| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-36页 |
| 1.1 植物源杀虫剂作用机理研究进展 | 第15-16页 |
| 1.1.1 植物源杀虫剂概述 | 第15页 |
| 1.1.2 植物源杀虫剂作用靶标多样性和特殊性 | 第15-16页 |
| 1.2 作用于昆虫肌肉系统的杀虫剂及其机理 | 第16-29页 |
| 1.2.1 昆虫的肌肉系统 | 第16-18页 |
| 1.2.2 细胞内的钙稳态及调节机制 | 第18-25页 |
| 1.2.3 杀虫剂对昆虫肌肉系统的影响 | 第25-29页 |
| 1.3 雷公藤生物碱的杀虫作用研究进展 | 第29-33页 |
| 1.3.1 雷公藤生物碱化学 | 第29-32页 |
| 1.3.2 雷公藤生物碱的杀虫活性 | 第32-33页 |
| 1.3.3 雷公藤生物碱的杀虫机理 | 第33页 |
| 1.4 问题的提出及论文设计思路 | 第33-36页 |
| 第二章 雷公藤次碱对东方粘虫的致毒症状及组织病理学影响 | 第36-47页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-37页 |
| 2.1.1 供试材料 | 第36页 |
| 2.1.2 主要仪器及设备 | 第36页 |
| 2.1.3 试验方法 | 第36-37页 |
| 2.2 结果与分析 | 第37-45页 |
| 2.2.1 雷公藤次碱对粘虫的胃毒毒力 | 第37-38页 |
| 2.2.2 雷公藤次碱对粘虫的致毒症状 | 第38-42页 |
| 2.2.3 雷公藤次碱对粘虫的组织病理学影响 | 第42-45页 |
| 2.3 讨论 | 第45-46页 |
| 2.4 小结 | 第46-47页 |
| 第三章 雷公藤次碱对粘虫肌细胞毒力及胞内钙离子浓度的影响 | 第47-70页 |
| 3.1 材料与方法 | 第47-52页 |
| 3.1.1 供试材料 | 第47-48页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第48页 |
| 3.1.3 试验方法 | 第48-52页 |
| 3.1.4 数据统计与分析 | 第52页 |
| 3.2 结果与分析 | 第52-68页 |
| 3.2.1 肌细胞存活率及形态观察 | 第52-53页 |
| 3.2.2 雷公藤次碱对原代培养肌细胞的毒力 | 第53-54页 |
| 3.2.3 雷公藤次碱对肌细胞膜LDH漏出率的影响 | 第54-55页 |
| 3.2.4 雷公藤次碱对肌细胞形态及发育的影响 | 第55-56页 |
| 3.2.5 细胞外钙存在时,雷公藤次碱对胞内[Ca~(2+)]i的影响 | 第56-60页 |
| 3.2.6 细胞外钙存在/缺乏时,雷公藤次碱对胞内[Ca~(2+)]i的影响 | 第60-62页 |
| 3.2.7 雷公藤次碱对肌质网Ca~(2+)释放通道的影响 | 第62-63页 |
| 3.2.8 雷公藤次碱对鱼尼丁受体(RyR)Ca~(2+)释放通道的影响 | 第63-66页 |
| 3.2.9 雷公藤次碱对三磷酸肌醇受体(IP_3R)Ca~(2+)释放通道的影响 | 第66-68页 |
| 3.3 讨论 | 第68-69页 |
| 3.3.1 雷公藤次碱的作用靶标位于昆虫的肌细胞 | 第68页 |
| 3.3.2 肌质网上的钙通道可能是雷公藤次碱的作用靶标 | 第68-69页 |
| 3.4 小结 | 第69-70页 |
| 第四章 雷公藤次碱对粘虫转录组水平的影响及基因表达分析 | 第70-91页 |
| 4.1 材料与方法 | 第70-74页 |
| 4.1.1 供试材料 | 第70-71页 |
| 4.1.2 试验方法 | 第71-74页 |
| 4.1.3 数据统计与分析 | 第74页 |
| 4.2 结果与分析 | 第74-88页 |
| 4.2.1 粘虫总RNA提取 | 第74-75页 |
| 4.2.2 原始数据处理及EST拼接 | 第75-77页 |
| 4.2.3 编码蛋白框(CDS)预测及基因功能注释 | 第77页 |
| 4.2.4 KOG、GO及Pathway分析 | 第77-79页 |
| 4.2.5 差异基因表达分析 | 第79-81页 |
| 4.2.6 主要杀虫剂靶标基因鉴定 | 第81-82页 |
| 4.2.7 雷公藤次碱对粘虫基因表达量的影响 | 第82-84页 |
| 4.2.8 qRT-PCR验证转录组测序结果 | 第84页 |
| 4.2.9 雷公藤次碱对肌肉收缩/舒张相关基因表达的影响 | 第84-88页 |
| 4.3 讨论 | 第88-90页 |
| 4.3.1 转录组测序可为研究雷公藤次碱的杀虫分子机制奠定基础 | 第88-89页 |
