| 6.3 创新点 | 第157页 |
| 6.4 展望 | 第157-159页 |
| 参考文献 | 第159-176页 |
| 附录 | 第176-182页 |
| 作者简介 | 第182页 |
