| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 1 ,3-丙二醇概述 | 第12-14页 |
| 1.1.1 1 ,3-丙二醇理化特性 | 第12页 |
| 1.1.2 1 ,3-丙二醇的应用 | 第12-13页 |
| 1.1.3 1 ,3-丙二醇的生产方法 | 第13-14页 |
| 1.2 生物转化法生产1,3-丙二醇 | 第14-16页 |
| 1.2.1 1 ,3-PD的天然生产菌 | 第14页 |
| 1.2.2 1 ,3-PD的生物合成途径 | 第14-15页 |
| 1.2.3 生物合成途径中的关键酶及基因 | 第15-16页 |
| 1.3 1 ,3-丙二醇脱氢酶 | 第16-19页 |
| 1.3.1 PDOR的性质特点 | 第16-17页 |
| 1.3.2 PDOR的克隆表达 | 第17-18页 |
| 1.3.3 PDOR的晶体结构 | 第18-19页 |
| 1.4 生物法生产1,3-PD的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4.1 微生物发酵 | 第19-20页 |
| 1.4.2 酶法 | 第20页 |
| 1.4.3 全细胞转化法 | 第20-21页 |
| 1.5 生产1,3-PD微生物菌种资源开发 | 第21-24页 |
| 1.5.1 天然生产菌及其改良菌生产1,3-PD | 第21-22页 |
| 1.5.2 大肠杆菌作为异源宿主生产1,3-PD | 第22-23页 |
| 1.5.3 其他菌种作为异源宿主生产1,3-PD | 第23-24页 |
| 1.6 本课题研究的目的与意义 | 第24页 |
| 1.7 主要研究内容 | 第24-26页 |
| 第二章 酪酸梭菌的筛选及鉴定 | 第26-37页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料 | 第26-28页 |
| 2.2.1 样品采集及试验试剂 | 第26-27页 |
| 2.2.2 菌株和质粒 | 第27页 |
| 2.2.3 培养基的配制 | 第27页 |
| 2.2.4 仪器设备 | 第27-28页 |
| 2.3 实验方法 | 第28-33页 |
| 2.3.1 菌种富集及分离纯化 | 第28-29页 |
| 2.3.2 菌落及显微形态观察 | 第29页 |
| 2.3.3 生理生化鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3.4 16 SrDNA分子生物学鉴定 | 第30-33页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第33-36页 |
| 2.4.1 菌落形态观察 | 第33-34页 |
| 2.4.2 生理生化特征 | 第34-35页 |
| 2.4.3 16 SrDNA分子鉴定及系统发育树的构建 | 第35-36页 |
| 2.5 本章小结 | 第36-37页 |
| 第三章 酪酸梭菌1,3-丙二醇脱氢酶基因的克隆与表达及酶学性质研究 | 第37-53页 |
| 3.1 引言 | 第37页 |
| 3.2 实验材料 | 第37-39页 |
| 3.2.1 菌株和质粒 | 第37页 |
| 3.2.2 主要酶和试剂 | 第37-38页 |
| 3.2.3 培养基的配制 | 第38页 |
| 3.2.4 仪器设备 | 第38-39页 |
| 3.3 实验方法 | 第39-46页 |
| 3.3.1 PDOR编码基因的提取及鉴定 | 第39-41页 |
| 3.3.2 重组质粒的构建及转化 | 第41-42页 |
| 3.3.3 dhaT的表达 | 第42-43页 |
| 3.3.4 PDOR的纯化 | 第43-44页 |
| 3.3.5 PDOR酶活测定 | 第44-45页 |
| 3.3.6 酶学性质测定 | 第45-46页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第46-52页 |
| 3.4.1 重组质粒的构建 | 第46-47页 |
| 3.4.2 PDOR编码基因的序列分析 | 第47-48页 |
| 3.4.3 表达产物蛋白电泳分析 | 第48-49页 |
| 3.4.4 PDOR的纯化及酶活力测定 | 第49页 |
| 3.4.5 PDOR的酶学性质 | 第49-52页 |
| 3.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 第四章 酪酸梭菌及基因工程菌全细胞混合转化甘油生产1,3-PD研究 | 第53-62页 |
| 4.1 引言 | 第53页 |
| 4.2 材料 | 第53-54页 |
| 4.2.1 菌株 | 第53页 |
| 4.2.2 试剂 | 第53页 |
| 4.2.3 培养基、试剂的配制 | 第53-54页 |
| 4.2.4 仪器设备 | 第54页 |
| 4.3 实验方法 | 第54-56页 |
| 4.3.1 种子液的制备 | 第54页 |
| 4.3.2 制备全细胞 | 第54-55页 |
| 4.3.3 全细胞混合生产1,3-PD的转化条件优化 | 第55页 |
| 4.3.4 全细胞混合转化生产1,3-PD | 第55-56页 |
| 4.3.5 1 ,3-PD含量测定 | 第56页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第56-60页 |
| 4.4.1 标准曲线的绘制及HPLC图 | 第56-57页 |
| 4.4.2 底物浓度对全细胞转化的影响 | 第57-58页 |
| 4.4.3 C.butyricumYJH-09和BL21-pET-dhaT的混合质量比对全细胞转化的影响 | 第58-59页 |
| 4.4.4 辅酶NADH的添加量对全细胞转化的影响 | 第59-60页 |
| 4.4.5 全细胞混合转化 | 第60页 |
| 4.5 本章小结 | 第60-62页 |
| 第五章 全文总结与展望 | 第62-64页 |
| 5.1 主要结论 | 第62-63页 |
| 5.2 展望 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 在学期间发表的学术论文及其他科研成果 | 第70-72页 |
| 附录 | 第72-75页 |
