| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| 1 稻瘟病菌 | 第9页 |
| 1.1 稻瘟病菌 | 第9页 |
| 1.2 稻瘟病菌中的信号传导机制 | 第9页 |
| 2 双组份信号系统 | 第9-10页 |
| 2.1 简单的双组分信号系统 | 第9-10页 |
| 2.2 杂合型双组份信号系统 | 第10页 |
| 3 双组份组氨酸激酶的研究进展 | 第10-14页 |
| 3.1 酿酒酵母中双组份信号系统的功能研究 | 第10-12页 |
| 3.2 其它丝状真菌中双组份信号系统的功能研究 | 第12-13页 |
| 3.3 稻瘟病菌中H K s的研究进展 | 第13-14页 |
| 4 本研究的意义 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-28页 |
| 1 试验材料 | 第16-17页 |
| 1.1 供试菌株与植物 | 第16页 |
| 1.2 主要化学试剂 | 第16页 |
| 1.3 实验常用培养基 | 第16-17页 |
| 2 实验方法 | 第17-28页 |
| 2.1 利用SOE-PCR技术进行基因敲除 | 第17-18页 |
| 2.2 一般PCR反应体系 | 第18-19页 |
| 2.3 SOE-PCR程序 | 第19-20页 |
| 2.4 PCR产物纯化 | 第20页 |
| 2.5 高效感受肽细胞的制备 | 第20页 |
| 2.6 细菌转化 | 第20-21页 |
| 2.7 质粒提取 | 第21-22页 |
| 2.8 稻瘟病菌基因组DNA的提取 | 第22页 |
| 2.9 稻瘟病菌基因组总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.10 RNA反转录cDNA | 第23页 |
| 2.11 Real-time PCR | 第23-24页 |
| 2.12 稻瘟病菌原生质体的制备 | 第24-25页 |
| 2.13 稻瘟病菌原生质体的转化及转化子的筛选 | 第25-26页 |
| 2.14 稻瘟病菌表型分析 | 第26-28页 |
| 2.14.1 菌落生长速率测定 | 第26页 |
| 2.14.2 菌落产孢量测定 | 第26页 |
| 2.14.3 大麦离体接种实验 | 第26页 |
| 2.14.4 水稻育苗及接种实验 | 第26-27页 |
| 2.14.5 水稻叶片离体接种实验 | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-46页 |
| 1 稻瘟病菌HKs家族基因在外界环境胁迫下的表达量变化 | 第28-29页 |
| 1.1 稻瘟病菌HKs基因在高渗下的表达量变化 | 第28页 |
| 1.2 稻瘟病菌HKs基因在盐胁迫下的表达量变化 | 第28-29页 |
| 2 稻瘟病菌MoHik2的敲除及生物功能分析 | 第29-43页 |
| 2.1 稻瘟病菌MoHik2的敲除突变体的获得 | 第29-30页 |
| 2.2 MoHik2的敲除突变体的生物功能分析 | 第30-41页 |
| 2.2.1 MoHik2的敲除突变体的菌落形态观察 | 第30-31页 |
| 2.2.2 MoHik2的敲除突变体的菌落生长速率统计 | 第31-32页 |
| 2.2.3 MoHik2敲除突变体分生孢子和附着孢的形成及产孢量分析 | 第32-33页 |
| 2.2.4 MoHik2敲除突变体分生孢子梗的形成 | 第33-34页 |
| 2.2.5 MoHik2敲除突变体致病性分析 | 第34-35页 |
| 2.2.6 MoHik2敲除突变体在不同渗透压下生长情况 | 第35-37页 |
| 2.2.7 MoHik2敲除突变体对H_2O_2的耐受性 | 第37-39页 |
| 2.2.8 MoHik2敲除突变体在杀真菌剂胁迫下的耐受性 | 第39-40页 |
| 2.2.9 ΔMoHik2突变体对铵根离子的同化力 | 第40-41页 |
| 2.3 ΔMoHik2突变体中相关基因的表达量变化 | 第41-43页 |
| 2.3.1 ΔMoHik2突变体中HKs家族基因的表达量变化 | 第41页 |
| 2.3.2 ΔMoHik2突变体中HKs下游基因的表达量变化 | 第41-42页 |
| 2.3.3 ΔMoHik2突变体中产孢相关基因表达量变化 | 第42-43页 |
| 3 稻瘟病菌MoHik3的敲除及生物功能分析 | 第43-46页 |
| 3.1 稻瘟病菌MoHik3的敲除 | 第43-44页 |
| 3.2 稻瘟病菌MoHik3敲除突变体的功能分析 | 第44-46页 |
| 3.2.1 稻瘟病菌AMoHik3突变体菌落形态分析 | 第44页 |
| 3.2.2 MoHik3敲除突变体致病性分析 | 第44-45页 |
| 3.2.3 MoHik3敲除突变体在不同渗透压下生长情况 | 第45-46页 |
| 4 讨论与小结 | 第46-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 附录1: QPCR引物序列 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