| 4.3.2 雷公藤次碱杀虫作用与细胞内钙离子浓度失衡有关 | 第89页 |
| 4.3.3 雷公藤次碱和氯虫苯甲酰胺的杀虫分子机理的异同 | 第89-90页 |
| 4.4 小结 | 第90-91页 |
| 第五章 粘虫鱼尼丁受体基因全长获取及表达谱分析 | 第91-104页 |
| 5.1 材料与方法 | 第91-94页 |
| 5.1.1 供试材料 | 第91页 |
| 5.1.2 仪器设备 | 第91-92页 |
| 5.1.3 试验方法 | 第92-93页 |
| 5.1.4 数据统计与分析 | 第93-94页 |
| 5.2 结果与分析 | 第94-102页 |
| 5.2.1 粘虫RyR基因目的片段获取 | 第94页 |
| 5.2.2 粘虫RyR核酸序列分析 | 第94-95页 |
| 5.2.3 粘虫RyR氨基酸序列分析 | 第95-98页 |
| 5.2.4 粘虫RyR基因编码氨基酸多重序列比较 | 第98页 |
| 5.2.5 进化树分析 | 第98-101页 |
| 5.2.6 粘虫RyR基因在不同发育阶段的表达量 | 第101页 |
| 5.2.7 粘虫RyR在不同组织的表达量 | 第101-102页 |
| 5.3 讨论 | 第102-103页 |
| 5.3.1 不同物种鱼尼丁受体同源性存在差异 | 第102页 |
| 5.3.2 鱼尼丁受体基因在粘虫不同发育阶段和不同组织表达存在差异 | 第102-103页 |
| 5.4 小结 | 第103-104页 |
| 第六章 RyR基因在雷公藤次碱杀虫作用中的功能鉴定 | 第104-113页 |
| 6.1 材料与方法 | 第104-107页 |
| 6.1.1 供试材料 | 第104-105页 |
| 6.1.2 主要设备及试剂 | 第105页 |
| 6.1.3 试验方法 | 第105-107页 |
| 6.1.4 数据统计与分析 | 第107页 |
| 6.2 结果与分析 | 第107-111页 |
| 6.2.1 MsRyR基因片段PCR | 第107页 |
| 6.2.2 体外dsRNA合成 | 第107-108页 |
| 6.2.3 dsRNA对试虫死亡率和体重的影响 | 第108-109页 |
| 6.2.4 dsRNA对基因表达量的影响 | 第109-110页 |
| 6.2.5 雷公藤次碱对RNAi处理粘虫的影响 | 第110-111页 |
| 6.3 讨论 | 第111页 |
| 6.3.1 鱼尼丁受体在昆虫生长发育中发挥着重要作用 | 第111页 |
| 6.3.2 鱼尼丁受体是雷公藤次碱的作用靶标之一 | 第111页 |
| 6.4 小结 | 第111-113页 |
| 第七章 粘虫RyR同源模建及与雷公藤次碱分子对接 | 第113-142页 |
| 7.1 材料与方法 | 第113-115页 |
| 7.1.1 供试材料 | 第113-115页 |
| 7.1.2 试验方法 | 第115页 |
| 7.2 结果与分析 | 第115-139页 |
| 7.2.1 MsRyRNTD同源模建及评估 | 第115-121页 |
| 7.2.2 MsRyRSPRY1同源模建及评估 | 第121-125页 |
| 7.2.3 MsRIH1同源模建及评估 | 第125-128页 |
| 7.2.4 MsRIH2同源模建及评估 | 第128-131页 |
| 7.2.5 氯虫苯甲酰胺和雷公藤次碱与MsRyRNTD对接 | 第131-134页 |
| 7.2.6 氯虫苯甲酰胺和雷公藤次碱与MsRyRSPRY1对接 | 第134-136页 |
| 7.2.7 氯虫苯甲酰胺和雷公藤次碱与MsRIH对接 | 第136-139页 |
| 7.3 讨论 | 第139-140页 |
| 7.3.1 雷公藤次碱和氯虫苯甲酰胺在各预测结合口袋的结合能力存在差异 | 第139-140页 |
| 7.3.2 雷公藤次碱的作用位点可能存在于MsRIH2和MsRyRNTD上 | 第140页 |
| 7.4 小结 | 第140-142页 |
| 第八章 讨论与结论 | 第142-149页 |
| 8.1 讨论 | 第142-146页 |
| 8.1.1 RyR和IP3R是雷公藤次碱的重要作用靶标 | 第142-144页 |
| 8.1.2 雷公藤次碱和氯虫苯甲酰胺在RyR上的结合位点可能不同 | 第144-145页 |
| 8.1.3 雷公藤次碱的作用机理推测 | 第145-146页 |
| 8.2 结论 | 第146-147页 |
| 8.3 本研究创新点 | 第147页 |
| 8.4 有待进一步解决的问题 | 第147-149页 |
| 参考文献 | 第149-162页 |
| 附录 | 第162-190页 |
| 致谢 | 第190-191页 |
| 作者简介 | 第191页 |
