| 摘要 | 第7-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-27页 |
| 1 小麦白粉病的危害及白粉菌发育 | 第13-14页 |
| 1.1 小麦白粉病的危害 | 第13页 |
| 1.2 小麦白粉菌的发育 | 第13-14页 |
| 2 植物抗病机制的研究 | 第14-16页 |
| 2.1 植物的抗病机制 | 第14-15页 |
| 2.2 植物对白粉菌的抗病机制 | 第15-16页 |
| 3 转录因子的研究 | 第16-18页 |
| 3.1 转录因子对植物的非生物抗性 | 第16-17页 |
| 3.2 转录因子对植物的生物抗性 | 第17-18页 |
| 4 NAC转录因子的研究 | 第18-24页 |
| 4.1 NAC转录因子的结构和功能 | 第18-19页 |
| 4.2 NAC转录因子表达调控研究 | 第19-24页 |
| 5 研究意义 | 第24-25页 |
| 本研究的技术路线 | 第25-27页 |
| 第二部分 研究结果 | 第27-67页 |
| 一、实验材料与方法 | 第27-41页 |
| 1、TaNACs同源序列的克隆 | 第27-29页 |
| 1.1 TaNACs同源序列的查询 | 第27页 |
| 1.2 TaNACs在三个染色体组中同源基因的克隆 | 第27-28页 |
| 1.3 TaNACs表达载体的构建 | 第28-29页 |
| 2、TaNACs基因的表达模式分析 | 第29-32页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.2 白粉菌诱导 | 第30页 |
| 2.3 植物总RNA的提取 | 第30-31页 |
| 2.4 植物总RNA的反转录 | 第31-32页 |
| 3、TaNACs转录激活活性的检测 | 第32-34页 |
| 3.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 3.2 酵母感受态的制备 | 第33页 |
| 3.3 TaNACs重组载体转化进入酵母感受态 | 第33页 |
| 3.4 TaNACs转录自激活活性的检测 | 第33-34页 |
| 4、TaNACs基因的亚细胞定位信息 | 第34-35页 |
| 4.1 试剂 | 第34页 |
| 4.2 原生质体的制备 | 第34-35页 |
| 4.3 原生质体转化 | 第35页 |
| 5 、利用瞬间表达体系研究TaNACs的白粉病抗性功能 | 第35-37页 |
| 5.1 实验材料 | 第35-36页 |
| 5.2 微弹制备 | 第36页 |
| 5.3 接种白粉菌和GUS细胞染色 | 第36-37页 |
| 5.4 脱色观察 | 第37页 |
| 6、VIGS沉默技术研究TaNACs基因的抗病功能 | 第37-39页 |
| 6.1 实验材料 | 第37页 |
| 6.2 重组病毒 | 第37-38页 |
| 6.3 体外转录重组病毒 | 第38页 |
| 6.4 接种重组病毒 | 第38-39页 |
| 6.5 白粉菌接种 | 第39页 |
| 7、TaNACs的小麦遗传转化 | 第39-41页 |
| 7.1 实验材料 | 第39-40页 |
| 7.2 目标基因的转化 | 第40-41页 |
| 7.3 转基因植株的表型鉴定 | 第41页 |
| 7.4 转基因植株的分子鉴定 | 第41页 |
| 二、研究结果 | 第41-62页 |
| 1、利用数字表达谱筛选广谱高抗白粉病材料中的差异表达基因 | 第41-42页 |
| 2、TaNACs同源序列的克隆 | 第42-46页 |
| 3、TaNACs转录激活活性的检测 | 第46-48页 |
| 4、TaNACs基因的亚细胞定位 | 第48-49页 |
| 5、TaNACs的表达分析 | 第49-53页 |
| 6、利用瞬间表达体系研究TaNACs的抗白粉病功能 | 第53-54页 |
| 7、利用VIGS技术体系研究TaNACs的白粉病抗病功能 | 第54-57页 |
| 8、TaNACs的小麦遗传转化 | 第57-59页 |
| 9、TaNACs的非寄主抗性研究 | 第59-62页 |
| 9.1 TaNACs和HvNAC6的序列比较 | 第59页 |
| 9.2 TaNACs受大麦白粉菌诱导表达的情况 | 第59-60页 |
| 9.3 利用瞬间表达系统研究HvNAC6-Bgt互作 | 第60页 |
| 9.4 利用VIGS体系研究TaNACs-Bgh互作 | 第60-62页 |
| 三、讨论与分析 | 第62-67页 |
| 1、TaNACs基因在细胞核内激活下游基因转录 | 第62页 |
| 2、TaNACs基因可能与JA/MeJA介导的抗病反应有关 | 第62-63页 |
| 3、小麦的抗病性受TaNACs表达量的影响 | 第63-64页 |
| 4、过量表达TaNACs的转基因植株对白粉菌的抗性提高 | 第64-65页 |
| 5、TaNACs在非寄主抗性中的作用 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-77页 |
| 附录 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
