| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-20页 |
| 1 石磺科贝类研究进展 | 第15-16页 |
| 2 瘤背石磺、里氏拟石磺简介 | 第16页 |
| 3 蛋白质组测序技术研究进展 | 第16-18页 |
| 3.1 蛋白质组学概述 | 第16-17页 |
| 3.2 蛋白质组研究技术 | 第17页 |
| 3.3 蛋白质组学在贝类研究中的应用 | 第17-18页 |
| 4 两栖性生物皮肤相关研究 | 第18页 |
| 5 石磺科贝类皮肤相关研究 | 第18页 |
| 6 本研究的意义和主要内容 | 第18-20页 |
| 第二章 石蜡切片检测两种石磺背部皮肤细胞凋亡情况 | 第20-26页 |
| 1 材料与方法 | 第20-22页 |
| 1.1 实验样品采集 | 第20-21页 |
| 1.2 实验方法 | 第21-22页 |
| 1.2.1 组织切片制作 | 第21页 |
| 1.2.2 HE染色和TUNEL染色 | 第21-22页 |
| 1.2.3 组织观察 | 第22页 |
| 2 结果与分析 | 第22-25页 |
| 2.1 HE染色组织切片观察 | 第22-23页 |
| 2.2 TUNEL染色组织切片观察 | 第23-25页 |
| 3 讨论 | 第25-26页 |
| 第三章 瘤背石磺和里氏拟石磺背部皮肤蛋白质组分析及差异分析 | 第26-45页 |
| 1 材料与方法 | 第26-31页 |
| 1.1 主要试剂和仪器 | 第26-27页 |
| 1.2 方法 | 第27-31页 |
| 1.2.1 两种石磺的采集 | 第27-28页 |
| 1.2.2 蛋白提取 | 第28页 |
| 1.2.3 Bradford蛋白定量 | 第28-29页 |
| 1.2.4 两种石磺背部皮肤的SDS-PAGE电泳 | 第29页 |
| 1.2.5 Trypsin酶解 | 第29页 |
| 1.2.6 毛细血管高效液相色谱 | 第29-30页 |
| 1.2.7 两种石磺背部皮肤总蛋白质谱鉴定及定性定量分析 | 第30-31页 |
| 2 结果与分析 | 第31-43页 |
| 2.1 SDS-PAGE电泳分析 | 第31页 |
| 2.2 里氏拟石磺和瘤背石磺的蛋白质质谱鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3 SYM-1、SYM-2、SYM-3和SYM-4、SYM-5、SYM-6的生物学重复分析 | 第32页 |
| 2.4 对两种石磺总体蛋白进行GO注释分析 | 第32-33页 |
| 2.5 同源蛋白差异分析 | 第33-36页 |
| 2.5.1 瘤背石磺和里氏拟石磺同源序列比例的分布情况 | 第34页 |
| 2.5.2 两种石磺差异蛋白表达谱 | 第34-35页 |
| 2.5.3 对表达量差异的同源蛋白进行KEGG分析 | 第35-36页 |
| 2.6 两种石磺与环境适应性相关蛋白差异分析 | 第36-42页 |
| 2.7 两种石磺蜕皮相关蛋白的分析 | 第42页 |
| 2.8 与细胞分化和凋亡相关蛋白分析 | 第42-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶PAK2和14-3-3基因克隆及组织表达分析 | 第45-64页 |
| 1 材料与方法 | 第45-46页 |
| 1.1 样品来源 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂和仪器 | 第45-46页 |
| 2 方法 | 第46-48页 |
| 2.1 RNA提取和cDNA合成 | 第46页 |
| 2.2 丝氨酸苏氨酸蛋白激酶PAK2和14-3-3基因克隆 | 第46页 |
| 2.3 序列分析 | 第46-48页 |
| 2.4 PAK2和14-3-3基因在两种石磺中各组织定量分析 | 第48页 |
| 3 结果与分析 | 第48-62页 |
| 3.1 PAK2和14-3-3基因全长和蛋白结构预测 | 第48-60页 |
| 3.1.1 PAK2在瘤背石磺中的全长序列Os-PAK2 | 第48-52页 |
| 3.1.2 14-3-3在瘤背石磺中的全长序列Os-14-3-3和在里氏拟石磺中的全长Pr-14-3-3 | 第52-60页 |
| 3.2 Os-PAK2、Os-14-3-3和Pr-14-3-3荧光定量结果 | 第60-62页 |
| 3.2.1 Os-PAK2在瘤背石磺各组织中的定量结果及PAK2在里氏拟石磺各组织中定量结果 | 第60-62页 |
| 3.2.2 Os-14-3-3和Pr-14-3-3在各组织中的表达量检测 | 第62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 结论与展望 | 第64-67页 |
| 1 结论 | 第64-65页 |
| 2 展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-73页 |
| 附录 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
