| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 前言 | 第10页 |
| 1.2 细胞凋亡 | 第10-13页 |
| 1.2.1 细胞凋亡的检测 | 第11-12页 |
| 1.2.1.1 形态学观察 | 第11页 |
| 1.2.1.2 生物化学实验方法 | 第11页 |
| 1.2.1.3 酶联免疫分析 | 第11页 |
| 1.2.1.4 流式细胞仪观察 | 第11-12页 |
| 1.2.1.5 分子生物学检测 | 第12页 |
| 1.2.2 细胞凋亡的分子机理 | 第12-13页 |
| 1.2.2.1 Bcl-2基因家族 | 第12页 |
| 1.2.2.2 抑癌基因p53 | 第12-13页 |
| 1.2.2.3 Caspase蛋白酶家族 | 第13页 |
| 1.3 细胞迁移 | 第13-15页 |
| 1.3.1 细胞迁移的检测 | 第13-14页 |
| 1.3.1.1 transwell实验 | 第13-14页 |
| 1.3.1.2 划痕实验 | 第14页 |
| 1.3.1.3 细胞隔离侵袭实验 | 第14页 |
| 1.3.1.4 微流体技术 | 第14页 |
| 1.3.2 细胞迁移相关因子 | 第14-15页 |
| 1.3.2.1 基质金属蛋白酶 | 第14-15页 |
| 1.3.2.2 血管生成因子VEGF | 第15页 |
| 1.4 不饱和脂肪酸对细胞凋亡及迁移影响的研究进程 | 第15-17页 |
| 1.4.1 共轭亚麻酸 | 第15页 |
| 1.4.2 参与不饱和脂肪酸对细胞凋亡及迁移作用的细胞信号 | 第15-17页 |
| 1.4.2.1 氧化应激 | 第16页 |
| 1.4.2.2 p38 MAPK信号通路 | 第16-17页 |
| 1.4.2.3 脂质过氧化物酶体增殖物激活受体-γ | 第17页 |
| 1.5 选题的意义 | 第17-18页 |
| 1.6 研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 细胞 | 第19页 |
| 2.1.2 材料 | 第19-21页 |
| 2.1.3 仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.2 试剂配制 | 第22-24页 |
| 2.2.1 药物配制 | 第22-23页 |
| 2.2.2 磷酸盐缓冲溶液 | 第23页 |
| 2.2.3 MTT溶液 | 第23页 |
| 2.2.4 Hoechst33342溶液 | 第23页 |
| 2.2.5 蛋白免疫印迹主要试剂配方 | 第23-24页 |
| 2.2.5.1 10%过硫酸胺 | 第23页 |
| 2.2.5.2 1X电泳缓冲液 | 第23页 |
| 2.2.5.3 转移缓冲液 | 第23-24页 |
| 2.2.5.4 PBST缓冲液 | 第24页 |
| 2.2.5.5 封闭剂 | 第24页 |
| 2.2.5.6 显影液 | 第24页 |
| 2.2.5.7 定影液 | 第24页 |
| 2.2.6 Giemsa染液的配制 | 第24页 |
| 2.2.7 Sorensen缓冲液的配制 | 第24页 |
| 2.3 实验方法 | 第24-33页 |
| 2.3.1 JEG-3细胞培养 | 第24-26页 |
| 2.3.1.1 细胞复苏 | 第25页 |
| 2.3.1.2 细胞传代 | 第25页 |
| 2.3.1.3 细胞冻存 | 第25-26页 |
| 2.3.2 细胞活力检测 | 第26页 |
| 2.3.3 BCA法检测蛋白浓度 | 第26-27页 |
| 2.3.4 细胞毒性测定 | 第27页 |
| 2.3.5 Hoechst 33342染色 | 第27页 |
| 2.3.6 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
| 2.3.7 划痕实验 | 第28页 |
| 2.3.8 Transwell侵袭实验 | 第28-29页 |
| 2.3.9 细胞内活性氧的检测 | 第29页 |
| 2.3.10 丙二醛和谷胱甘肽水平的检测 | 第29页 |
| 2.3.11 蛋白免疫印迹 | 第29-31页 |
| 2.3.11.1 电泳分离 | 第30页 |
| 2.3.11.2 转膜 | 第30-31页 |
| 2.3.11.3 封闭 | 第31页 |
| 2.3.11.4 一抗孵育 | 第31页 |
| 2.3.11.5 二抗孵育 | 第31页 |
| 2.3.11.6 ECL显影 | 第31页 |
| 2.3.12 统计分析 | 第31-33页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第33-50页 |
| 3.1 α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞活力的影响 | 第33页 |
| 3.2 α-金盏花酸和β-金盏花酸对LDH释放的影响 | 第33-35页 |
| 3.3 α-金盏花酸和β-金盏花酸对绒癌JEG-3细胞凋亡的诱导作用 | 第35-38页 |
| 3.3.1 荧光显微镜检测α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞凋亡诱导作用 | 第35-36页 |
| 3.3.2 流式细胞仪检测α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞凋亡率的影响 | 第36-37页 |
| 3.3.3 凋亡相关蛋白表达的检测 | 第37-38页 |
| 3.4 α-金盏花酸和β-金盏花酸对绒癌JEG-3细胞迁移的影响 | 第38-40页 |
| 3.4.1 Transwell实验检测绒癌JEG-3细胞迁移能力 | 第38-39页 |
| 3.4.2 划痕实验检测绒癌JEG-3细胞迁移能力 | 第39-40页 |
| 3.5 P38 MAPK参与α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞的作用 | 第40-43页 |
| 3.5.1 α-金盏花酸和β-金盏花酸对p38 MAPK活化的影响 | 第40-41页 |
| 3.5.2 SB203580拮抗α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞活力的抑制作用 | 第41-42页 |
| 3.5.3 SB203580拮抗α-金盏花酸和β-金盏花酸诱导JEG-3细胞凋亡的作用 | 第42-43页 |
| 3.5.3.1 SB203580对JEG-3细胞凋亡形态的影响 | 第42页 |
| 3.5.3.2 SB203580对JEG-3细胞凋亡相关蛋白表达的影响 | 第42-43页 |
| 3.5.4 SB203580拮抗α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞迁移的影响 | 第43页 |
| 3.6 氧化应激参与α-金盏花酸和β-金盏花酸对绒癌JEG-3细胞的作用 | 第43-48页 |
| 3.6.1 α-金盏花酸和β-金盏花酸诱导细胞内活性氧的积累 | 第43-45页 |
| 3.6.2 丙二醛和谷胱甘肽水平的变化 | 第45-46页 |
| 3.6.3 NAC、α-生育酚拮抗α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞活力的抑制作用 | 第46-48页 |
| 3.6.4 氧化应激介导p38 MAPK参与的α-金盏花酸和β-金盏花酸对JEG-3细胞的作用 | 第48页 |
| 3.7 讨论 | 第48-50页 |
| 第四章 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
